Page 6 - 《渔业研究》2026年第1期
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第 1 期                    卢思宇等： 人工饲料驯化对翘嘴鳜肝脏代谢的影响                                         3

              BW） 、头长（Head length，HL） 、尾柄长（Caudal              natural products social molecular networking，GNPS）
              peduncle length，CPL）及尾柄高（Caudal peduncle         等公共数据库及自建拜谱代谢物标准品库。对提取
              depth，CPD） ，计算体长/体高、体长/头长、尾柄                     得到的数据，删除组内缺失值>50%               的离子峰；对
              长/尾柄高等指标的比值；称取翘嘴鳜内脏团                             正、负离子数据分别进行总峰面积归一化，数据经
              （Viscus mass，W ）和肝脏（Liver mass，W ）的              单位方差缩放（Unit variance scaling，UV scaling）预
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              重量，按公式（1）~公式（3）计算肥满度（Condition                   处理后，运用      Python  软件进行后续数据分析。
              factor，CF） 、肝体比（Hepatosomatic index，HSI）          1.5 数据统计与分析
              和脏体比（Viscerosomatic index，VSI） 。                     所有实验数据以平均值±标准误表示。利用
                                                               WPS office 及  IBM SPSS Statistics 27  软件对数据进
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                  CF=W/BL ×100                       （1）
                                                               行计算和多重比较，P<0.05         表示差异显著，P<0.01
                  HSI=W 2 /W×100%                    （2）       表示差异极显著。利用           MSDIAL  软件对代谢物离
                                                               子峰进行提取，开展正交偏最小二乘判别分析
                  VSI=W 1 /W×100%                    （3）
                                                               （Orthogonal partial least squares-discriminant analy-
               1.4 肝脏采样及非靶向代谢检测与分析                             sis，OPLS-DA）   [12] ；并对  OPLS-DA  结果进行模
                  分别采集未驯化组（投苗适应期第                 3  天） 、人     型验证。单变量统计分析利用              Student T  检验及变
              工饲料养殖中期组（人工饲料养殖期第                   16  天）以      异倍数分析（Fold change analysis，FC）两种方法，
              及人工饲料养殖后期组（人工饲料养殖期第                       31     综合获得火山图（Volcano plot）及差异代谢物，
              天）翘嘴鳜的肝脏样本并拍摄记录。用解剖刀取下                           将差异代谢物与京都基因和基因组数据库（Kyoto
              肝脏左叶腹侧部分，放入离心管，标记后急冻，干                           encyclopedia of genes and genomes，KEGG）进行
              冰运输至上海拜谱生物科技有限公司进行非靶向代                           比对并作富集分析。
              谢组学检测。未驯化组翘嘴鳜的肝脏组内样本命名
                                                                2 结果与分析
              为  A_1~A_8；人工饲料养殖中期组翘嘴鳜的肝脏
              组内样本命名为         B_1~B_8；人工饲料养殖后期组                 2.1 驯化成功后翘嘴鳜基础生长特征
              翘嘴鳜的肝脏组内样本命名为              C_1~C_8。                  驯化养殖实验过程中，翘嘴鳜的生长相关指标
                  具体操作包括样品收集、代谢物提取、质控                          变化如表     1  所示，结果显示人工饲料养殖期第
              样品制备、液相色谱−串联质谱联用仪（Liquid chro-                   31  天翘嘴鳜的体质量、体高均显著高于人工饲料
              matography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）    养殖期第    22  天（P<0.05） ，表明翘嘴鳜生长正常；
              检测以及数据分析。将未驯化组、人工饲料养殖中                           肥满度、肝体比、脏体比等在翘嘴鳜养殖过程中均
              期组和后期组样品等量混合制备质控样品。样品                            无显著变化。
              于  4 ℃  解冻，称取     50 mg  样本于研磨管中，加入                  对人工饲料养殖期第         9  天及第  23  天测定的翘嘴
              两粒钢珠和适量预冷的甲醇−水（4∶1，V/V）溶                         鳜血糖浓度作数据统计（表            2） ，结果显示投料前两
              液，在组织破碎仪中低温匀浆破碎，−20 ℃                   静置       批次翘嘴鳜的平均血糖浓度为（2.00±1.10） mg/L；
              1 h；4 ℃  下  2 300 g  离心  10 min，取适量上清液           投料后   2 h  的平均血糖浓度为（8.82±1.04） mg/L，
              作进样分析。样品置于            4 ℃  自动进样器中，采用             投料后血糖浓度极显著升高（P<0.01） 。
              SHIMADZU-LC30   超高效液相色谱系统，流动相              A      2.2 翘嘴鳜驯化不同阶段的肝脏形态比较
              为  0.1%  甲酸水溶液，流动相         B  为  0.1%  甲酸乙腈          对不同驯化阶段的鳜进行了肝脏解剖及观察，
              溶液，柱温为       40 ℃。每例样品分别采用电喷雾电                   发现未驯化组和人工饲料养殖中期组肝脏呈鲜红
              离进行正离子（+）和负离子（−）模式检测，分                           色，肉眼观察无病灶；人工饲料养殖后期组肝脏颜
              离后经   QE Plus 质谱仪（Thermo Scientific，USA）作        色偏白（图     1） 。
              质谱分析。原始数据采用             MSDIAL  软件进行峰对            2.3 翘嘴鳜驯化不同阶段的肝脏代谢组学差异
              齐、保留时间校正并提取峰面积。代谢物结构鉴定                           分析
              采用精确质量数匹配和二级谱图匹配的方式，检索                            2.3.1 OPLS-DA  分析及模型验证
              于人类代谢组数据库（Human metabolome database，                 由图  2  分析发现，未驯化组、人工饲料养殖中

              HMDB） 、MassBank    和天然产物数据库（Global               期组和后期组样本之间均不存在重合，说明三组肝
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