Page 75 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
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第  57 卷第  1 期            葛 姮，等：五氟利多靶向        HSPA6 抑制黑色素瘤生长的作用研究                            69

               targeting  HSPA6  to  activate  the  p53/p21  signaling  axis,  providing  a  new  perspective  for  the  repositioning  of
               antipsychotic drugs in cancer treatment.
               Key words    melanoma; penfluridol; cell cycle arrest; apoptosis; HSPA6


               This  study  was  supported  by  the  Joint  Project  of  the  State  Administration  of  Traditional  Chinese  Medicine  and  the  Health
               Commission of Shandong Province (GZY-KJS-SD-2023-094)


                    皮肤黑色素瘤，作为一种源自皮肤黑色素细胞                        活性，特别是五氟利多对黑色素瘤                 A375 细胞周期
                          [1]
               的恶性肿瘤 ，因其高度的侵袭性和危险性，成为最                          和凋亡的影响，并通过药物亲和力反应靶点稳定性
               具威胁性的皮肤癌类型之一。尽管它在所有皮肤                            （drug affinity responsive target stability，DARTS）技
               癌中的占比仅为          1%，但不幸的是，它却是导致                  术探究了五氟利多的作用靶点。这不仅将为抗精
               75%  皮肤癌相关死亡病例的罪魁祸首               [2−3] 。对于早     神病药物治疗肿瘤再定位提供新视角，还将为黑色
               期黑色素瘤患者，广泛切除手术可实现治愈。然而，                          素瘤的治疗提供新的治疗靶点。
                                            [1]
               晚期患者的治疗仍面临严峻挑战 。传统化疗药物
                                                                 1    材 料
               如达卡巴嗪、顺铂等，虽能诱导              DNA  损伤或抑制胸
               苷酸合成酶，但疗效有限。近年来，靶向治疗和免                            1.1    试 剂
               疫疗法为晚期患者带来希望。BRAF                抑制剂（如，维              五氟利多（美国       MedChemExpress 公司）；胎牛
               莫非尼）通过阻断          MAPK  通路，显著改善         BRAF     血清（FBS）、丙酮酸钠（100 mmol/L）、青霉素-链霉
               V600E  突变患者的生存预后，但耐药性产生和疾病                       素（10 000 U/mL）、DMEM     培养基、RPMI-1640 培
                                          [4]
               复发仍是临床应用的主要问题 。免疫检查点抑制                           养基、Lipofectamine 3000 转染试剂（赛默飞世尔科
               剂（如，抗    PD-1 的纳武利尤单抗和帕博利珠单抗）                    技）；结晶紫、4%       组织细胞固定液、Hoechst 33342
               通过阻断     PD-1/PD-L1相互作用，重新激活           T  细胞     染色液、非变性组织/细胞裂解液、蛋白酶                   K、二甲
               抗肿瘤活性，其疗效与肿瘤             PD-L1 表达水平密切相           基亚砜（DMSO）、考马斯亮蓝、MTT              试剂、BCA    蛋
                 [5]
               关 。尽管如此，仅有约25%            的晚期患者在治疗后              白浓度测定试剂盒、胰蛋白酶细胞消化液（北京索
               3 年内保持无进展生存 。                                    莱 宝 科 技 有 限 公 司 ） ； 体 内 转 染 试 剂       In  vivo-
                                   [6]
                    在这一背景下，药物重定位作为一种开发更                         jetPEI（优宁维生物科技股份有限公司）；小干扰
               快、成本更低的药物研究方式，近年来逐渐受到                            RNA  病毒阴性对照（siRNA-NC/si-NC）、HSPA6 基
                   [7]
               关注 。它通过对已经批准用于临床的药物或处于                           因沉默的小干扰         RNA  慢病毒（si-HSPA6）、过表达
               临床前、临床研究中的候选药物进行再挖掘，寻找                           阴 性 对 照 质 粒 （ over-expression  negative  control
               其原有适应证范围之外的新用途。五氟利多作为                            plasmid， OE-NC） 、 过 表 达   HSPA6质 粒 （ HSPA6
               一种传统的二苯基丁基哌啶类抗精神病药物，主要                           over-expression plasmid，OE-HSPA6）（上海艾博思
               用于治疗精神分裂症 。已有研究表明，五氟利多                           生物科技有限公司）；HSPA6 抗体、Bax 抗体、Bcl-
                                  [8]
               在胶质母细胞瘤、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤中展现                           2 抗体、cyclin-D1 抗体、CDK4 抗体（武汉爱博泰克
               出一定作用。例如，在乳腺癌研究中，五氟利多通                           生物公司）；cleaved caspase-3 抗体、caspase3 抗体、
               过活性氧途径 、整合素途径             [10]  等影响乳腺癌细胞         p53 抗体、p21 抗体（英国         Abcam  公司）；山羊抗
                            [9]
               的迁移，并能诱导乳腺癌细胞凋亡，进而显著抑制                           IgG  抗体（美国     Cell Signaling Technology 公司）；
               乳腺癌荷瘤小鼠的肿瘤生长。在肺癌研究中，五氟                           Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂、周期检测试剂
               利多可以通过       SIRT1/PGC-1α  轴来抑制线粒体氧化             盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司）；高效
               磷酸化，减少      ATP  的产生，从而抑制肺癌细胞的进                  RIPA  裂解液（江苏康为世纪生物科技股份有限公
               展 。值得一提的是，小鼠长期经口给予五氟利多                           司）；SDS-PAGE    凝胶配置试剂盒（碧云天生物有限
                 [11]
               后未见明显不良反应 。然而，五氟利多对黑色素                           公司）；PVDF     膜（美国    Millipore 公司）。其余试剂
                                  [9]
               瘤的抗肿瘤活性尚未见报道，特别是其作用的分子                           均为市售分析纯。
               机制有待进一步研究。                                        1.2    仪 器
                    本研究评价了五氟利多对黑色素瘤的抗肿瘤                              5425 高速离心台式机（上海艾本德国际贸易有
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