Page 18 - 《渔业研究》2026年第3期
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渔业研究 2026，48（3） ：311 − 320                                           http://www.hyyysci.com
                Journal of Fisheries Research                                     DOI:10.14012/j.jfr.2025124

                张澳晴，王 庆，邹建洋，等. 鲤疱疹病毒       3  型  RAA-CRISPR/Cas12a 检测方法的建立[J]. 渔业研究，2026，48（3） ：311 − 320.
                Zhang A Q，Wang Q，Zou J Y，et al. Establishment of an RAA-CRISPR/Cas12a detection method for cyprinid herpesvirus 3[J]. Journal of
                Fisheries Research，2026，48（3） ：311 − 320.

                           鲤疱疹病毒                3  型    RAA-CRISPR/Cas12a

                                               检测方法的建立



                               张澳晴 ，王    庆 ，邹建洋 ，王    浩 ，施    雯 ，
                                                                                        4
                                       1,2
                                                                             3
                                                    2
                                                                2,3
                               徐    伟 ，李笑阳 ，张    述 ，于美玲 ，尹纪元                            2*
                                       2,3
                                                    1
                                                                5
                                                                            1*
                                       （1.   广西大学动物科学技术学院，广西 南宁 530004；
                              2.   中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部渔用药物创制重点实验室/
                                   广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室，广东 广州 510380；
                                         3.   上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306；
                                    4.   东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江 哈尔滨 150030；
                                    5.   中国海洋大学计算机科学与技术学院，山东 青岛 266100）
                  摘要：【背景】鲤疱疹病毒              3  型（CyHV-3）引发的锦鲤疱疹病毒病（KHVD）是危害鲤与锦
                  鲤健康养殖的重要病害。建立灵敏、快速、简便且适合现场快速筛查的检测方法，是目前预
                  防  KHVD   发生的最有效方法。【目的】建立适合现场快速筛查                           CyHV-3  的检测方法，及时
                  发现病原、切断病毒传播途径，为防控                    KHVD 提供技术支持。【方法】本研究依据                    CyHV-3
                  特异性保守基因设计不同的引物和                 crRNA  组合，通过试验筛选出最佳“引物-crRNA                 组合”和
                  反应条件，建立         CyHV-3  的  RAA-CRISPR/Cas12a 现场快速检测方法，并对该方法的特异性、
                  灵敏性、临床样品检测准确性进行评价。【结果】CyHV-3 RAA-CRISPR/Cas12a 方法灵敏性
                  高，最低检测限为          1.24×10 拷贝/μL；特异性强，与          CyHV-2、GCRV     等鲤科鱼类常见病原无
                                           2
                  交叉反应；检测结果可靠，与中国水产行业标准                        SN/T 1674—2014  推荐方法一致。同时还具
                  有结果读取直观、可以用肉眼直接判定、对设备人员要求低、检测反应快速（反应仅需                                        45 min）
                  等优点。【结论】本研究建立的                 CyHV-3 RAA-CRISPR/Cas12a 现场快速检测方法，为鲤和
                  锦鲤流通苗种、养殖水体中病原留存情况的快速筛查与实时监测，提供了有效的技术手段。
                  关键词：鲤疱疹病毒           3  型（CyHV-3） ；锦鲤疱疹病毒病（KHVD） ；RAA- CRISPR/Cas12a；
                  快速检测

                  中图分类号：S943      文献标识码：A      文章编号：2096 − 9848 （2026） 03 − 0311 − 10

                  鲤疱疹病毒     3  型（Cyprinid herpesvirus 3，CyHV-  美洲等鲤和锦鲤主要养殖国家             [3-5] ；2001  年该病在
                                                                                               [6]
              3）感染锦鲤、普通鲤及其变种引起的锦鲤疱疹病                           中国被首次报道，随后在全国均有发现 。KHVD                   的
              毒病（Koi herpesvirus disease，KHVD）于   1997  年首     致死率高达     80%~100%，一旦发生便会给鲤和锦鲤
              次被发现于德国       [1-2] ，随后迅速蔓延至亚洲、欧洲、               养殖业带来重大的经济损失，因此世界动物卫生组

                   收稿日期：2025-10-24    修回日期：2025-11-11
                   基金项目：中国水产科学研究院院级基本科研业务费（2024XT0603） ；北海市科技计划项目（北科合                 2023174005） ；2024  年省级乡村
                          振兴战略专项资金种业振兴项目资金（2024-SPY-00-017）
                   第一作者：张澳晴，女，硕士研究生，研究方向为水产病害与防控。E-mail: 1735634738@qq.com
                   通信作者：于美玲，女，副教授，博士，研究方向为基础兽医学。E-mail: yumeiling@gxu.edu.cn
                          尹纪元，男，助理研究员，博士，研究方向为水产病害与防控。E-mail: yinjiyuan@prfri.ac.cn
              ©《渔业研究》编辑部。本文为使用        CC BY-NC-ND 4.0 许可协议的开放获取作品。
              © Editorial Office of Journal of Fisheries Research. This is an open access article under the CC BY-NC-ND 4.0 license.
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