Page 74 - 《渔业研究》2026年第3期

第 3 期 齐 贺： 液相色谱−串联质谱法同时检测水产养殖用投入品中 3 种酰胺醇类药物残留量 367

征离子碎片。以目标物与内标物的峰面积比值为纵 用 Waters BEH C 色谱柱、甲醇−水作为流动相对
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坐标、目标物浓度与内标浓度的比值为横坐标，绘 酰胺醇类药物进行分离分析。
制标准曲线，化合物标准溶液及试样溶液中的响应 2.1.2 质谱条件的优化
值均应在仪器检测的线性范围之内。 实验室采用蠕动泵，分别将 3 种酰胺醇类药物
1.6 回收率与精密度 标准溶液（质量浓度均为 1 μg/mL）以 10 μL/min
分析结果的精密度包括方法的重现性和再现 的速度直接注入电喷雾离子源，在 ESI 负离子模式
性，根据实际情况的可操作性，国家标准中一般用 下，分别对 3 种酰胺醇类药物的碰撞气能量、离子
重现性表示分析结果的精密度。方法重现性指在相 源温度、电喷雾电压等质谱参数进行优化。使每种
同的条件下，多次测定所得结果之间的一致性，反 药物的分子离子与特征碎片离子（子离子）产生的
映分析方法随机误差的大小，用一般以相对标准偏 离子对信号强度达到最大，从中选择每种药物的监
差（Relative standard deviation，RSD）表示。本方 测子离子对。总离子流图见图 1。

法通过考察日内精密度和日间精密度进行评价。内 FF RT: 1.20
100
精密度是指在同一实验条件下，于同一日内对同一
样品进行多次重复测定所得结果的重复性；日间精 80 CAP RT: 2.38
密度是指在相同实验条件下，于不同日期对同一样 60 TAP RT: 0.80
品进行重复测定所得结果的一致性。实验中，在 相对丰度 Relative abundance 40

2.00 g 空白样品中分别添加一定量不同浓度的 CAP、
TAP、FF 标准溶液，按照本检测方法中同样的样 20
品前处理方法和液相色谱−串联质谱分析条件进行 0
测定，每个浓度水平在同一天内平行制备并测定 0 2 4 6 8
8 个加标样品（n=8） ，用于计算平均回收率及日 时间/min Time
内精密度，在 3 个不同工作日独立重复完整加标实 图 1 CAP、TAP、FF 总离子流图
验（总 n=24） ，用于计算日间精密度。同时计算 Fig. 1 Total ion flow plots of CAT, TAP, and FF

各酰胺醇类药物的加标回收率，以综合评价方法的 2.2 前处理方法的选择
准确度和精密度。 常用于提取酰胺醇类药物的溶剂主要有甲醇
2 结果与分析 （Methanol，MeOH）、乙腈（Acetonitrile，ACN）、乙
酸乙酯（Ethyl Acetate，EA）等，其中乙腈和甲醇
2.1 检测方法的确定 虽然能提取酰胺醇类药物、沉淀蛋白质，但对人体
2.1.1 色谱条件的优化 的危害比较大，并且熔沸点相对较高，后续的浓缩
酰胺醇类药物是一种中等极性化合物，适合使 时间较长；相比甲醇和乙腈，乙酸乙酯沸点低，可
用反相液相色谱法进行分离，因此实验室评估了 以弥补在旋转蒸发步骤中过高的水浴温度或过长的
Agilent Zorbax SB-C 和 8 Waters BEH C 的分离效 浓缩时间导致回收率偏低的缺点，该特性也适用于
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果，发现 3 种酰胺醇类药物在两种色谱柱上均可实 后续浓缩过程，可减少热降解的风险。分别选用甲
现较好的分离。但使用 Waters BEH C 柱作为分 醇、乙腈、乙酸乙酯等作为提取剂，对采集样品进
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析柱时，该色谱柱具有更低的基线噪声及更佳的峰 行加标回收实验，结果如图 2 所示。3 种提取溶剂
对称性 [ 拖尾因子（T）<1.2]。因此，实验采用 对 3 种酰胺醇类药物的提取率均存在明显差异，表
Waters BEH C 色谱柱作为分析柱。 现出溶剂极性与目标物提取能力之间的差异性。乙
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由于酰胺醇类药物中含有羟基（−OH） ，易形 腈对 TAP 和 FF 的提取效率相近，但均低于乙酸乙
成带负电荷的离子，为提高酰胺醇类药物的电离效 酯；而甲醇对 CAP/TAP 的提取率则明显高于乙酸
率、减少背景噪声和基质的干扰，因此使用中性流 乙酯（P<0.05） ，呈现出更强的极性选择性；相比
动相即甲醇−水和乙腈−水两种流动相体系对 3 种 之下，乙酸乙酯对 3 种目标化合物均表现出较为一
酰胺醇类药进行分离。结果表明，采用甲醇−水作 致且整体更高的回收率，尤其在 TAP和 FF 上优势
为流动相时，可以更好地提高检测的灵敏度和分离 明显。综上 3 种溶剂之间的差异主要来源于其极性
效果，获得理想的色谱峰。综上所述，本研究选 差异及与目标物结构的匹配度，其中乙酸乙酯在综