Page 64 - 《中国药科大学学报》2026年第2期
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190                      学报   Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(2): 189 − 195  第 57 卷

                    甘青乌头    [Aconitum tanguticum (Maxim.) Stapf]  共振波谱仪(德国布鲁克公司);Rudolph Autopol IV
               是毛茛科乌头属多年生草本植物,广泛分布于西                            旋光仪(美国鲁道夫公司);Agilent 1 260 Infinity 高
               藏、青海、云南、四川等高海拔地区,为藏医常用药                          效液相色谱仪、Agilent Q-TOF-6 520 型质谱仪(美
               物“榜嘎”药材来源之一 。甘青乌头性凉,味苦,有                         国安捷伦公司);SSI/LabAlliance 半制备液相色谱仪
                                    [1]
               小毒,具有清热解毒的功效,常用于治疗肺炎、传染                          (美国   LabAlliance 公司);Alltech 3 300 ELSD  检测
               病发热、流行性感冒等 疾病。现代研究表明,甘                           器 、 Cosmosil  5C -AR-Ⅱ 制 备 色 谱 柱 ( 250  mm×
                                    [2]
                                                                                18
                                  [3]
               青乌头中含有生物碱 、黄酮 、酚苷 等多种类型                          20 mm, 5 μm)、分析色谱柱(250 mm× 4.6 mm, 5 μm)
                                         [4]
                                                [5]
               化学成分,具有抗炎 、抗菌 、抗病毒 及抗肿瘤                     [9]  (日本   Cosmosil 公司);100~200 目、200~300 目硅
                                                 [8]
                                        [7]
                                 [6]
               等药理作用。但目前甘青乌头化学成分的研究多聚                           胶(青岛海洋化工厂);RP-18 硅胶、硅胶              60 F254 薄
               焦于脂溶性生物碱类,大极性化学成分研究仍缺乏                           层色谱板(德国         Merck 公司);ODS RP-18(日本
                          [10]
               系统性探究 。既往研究显示,甘青乌头大极性部                           YMC  公 司 ) ; MCI 树 脂 ( 日 本 三 菱 化 学 公 司 ) ;
               位所含苷类成分能明显抑制腹腔注射醋酸导致的                            Sephadex LH-20(美国 Pharmacia 公司);甲醇、乙腈
               大鼠腹痛扭体反应,在大鼠急性免疫性炎症模型中                           (色谱级,上海星可高纯溶剂有限公司);实验用水
               表现出显著抗炎作用 。另有报道显示,甘青乌头                           (杭州娃哈哈集团有限公司),其他试剂均为市售分
                                  [11]
               中酚苷类成分可以抑制脂多糖(LPS)刺激下                    RAW     析纯。
               264.7 巨噬细胞肿瘤坏死因子          α(TNF-α)产生 。因
                                                      [12]
                                                                 2    提取分离
               此,进一步探索甘青乌头中极性较大成分(特别是苷
               类化合物),对阐明其药效物质基础具有重要意义。                               取干燥后的甘青乌头全草             60 kg,粉碎后加入
                    为此,本研究深入挖掘甘青乌头乙醇提取物的                        85%  乙醇,回流提取       3 次,每次   4 h。提取液合并后
               正丁醇萃取部位中的活性成分,从中分离纯化得到                           经减压压缩至无醇味,得到粗浸膏                (12.1 kg)。浸膏
               8 个苷类化合物,分别鉴定为            4-O-(β-D-吡喃葡萄糖         加水分散,加盐酸调           pH  至  3,等体积二氯甲烷萃
               基)-N-苯甲酰基-苯乙胺苷          (1)、N-(2'-β-D-吡喃葡萄       取;水层加氨水调节           pH  至  9,依次用二氯甲烷、
               糖基-5'-甲氧基苯基)-4-羟基-3-甲氧基邻氨基苯甲                     正丁醇萃取,经过减压浓缩得到各个萃取部位,
               酸甲酯    (2)、N-(2'-β-D-吡喃葡萄糖基-5'-羟基)-4-羟           其中正丁醇萃取部位           400 g。取正丁醇萃取部位,
               基-3-甲氧基邻氨基苯甲酸甲酯              (3)、红景天苷     (4)、   经  D101 大孔吸附树脂柱色谱分离,以乙醇-水
               苄醇-β-樱草糖苷       (5)、苯乙醇-β-D-木糖-(1''→6')-β-       (0∶100→95∶5) 梯度洗脱,得到        5 个流份   (Fr. A–E)。
               D-吡喃葡萄糖苷        (6)、4-羟基苯乙氧基-8-O-β-D-[6-         Fr. C  经硅胶  (200~300 目) 柱色谱,以二氯甲烷-甲
               O-(4-O-β-D-吡喃葡萄糖基)-阿魏酰基           ]-吡喃葡萄糖        醇  (30∶1→0∶100) 洗脱得到      Fr. C1–C7。Fr. C4 经
               苷  (7)、苯乙醇-α-L-阿拉伯糖-(1''→6')-吡喃葡萄糖               ODS  反相柱色谱、硅胶柱色谱及                Sephadex LH-
               苷  (8)。其中化合物       1 和  2 为新化合物,化合物         5、   20 柱 色 谱 反 复 分 离 , 最 后 用 半 制 备       HPLC  以
               6、8 为首次从甘青乌头中分离得到。本文对上述                          15%  乙腈-水等度洗脱纯化,得到化合物                  1 (t  =
                                                                                                          R
               化合物的结构解析进行了系统阐述。                                 32.298 min, 44.6 mg)、2 (t  = 35.043 min, 15.0 mg)、
                                                                                       R
                                                                4 (t  = 19.363 min, 1.0 g)。Fr. C5 经  ODS  反相柱
                1    材 料                                           R
                                                                色谱、硅胶柱色谱及           Sephadex LH-20 柱色谱梯度
                1.1    药 材                                      洗脱,最后用半制备          HPLC  以  17%  乙腈-水等度洗
                    甘青乌头采集于青海贵德县拉脊山,经青海大学                       脱纯化,得到化合物           3 (t  = 32.298 min, 14.6 mg)、
                                                                                       R
               杨仕兵教授鉴定为甘青乌头 [Aconitum tanguticum                5  (t   =  14.857  min,  45.0  mg)、 6  (t   =  20.345  min,
                                                                                               R
                                                                   R
               (Maxim.) Stapf] 全草。植物标本       (A20240705) 现存     75.1 mg)、8 (t  = 22.345 min, 35.1 mg)。Fr. C6 经
                                                                             R
               于中国药科大学中药制药系。                                    ODS  反相柱色谱、硅胶柱色谱梯度洗脱,最后用半
                1.2    仪器与试剂                                    制备   HPLC  以  17%  乙腈-水等度洗脱纯化,得到化
                    Shimadzu UV-2600i 型紫外光谱仪(日本岛津公              合物   7 (t =34.027 min, 34.6 mg)。化合物  1–8 的结
                                                                        R
               司);Tensor 27 型红外光谱仪、Avance-500 型核磁               构式见图     1。
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