Page 90 - 《水产学报》2025年第10期
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孙克龙,等                                                                水产学报, 2025, 49(10): 109607

              1 h  后离心   15 min (4 °C,13 800 × g),取上清液             表 2    团头鲂不同组织中检测出的胆汁酸种类
              至  LC  进样瓶中,用于超高效液相色谱-串联质                          Tab. 2    Types of bile acids detected in the different
              谱     (UHPLC-MS/MS) 分析。                                     tissues of M. amblycephala
                   流 动 相 条 件     使 用      Vanquish  (Thermo       胆汁酸       肝脏       胆囊       后肠     血浆
                                                                  bile acid  liver  gallbladder  hindgut  plasma
              Fisher Scientific,德国) 超高效液相色谱仪,通
                                                                DHLCA         √       √        √       √
              过液相色谱柱        Waters ACQUITY UPLC BEH C18         isoLCA                √
              (150×2.1 mm,1.7 μm,Waters,美国) 对目标化                LCA           √       √        √       √
              合物进行色谱分离。液相色谱                 A  相:5 mmol/L       7-ketoLCA             √                √
              的乙酸铵水溶液,B         相:乙腈,柱温箱温为           45 °C,     apoCA         √                        √
                                                                CDCA          √       √                √
              样品盘设为       4 °C,进样体积为       1 μL。
                                                                DCA           √       √        √       √

                   质谱条件  使用          Orbitrap Exploris 120  高
                                                                NCA                   √                √
              分辨质谱仪,以平行反应监测 (Parallel Reaction                  UCA                                    √
              Monitoring, PRM) 模式进行质谱分析。离子源参                    ACA           √       √
              数:Spray voltage = +3 500/−3 200 V,Sheath gas      CA            √       √        √       √
              (N ) flow rate = 40,Aux gas (N ) flow rate = 15,  GLCA                                   √
                                           2
                 2
                                                                GUDCA                 √
              Sweep gas (N ) flow rate = 0,Aux gas (N ) temper-
                                                  2
                          2
                                                                GCDCA                 √
              ature = 350 °C,Capillary temperature = 320 °C。
                                                                GDCA                           √

              1.5    数据分析                                       LCA-3S        √       √        √
                                                                GCA           √       √        √
                   采用   SPSS 26.0  软件分析数据的正态分布                  DCA-3S        √                √       √
              性,并进行齐性方差检验。然后采用                    Students’t    TLCA          √       √                √
              检 验 标 注 差 异 显 著 性 , 差 异 显 著 性 条 件 为               THDCA                                  √
              P<0.05。使用    GraphPad Prism9  软件制作柱状图,            TCDCA         √       √        √       √
              采用   SIMCA 18.0  软件进行主成分分析          (PCA) 和       TDCA          √                        √
                                                                T-α-MCA               √
              正交偏最小二乘判别分析               (OPLS-DA) 并作图。
                                                                TCA           √       √        √       √
              所有数据以平均值±标准误             (mean±SE) 表示。
                                                                TLCA-3S       √                        √

                                                                CDCA-24Gln    √                        √
              2    结果
                                                                TUDCA-3S                               √

                                                                TCA-3S        √                        √
              2.1    不同组织中检测到的胆汁酸种类
                                                                GCDCA-3Gln                             √
                   在 团 头 鲂 组 织 中 共 检 测 出      29  种 胆 汁 酸      注:检测出的胆汁酸标记√。
              (表  2)。其中,肝脏中检测出              17  种,分别为          Notes: Dtected bile acids marked with √.
              DHLCA、LCA、apoCA、CDCA、DCA、ACA、                    TUDCA-3S、TCA-3S     与  GCDCA-3Gln。

              CA、LCA-3S、GCA、DCA-3S、TLCA、TCDCA、
                                                               2.2    不同组织中的胆汁酸含量与类型
              TDCA、TCA、TLCA-3S、CDCA-24Gln          与  TCA-
              3S; 胆 囊 中 检 测 出      17  种 , 分 别 为  DHLCA、           肝脏中共检测出         6  种初级胆汁酸,7        种次
              isoLCA、 LCA、 7-ketoLCA、 CDCA、 DCA、               级胆汁酸     (图  1)。其中,TCDCA      和  TCA  为主要
              NCA、ACA、CA、GUDCA、GCDCA、LCA-3S、                   胆汁酸。与对照组相比,高糖组                  TCA、ACA、
              GCA、TLCA、TCDCA、T-α-MCA          与  TCA;后肠        CDCA、 LCA-3S、 GCA、 TDCA        与  TCDCA   含
              中检测出     10  种,分别为     DHLCA、LCA、DCA、            量均显著降低       (P<0.05),而   TLCA-3S  含量显著
              CA、GDCA、LCA-3S、GCA、DCA-3S、TCDCA                  升高   (P<0.01)。胆囊中共检测出到           8  种初级胆
              与  TCA;血浆中检测出         21  种,分别为     DHLCA、       汁 酸 , 7  种 次 级 胆 汁 酸 。 其 中 , TCDCA        和
              LCA、7-ketoLCA、apoCA、CDCA、DCA、NCA、                TCA  为主要胆汁酸。与对照组相比,高糖组
              UCA、CA、GLCA、DCA-3S、TLCA、THDCA、                   TCDCA  与  TCA  含量均显著升高          (P<0.05),而
              TCDCA、TDCA、TCA、TLCA-3S、CDCA-24Gln、               LCA-3S  与  LCA  含量均显著降低         (P<0.01)。后

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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