Page 168 - 《水产学报》2025年第12期

徐成航，等 水产学报, 2025, 49(12): 129613

(GSH-Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、总抗氧化 明后进行封片。制作完成的切片，使用 Case
酶 (T-AOC)、过氧化氢酶 (CAT)]的活性及丙二 Viewer 2.2 软件观察和获取图像。
醛 (MDA) 含量。在血清指标测定过程中，从
1.7 通过 RT-qPCR 进行基因表达分析
−80 ℃ 冷冻箱取出血清样本，经解冻后，亦按
采用 Trizol 法从肠道组织中提取总 RNA，
照上述试剂盒说明检测血清生化指标，包括谷
草转氨酶 (GOT)、谷丙转氨酶 (GPT)、总胆固 随 后 利 用 gDNA 去 除 试 剂 盒 将 其 逆 转 录 为
醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、酸性磷酸酶 (ACP)、 cDNA。依据试剂盒说明书的要求，配制实时荧
光定量反应体系。在反应过程中，通过观察变
碱性磷酸酶 (AKP)。
性、退火及延伸阶段荧光信号的变化，再借助
1.6 肠道组织形态学观察
计算机软件分析 PCR 循环过程中的阈值循环数
将固定于多聚甲醛溶液中的肠组织在经过 (C 值)，进而计算出目标序列的相对含量。在
t
固定、脱水、包埋、切片、脱蜡以及染色处理 此过程中，以 β-actin 基因作为参考基因。表 2
后，再经过分化、水洗、蓝化，最终在脱水透 中详细列出了所使用的全部引物信息。

表 2 RT-qPCR 所用引物的核苷酸序列
Tab. 2 Nucleotide sequences of the primers used in RT-qPCR
基因 上游引物 (5′→3′) 下游引物(5′→3′)
gene forward primer sequence (5′→3′) reverse primer sequence (5′→3′)
β-肌动蛋白 β-actin CATCCTTCTTGGGTATGGAATCA TTCAGAATTTCATCATTGCTTCCA
谷胱甘肽过氧化物酶 gpx5 ATGCAGTACATAGAACTGAATGC TTCAGAATTTCATCATTGCTTCCA
超氧化物歧化酶 sod GCTTACAAGTCACCGCCTGT CAGAGTTGGGTGGTGGTACA
过氧化氢酶 cat TGTCACTACCAGAGGGACGG TCCTCTTTTCCTTCGGCGG
谷胱甘肽S-转移酶p gstp GACCTGAGACAGAAATTGGGC TTCCTTGAGGTTGCTTCGTGA
白细胞介素-8 il-8 GCACAGCAGGCAGCAGCATT ACAAACCACTTAACACTGGCAGGG
白细胞介素-1β il-β CAGGCAGAAGTGTCTCGCAC CATTTGCACAAATTGGTTTTCAGCC
核因子κB nf-κb CTGGAGGGACGATCTCCGA TCACAATCAACTTGTTCCTGAGAG
白细胞介素-10 il-10 TACCACATGCACAAGAGGGC CAACGGCCTTGTAGACACCT

1.8 数据分析 (P<0.05)，而二者之间无显著性差异 (P>0.05)；

每组原始数据均使用 Excel 软件进行了统 肌肉中，Y0.8 组的硒沉积量显著高于 S0.8 和
计处理，随后在 SPSS 24.0 软件中进行数据分 N0.8 组 (P<0.05)。值得注意的是，无论是对照
组还是实验组，其肝脏中硒的沉积量均远高于
析 。 数 据 的 正 态 性 和 同 质 性 分 别 通 过
肌肉中的沉积量。
Kolmogorov-Smirnov 检验和 Levene 检验进行评
估 。 后 续 的 多 重 比 较 采 用 Duncan 氏 法 ， 当 2.2 牛蛙生长性能和形体指标
P<0.05，则存在显著差异。各实验数据以“平均 经过 8 周的养殖实验，与对照组相比，各
值±标准误”表示。此外，图形表示使用 Graph- 实验组牛蛙的 AWGR 均有提高(表 4)。其中，
Pad Prism 9.0 软件创建。 Y0.8 和 S0.8 组 AWGR 显 著 高 于 对 照 组
(P<0.05)，而 N0.8 组虽得到提高，但差异不显
2 结果
著 (P>0.05)；各实验组之间 AWGR 无显著性差
异 (P>0.05)。同时，各实验组牛蛙的 FCR 均显
2.1 组织中硒沉积含量
著低于对照组 (P<0.05)。成活率方面，N0.8 组
与对照组 (CON) 相比，实验组 (Y0.8、S0.8、 显著高于 Y0.8、S0.8 和 CON组 (P<0.05)；Y0.8
N0.8) 均显著提高了肝脏和肌肉中硒的沉积量 和 S0.8 组与对照组相比有所提高，但无显著性
(P<0.05) (表 3)。此外，实验组中，Y0.8 组和 差异 (P>0.05)。TWGR 结果显示，N0.8 组显著
N0.8 组在肝脏中硒的沉积量显著高于 S0.8组 高 于 Y0.8、 S0.8 及 CON 组 (P<0.05)； 与 CON

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