Page 229 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 水 产 学 报 50 卷

40 40
y=−3.510x+39.38
35 35 y=−3.584x+38.93
R =0.999 3 R =0.999 3
2
2
30 30
C t 值 C t value 25 C t 值 C t value 25
20
20
15 15
10 10
5 5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
模板浓度对数 模板浓度对数
log of template concentration log of template concentration
(a) (b)
图 5 RT-qPCR 检测 IPNV 的标准曲线
(a) 为 IPNV 1 标准曲线，(b) 为 IPNV 5 标准曲线。
Fig. 5 Standard curve of IPNV detection by fluorescence quantitative PCR
(a) represents the IPNV 1 standard curve, (b) represents the IPNV 5 standard curve.
t
2.5 RT-qPCR 检测的稳定性 间 C 值的 SE 为 0.10~0.18，CV 为 0.52%~0.83%。
p-IPNV 5 批内重复性实验结果显示，各平行样本
3
7
5
对 浓 度 为 10 、 10 、 10 个 /μL 拷 贝 数 的 p-
间 C 值 均 值 的 SE 为 0.02~0.06， CV 为 0.27%~
t
IPNV 1 和 p-IPNV 5 进行批内和批间重复性 RT-
0.45% (表 3)。p-IPNV 5 批间重复性实验结果显示，
qPCR 检测。p-IPNV 1 批内重复性实验结果显示， 各 平 行 样 本 间 C 值 的 SE 为 0.03~0.05， CV 为
t
各 平 行 样 本 间 C 值 均 值 的 标 准 误 差 (SE) 为 0.12%~0.46%。各组批内和批间的 SE 均小于 0.2，
t
0.04~0.10，变异系数 (CV) 为 0.14%~0.70% (表 2)。 CV 均小于 1%，表明 RT-qPCR 重复性良好，检测
p-IPNV 1 批间重复性实验结果显示，各平行样本 结果具有稳定性和可靠性。

表 2 RT-qPCR 检测 p-IPNV 1 批内及批间重复
Tab. 2 In-group and inter-group replicates of p-IPNV 1 detected by RT-qPCR
重复 模板浓度(个/μL拷贝数) 循环数 cycles no. 平均值 标准误差 变异系数/%
repetition template concentration 1 2 3 4 5 average value SE CV
批内重复 10 7 14.38 14.5 14.66 14.48 14.48 14.50 0.10 0.70
in-group
10 5 21.58 21.53 21.58 21.63 21.58 21.58 0.04 0.16
10 3 28.21 28.3 28.3 28.25 28.29 28.27 0.04 0.14
批间重复 10 7 14.30 14.50 14.41 14.40 0.10 0.70
inter-group
10 5 21.31 21.58 21.66 21.52 0.18 0.83
10 3 28.07 28.27 28.36 28.23 0.15 0.52

表 3 RT-qPCR 检测 p-IPNV 5 批内及批间重复
Tab. 3 In-group and inter-group replicates of p-IPNV 5 detected by RT-qPCR

重复 模板浓度(个/μL拷贝数) 循环数 cycles no. 平均值 标准误差 变异系数/%
repetition template concentration 1 2 3 4 5 average value SE CV
批内重复 10 7 15.74 15.72 15.68 15.66 15.62 15.68 0.02 0.27
in-group
10 5 22.51 22.44 22.57 22.55 22.50 22.51 0.02 0.20
10 3 28.48 28.38 28.57 28.19 28.47 28.42 0.06 0.45
批间重复 10 7 15.69 15.74 15.57 15.67 0.05 0.46
inter-group
10 5 22.51 22.62 22.57 22.57 0.03 0.20
10 3 28.39 28.45 28.48 28.44 0.03 0.13

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