Page 88 - 《水产学报》2025年第10期
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孙克龙，等                                                                水产学报, 2025, 49(10): 109607

                   胆汁酸    (bile acids, BA) 是胆汁的重要组成            1    材料与方法
                                                        [7]
              成分，在肝脏中由胆固醇合成并贮存于胆囊中 。
                                                               1.1    实验设计
              肝脏中合成的胆汁酸被称为初级胆汁酸(primary
              bile acids, PBAs)，初级胆汁酸进入肠道后在微                       实验饲料中的蛋白质由鱼粉、豆粕、菜粕
              生物作用下被转化成次级胆汁酸                 (secondary bile   和棉粕等提供，脂肪由等量的豆油和鱼油提供，
              acids, SBAs)，次级胆汁酸经过肝脏与肠道的重                      糖类主要由玉米淀粉提供。实验共设置                     2  组等
                                              [8]
              吸收作用后被转变为三级胆汁酸 。此外，按                             氮等脂的饲料：对照组            (control，29%  无氮浸出
              照结构划分，胆汁酸可以分为游离型胆汁酸                              物)、高糖组      (HC，41%   无氮浸出物)，饲料糖
              (free bile acids, FBAs) 和结合型胆汁酸      (conjug-    水平参考已有研究          [20-21] ，空余部分以微晶纤维
              ated  bile  acids,  CBAs)。 胆 酸  (cholic  acid,  CA)、  素填充。饲料原料粉碎后经          60 mm  筛网过滤，
              脱氧胆酸      (deoxycholic acid, DCA)、鹅脱氧胆酸          并根据饲料配方进行称重。将饲料原料逐级混
              (chenodeoxycholic acid, CDCA) 以及少量的石胆            合均匀后，喷洒适量的水，并使用小型实验制
              酸  (lithocholic acid, LCA) 均为游离型胆汁酸，             粒机   (MUZL 180，江苏牧羊集团有限公司) 进
              其与甘氨酸、牛磺酸等结合后形成结合型胆汁                             行制粒。实验饲料干燥后置于−20 ºC                冰箱中冷
              酸 [9-10] 。研究表明，胆汁酸作为胆汁的主要脂质                      藏备用。饲料配方及其概略养分含量如表                   1  所示。

              成分，不仅可以维持机体的胆固醇稳态，还可                             1.2    实验鱼和采样流程
              以作为信号转导分子和代谢调节剂进而调节机
                                                                   实  验  用  团  头  鲂  购  自  于  国  家  团  头  鲂  原  种  场
              体糖脂代谢机能 。例如，胆汁酸可以显著提
                              [11]
                                                               (湖北鄂州)，驯化过程持续             2  周，期间投喂商
              高牙鲆     (Paralichthys olivaceus)、大菱鲆  (Scoph-
                                                               品饲料    (32%  蛋白质和    5%  脂肪)。驯化结束后，
              thalmus maximus) 和中国花鲈      (Lateolabrax macu-
                                                               将  120  尾平均体重为      (44.69 ± 0.11) g  的团头鲂
              latus) 肠道脂肪酶及肝脏脂蛋白酯酶和肝脂酶活
                                                               随机分至     8  个体积相同的网箱中，即            2  个实验
              性  [12-14] ；此外，胆汁酸可通过激活法尼醇              X  受
                                                               组，每组     4  个平行。每日饱食投喂            3  次 (7:00、
              体  (farnesoid X receptor, FXR) 调节大菱鲆    [15]  与
                                                               12:00  和  17:00) 上述实验饲料，实验期间，水温
              军曹鱼     (Rachycentron canadum) 的脂肪代谢机
                                                               控制在    26~31 °C，溶解氧      6.0 mg/L，总氨氮和
              能  [16] ，并影响红鳍东方鲀        (Takifugu rubripes) 肌
              肉中的脂肪酸组成           [17] 。有研究显示，高糖饲               亚硝酸盐分别为         0.2  和  0.005 mg/L。养殖  12  周
                                                               后，将鱼饥饿       24 h  后取样。每个网箱随机选择
              喂尼罗罗非鱼         (Oreochromisniloticus) 会导致其
                                                               4  尾 实 验 鱼 ， 用 浓 度 为     100  mg/L  的  MS-222
              糖脂代谢紊乱，胆汁酸成分变化，而通过改变
                                                               (Sigma，美国) 麻醉后抽血。血液在              4 °C 3 500
              肠道和肝脏中胆汁酸分布可以改善高糖引起的
                                                               r/min  条件下离心    10 min，将血浆保存在−40 °C
              代谢紊乱      [18] 。然而，长期饲喂高糖饲料对鱼
                                                               冰箱中备用。此外，快速分离肝脏、胆囊与后
              体胆汁酸成分的系统影响及其深入分析尚未见
                                                               肠，并将样品保存在−80 °C冰箱内备用。本研
              报道。
                                                               究获得了南京农业大学实验动物管理和使用伦
                   团 头 鲂   (Megalobrama  amblycephala) 为 鲤
                                                               理委员会批准        (SYXK (苏)2021-0086)，实验过
              科  (Cyprinidae) 鲂属  (Megalobrama) 鱼类，是我
                                                               程中操作人员严格遵守南京农业大学伦理规范，
              国淡水养殖的优良品种之一 。鉴于其草食性
                                         [19]
                                                               并按照南京农业大学伦理委员会制定的规章制
              特性，饲料中会添加大量糖类以节约蛋白用量，
                                                               度执行。

                                [1]
              进而降低饲料成本 。然而，长期投喂高糖饲
              料会导致糖原与脂肪过度沉积，并诱发肝胆疾                             1.3    饲料概略养分分析
              病，最终导致其抗逆性降低。基于此，明确团                                 实验饲料概略养分含量的测定方法：(1) 饲
              头鲂体内的主要胆汁酸成分及高糖饲料对其的                             料称重后于      105 ºC  烘箱烘至恒重，得出水分含
              影响，不仅可在一定程度上揭示鱼体肝胆疾病                             量；(2) 使用凯式定氮仪           (FOSS KT260，瑞士)
              的发病机制，还可为后续营养干预措施的制定                             测定饲料氮含量，结果乘以              6.25  得出粗蛋白含
              提供科学指导。                                          量；(3) 使用索氏抽提器于           60~75 ºC  水浴条件下

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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