Page 61 - 《水产学报》2025年第6期

梁肖，等 水产学报, 2025, 49(6): 069605

ZZ ZZ+sox9-RNAi ZW
Gd Gd Gd Gd

Ms Ms Ms Ms
St.27

1 mm 1 mm 1 mm 1 mm
1 2 3 4

Cor
Cor Cor
St.21 Med Med Med Med
50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
5 6 7 8

St.27

50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
9 10 11 12

gc gc gc
sc
gc Cor Cor
Cor
Med Med
Med Med
50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
13 14 15 16

图版 Ⅰ sox9 敲低后 ZZ 胚胎性腺的表型变化
1~4. 体视显微镜下观察 sox9 敲低后，第 27 期 ZZ 性腺的外观形态变化。Gd. 性腺 (用黄色虚线圈出)，Ms. 中肾；5~16. H.E 染色观察 sox9
敲低后，第 21 期 (5~8)、27 期 (9~16) ZZ 性腺的内部结构变化。gc. 生殖细胞，sc. 支持细胞，Med. 髓质区，Cor. 皮质区 (黑色虚线代表皮
质和髓质的分界)。下同。
Plate Ⅰ Phenotypic changes of ZZ embryonic gonads after sox9 knockdown
1-4. the morphology changes of ZZ gonads of stage 27 after sox9 knockdown were observed by stereomicroscope. Gd. gonads (circle it with a yellow
dotted line), Ms. mesonephros; 5-16. H.E staining showed the structural changes of ZZ gonads of stage 21 (5-8) and 27 (9-16) after sox9 knockdown.
gc. germ cells, sc. sertoli cells, Med. medullary area, Cor. cortical area (the dashed black line represents the boundary between cortex and medulla). The
same below.

shRNA 处理后的 ZZ 胚胎中，第 21 期时，80.0% 腺 (髓质区高度退化，分布有大量的空腔结构
(12/15) 性腺向雌性方向逆转；第 25 期时，87.9% (图版Ⅳ-1，5) 相比，sox9 过表达后的 ZW 性腺
(29/33) 性腺彻底分化为雌性，性逆转率极高 尽管皮质区未完全退化成与 ZZ 性腺类似的单
2)。 细胞层，但髓质区明显变得致密，且出现少
(表
量雄性性腺的典型结构 (性索)，上面分布有
2.2 sox9 基因的功能获得研究
sertoli 支持细胞 (图版Ⅳ-2~4，6~8)，此时性腺
以上功能缺失实验表明，sox9 是中华鳖早 转向雄性分化方向，性逆转不彻底。

期雄性性腺形成的必需关键基因，其缺失会导 sox9 过表达后 ZW 胚胎性腺中雌雄特异性
致彻底的雄转雌性逆转。相反，为了确定 sox9 基因和蛋白的表达分布变化 RT-qPCR 结果
基因能否单独诱导中华鳖早期睾丸的分化通路， 显示，在过表达 sox9 后的第 27 期 ZW 性腺中，
从组织学和分子水平分析 sox9 过表达后的 ZW dmrt1 (图 3-a) 和 amh (图 3-b) mRNA 表达水平
胚胎是否能够发生性逆转。 显著上升，而 foxl2 (图 3-c) mRNA 表达则显著

sox9 过表达后 ZW 胚胎性腺的表型变化 性 下降。DMRT1 和 FOXL2 蛋白的免疫双标染色
腺切片 H.E 染色显示，与第 27 期对照组 ZW 性 结果显示，在 ZW 性腺中异位过表达 sox9 后，

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