Page 231 - 《水产学报》2026年第2期
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2 期 水 产 学 报 50 卷
bp M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M 16 17 18 19 20 21 22 NC
1 000
700
500
400
300
200
100
(a)
bp M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 M 16 17 18 19 20 21 22 NC
1 000
700
500
400
300
200
100
(b)
图 6 IPNV 5 (a) 和 IPNV 1 (b) 分型引物 PCR 鉴定凝胶电泳图
1~22. 样本编号，M. 1 000 bp DNA Marker，NC. 阴性对照。下同。
Fig. 6 Gel electrophoresis of PCR identification of genogroup IPNV 5 (a) and IPNV 1 (b)
1-22. sample number, M. 1 000 bp DNA Marker, NC. negative control. The same below.
14
18
5
22
81
16
11
21
1
52
6
20 IPNV 1
2
4
100
47 15
10
13
7
12
50 19
8
9
3 IPNV 5
77 17
0.01
图 7 基于 22 株 IPNV VP2 基因片段的核苷酸序列比对绘制系统发育树
Fig. 7 Phylogenetic tree was drawn based on nucleotide sequence alignment of 22 strains of IPNV VP2 gene fragment
腺 细 胞 系 (RTG-2) 和 大 鳞 大 麻 哈 鱼 (O. tshaw- 的 RT-qPCR 为探针法，均能够对 IPNV 进行快速
ytscha) 胚胎细胞系 (CHSE-214) 等敏感细胞系中进 检测。但该标准中病毒基因分型仍需依赖测序，
行分离病毒后，用中和试验法或 ELISA 法进一步 而本研究设计的特异性 PCR 分型引物可通过常规
对病毒进行鉴定。该鉴定方法耗时长，免疫学试 琼脂糖凝胶电泳直接区分基因 1 型和 5 型毒株，
验操作步骤较多、难度较大且需要相关抗体，不 简化了分型流程并降低检测成本。此外，也有相
适合 IPNV 的快速及大量检测。我国现行行业标 关研究人员建立了多种 RT-PCR [19,28–30] 和 RT-qPCR
准 SN/T 1162—2020《传染性胰脏坏死病检疫技 法 [20,31] 用于 IPNV 检测，但都无法直接鉴定病毒的
术规范》已引入 RT-qPCR、逆转录-聚合酶链式反 基因型，均需要利用传统的系统进化分析方法对
应 (RT-PCR) 分子生物学检测技术。该行业标准中 毒株进行基因分型。而传统的基因分型方法需要
的 RT-qPCR 为 SYBR Green 荧光染料法，本研究 将病毒分离后利用 PCR 扩增基因序列进行系统进
https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
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