Page 39 - 《水产学报》2025年第12期

何宏阳，等 水产学报, 2025, 49(12): 129103

bp M 1 2 2 2 2 2 2 2 1 1 2 1
1 000
700
500
400
300
200
100
1 2
(a) (c)
1.5 **

setd7的相对表达量 relative expression of setd7 0.5

WT:ATGGGCCTGCTCAGGAGTTCGATGGCGAGGGTCACCTGGT 1.0

0
+/-
setd7 : ATGGGCCTGC-----------------------ACCTGGT (-23 bp) 1 2
(b) (d)
图 3 setd7 基因种系遗传鉴定
(a) setd7 F 1 单胚胎鉴定酶切结果，M. marker 1 000；1. 野生型胚胎；2. 杂合子胚胎，下同；(b) setd7 基因编辑对尼罗罗非鱼蛋白质结构的影
响，SETD7-WT. 野生型尼罗罗非鱼 SETD7 蛋白质结构，SETD7-mutant. 突变体尼罗罗非鱼 SETD7 蛋白质结构；(c) setd7 F 1 单克隆测序结
+/−
果，红色字体为靶点序列；(d) RT-qPCR 检测野生型 (WT) 及突变体 setd7 尼罗罗非鱼中 setd7mRNA 水平，“**” P<0.01。
Fig. 3 setd7 gene germline genetic identification
(a) setd7 F 1 generation single embryo identification enzyme digestion results, M. standard material 1 000; 1. wild type, 2. heterozygous embryos, the
same below; (b) setd7 knockout O. niloticus protein structure prediction. SETD7-WT. wild type O. niloticus SETD7 protein structure; SETD7-mutant.
mutant O. niloticus SETD7 protein structure; (c) sequencing results of setd7 F 1 generation single clones, target sequences are in red font; (d) RT-qPCR
+/−
was used to detect the mRNA levels of setd7 in wild type and knockout mutant setd7 O. niloticus. "**" P<0.01.
32 位的赖氨酸残基进行甲基化修饰，可阻止低 使用孵化器孵化，这是进一步提高罗非鱼基因
氧诱导因子 HIF-1 与其下游基因启动子的结合， 编辑效率需要关注的方面。
[8]
从而抑制低氧信号通路相关基因表达 。研究 本研究成功获得了尼罗罗非鱼 setd7 突变
表明， SETD7 通过甲基化 FOXO3a 来调节细胞 的杂合子品系，发现其低氧耐受的特性。不仅
的 氧 化 损 伤 ； 在 响 应 DNA 损 伤 等 过 程 中 对选育耐低氧尼罗罗非鱼品系具有重要意义，

SETD7 同样起重要作用。上述报道提示 setd7 也为其他水产经济物种的耐低氧良种培育提供
可能在低氧耐受和细胞损伤缓解方面发挥积极 了参考。水体的溶解氧对于水生生物的生存和
作用。然而，对于 setd7 在尼罗罗非鱼等水产物 生长发育至关重要，溶解氧是水生生物有氧代
[14]
种上的生物学功能尚不清楚。 谢的主要限制因素 。当氧气的供应量不足以
因此，本研究首先比对了尼罗罗非鱼、奥 满足机体氧气需求量时会引起鱼类缺氧应激，
利亚罗非鱼、大口黑鲈、斑马鱼的 setd7 氨基酸 大大抑制鱼类生长，降低免疫能力，从而影响
序列，发现上述物种中同样包含保守的 SET 结 鱼类的健康 。已有研究显示，缺氧会显著抑
[15]
构域。实验利用 CRISPR 基因编辑技术在氨基 制尼罗罗非鱼的生长，同时尼罗罗非鱼感染无
[16]
酸保守区域设计靶位点，发现保守区域敲除目 乳链球菌后的死亡率也会显著增加 。上述研
的基因获得了高效的基因编辑效率。在尼罗罗 究表明，尼罗罗非鱼的生长、免疫水平和代谢
非鱼目的基因敲除过程中，需要特别注意尼罗 功能均与水中溶解氧含量密切相关 [17-18] 。在现
罗非鱼受精卵的注射方式和胚胎的孵化率。由 代化集约养殖过程中，养殖场通常会采用增氧
于尼罗罗非鱼是雌鱼含卵孵化，取卵注射后需 设备、换水等措施保持水体中溶解氧含量稳定。

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