Page 72 - 《渔业研究》2026年第3期

第 3 期 齐 贺： 液相色谱−串联质谱法同时检测水产养殖用投入品中 3 种酰胺醇类药物残留量 365

微生物。酰胺醇类药物会通过食物链在人体内蓄 氘代 CAP（CAP-D ） 、氘代 TAP（TAP-D ）和氘
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积，可抑制骨髓细胞中蛋白质的合成，对人类和动 代 FF（FF-D ）同位素内标标准品（上海安谱璀世
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物的骨髓细胞和肝细胞具有毒性作用 ，引发人的 标准技术服务有限公司） ，纯度均大于 95.0%；有
再生障碍性贫血，以及视神经炎、皮疹等不良反 机滤膜，0.22 μm，上海安谱璀世标准技术服务有
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应 。在 2017 年—2019 年的水产养殖用兽药及其 限公司；C 固相萃取柱，C （200 mg，3 mL） ，
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他投入品安全隐患排查中，均存在违规添加酰胺醇 上海安谱璀世标准技术服务有限公司；HLB 固相
类药物的现象 。 萃取柱，HLB（200 mg，6 mL） ，上海安谱璀世
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酰胺醇类药物的检测方法主要有酶联免疫 标准技术服务有限公司；中性氧化铝（ALN）固相
法 [7-9] 、气相色谱质谱法 [10-11] 、高效液相色谱法 [12] 、 萃取柱，ALN（200 mg，3 mL） ，上海安谱璀世
电化学法与电致化学发光法 [13-14] 以及液相色谱−质 标准技术服务有限公司；实验用水为符合 GB/T 6682—
谱联用法 [15-17] ，其中酶联免疫法存在灵敏度较低及 2008 规定的一级水。
发生交叉反应和假阳性的风险 [18] ；气相色谱法和 标准储备液：100 μg/mL，分别称取适量的 CAP、
液相色谱法缺乏对此类药物分子结构的鉴别，必须 TAP、FF 标准品，用甲醇溶解并定容配成 100 μg/mL
依赖已知标准物或联用质谱进行对比定性，且抗干 的标准储备液，−18 ℃ 避光保存，有效期为 12 个
扰能力较差 [19] ；电化学法与电致化学发光法均受 月；混合标准储备液：1.00 μg/mL，准确移取 CAP、
发光试剂和检测环境影响较大，稳定性不佳，存在 TAP、FF 标准储备液，用甲醇稀释配制成 1.00 μg/mL
一定的限制 [20] 。目前，液相色谱−质谱联用法因具 混合标准储备液，−18 ℃ 避光保存，有效期为 6 个
有定性定量能力强、分析速度快、灵敏度高等优 月；中间浓度混合标准溶液：100 ng/mL，准确移
点，常被作为首选方法。酰胺醇类药物的国家标准 取 CAP、TAP、FF 混合标准储备液，用甲醇稀释
检测方法有 GB/T 22338—2008《动物源性食品中 配制成 100 ng/mL 中间浓度混合标准溶液，−18 ℃
氯霉素类药物残留量测定》 、GB 31658.5—2021《动 避光保存，有效期为 3 个月；中间浓度混合标准溶
物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺残留量的测定》 液：10.0 ng/mL，准确移取 CAP、TAP、FF 混合标
等，主要针对肌肉、肝肾等动物组织 [21-22] 。然而， 准储备液，用甲醇稀释配制成 10.0 ng/mL 中间浓
当上述检测方法直接用于高脂肪、高蛋白的水产养 度混合标准溶液，−18 ℃ 避光保存，有效期为 3 个
殖用投入品时，基质干扰严重，常出现回收率波动 月；同位素内标标准储备液：100 μg/mL，分别称
大（60%~130%） 、基质效应显著等问题 [23-25] ，且 取适量的 CAP-D 、TAP-D 、FF-D 标准品，用甲
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部分方法需亲水−亲油平衡（Hydrophilic-lipophilic 醇溶解并定容配成 100 μg/mL 的标准储备液，−18 ℃
balance，HLB）结合阳离子交换柱（SCX/MCX）两 避光保存，有效期为 12 个月；混合同位素内标标
步净化，操作繁琐。本研究基于液相色谱−质谱联 准储备液：10.0 μg/mL，准确移取 CAP-D 、TAP-
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用技术，针对投入品基质特点进行优化，建立水产 D 、FF-D 同位素内标标准储备液，用甲醇稀释配
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养殖用投入品中酰胺醇类物残留量的快速检测方 制成 100 ng/mL 混合同位素内标标准储备液，−18 ℃
法，以满足相关监测与监管需要。 避光保存，有效期为 3 个月；中间浓度混合同位素
内标标准溶液：100 ng/mL，准确移取 CAP-D 、
1 材料与方法 5
TAP-D 、FF-D 混合同位素内标标准储备液，用甲
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1.1 实验材料 醇稀释配制成 100 ng/mL 混合同位素内标标准储备
按照 GB/T 14699—2023《饲料 采样》的规定 液，−18 ℃ 避光保存，有效期为 6 个月；混合标准
抽取有代表性的样品，用四分法缩减取样。按照 工作液：根据每种标准物的灵敏度和仪器线性范
GB/T 20195—2006《动物饲料 试样的制备》的规 围，吸取一定量的中间浓度混合标准溶液和混合同
定制备样品，粉碎过 0.45 mm 孔径筛，混合均匀， 位素内标标准溶液，用初始流动相配成系列浓度的
装入磨口瓶中备用。 混合标准工作溶液，内标浓度均为 5.0 ng/mL，当
甲醇、乙酸乙酯、正已烷（Merck 公司） ，色 天配制；甲醇−水溶液：将甲醇和水按体积比 5∶95
谱纯；氨水（国药集团化学试剂有限公司） ，含 混匀；甲醇−水溶液饱和的正已烷：将足够的甲醇−
量 25%~28%；CAP、TAP 和 FF 标准品（上海安谱 水体系和正已烷充分振荡混合，静置分层，取上
璀世标准技术服务有限公司） ，纯度均大于 99.5%； 清液。