Page 40 - 《水产学报》2025年第12期
P. 40

何宏阳,等                                                                水产学报, 2025, 49(12): 129103





                    野生型              3 组重复, 每组 5 尾野生
                    setd7 +/+        型尼罗罗非鱼
                    突变体              3 sets of replicates, 5 wild-type

                                          +/+
                    setd7 +/-        per setd7  O. niloticus
                      1 月龄尼罗罗非鱼
                      O. niloticus at 1 month
                      of age after birth
                                   3 组重复, 每组 5 尾突变体       氧气含量 O 2 : 2%;     视频采集尼罗罗非鱼活动情况,统计
                                   setd7  尼罗罗非鱼           二氧化碳含量 CO 2 : 0.1%;  死亡率、浮头情况
                                       +/-
                                   3 sets of replicates,  温度 T: 28 °C;       video collection of O. niloticus activity
                                               +/-
                                   5 mutants per setd7  O. niloticus  湿度 RH: 50%;  statistics, mortality rate and floating
                                                                             condition
                                                            (a)







                                        (b)                                    (c)











                                         (d)                                   (e)
                                     图 4    setd7  基因的敲除增强了尼罗罗非鱼的低氧耐受能力
              (a) 低氧处理实验模式图,(b) 低氧处理    0 h  时的情况,(c) 低氧处理  1.5 h  后的情况,(d) 低氧处理  2 h  后的情况,(e) 低氧处理  2.5 h  后的情况。
              蓝色箭头标注的是浮头的尼罗罗非鱼。红色箭头标注的是死亡的尼罗罗非鱼。
                               Fig. 4 Knockout of setd7 gene enhances the hypoxia tolerance of O. niloticus
              (a) diagram of the experimental pattern of hypoxia treatment. (b) the situation at 0 h of hypoxia treatment. (c) the situation after 1.5 h of hypoxia treat-
              ment. (d) the situation after 2 h of hypoxia treatment. (e) condition after 2.5 h of hypoxia treatment. Blue arrows are labeled O.niloticus with floating
              heads. Red arrows are labeled dead O. niloticus.

                                   野生型     setd 7 杂合子          然而,实际养殖过程中可能由于突发的极端天
                                   WT      setd 7+/-
                        100                                    气、赤潮、水华以及生产管理失误等多种因素
                                                               导致水体溶解氧含量急剧下降 。此外,大规
                                                                                           [19]
                         75
                     存活率/%  survival rate  50                  模苗种长途运输也面临低氧风险,导致鱼体状
                                                               态差甚至是出现死亡,给养殖户带来经济损失。

                         25                                        本研究首次利用 CRISPR/Cas9 基因编辑技
                                                               术在尼罗罗非鱼中实现了赖氨酸甲基转移酶基
                             P<0.000 1
                                                               因 setd7 的靶向突变,并成功获得敲除突变体
                          0   0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
                                                               F ,将雌性     F 和雄性野生型尼罗罗非鱼进行交
                                                                           0
                                        时间/h                    0
                                                                                      1
                                         time                  配,得到     23 bp  缺失的  F 杂合突变体,初步构
               图 5    用  Kaplan Meier 曲线分析  setd7 低氧生存能力       建了  setd7  基因敲除的尼罗罗非鱼。低氧胁迫实
                                             +/−
                                                                                +/−
                                           +/−
              Fig. 5 The survival abilities of setd7  under low oxygen  验结果显示,setd7 尼罗罗非鱼较野生型耐低
                conditions were analyzed using Kaplan Meier curves  氧能力显著增强。同时,在正常饲养情况下,
              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
                                                            7
   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45