Page 47 - 《渔业研究》2025年第6期

738 渔 业 研 究 第 47 卷

高度的系统发育保守性，提示其可能源于同一进 2.3 cfb 基因特异性 PCR 检测
化谱系或存在区域性传播特征。相比之下，蛙源分 根据引物设计，cfb 基因扩增产物的理论大小
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离株（14 、19 、20 、24 、25 ）与异源宿主 [ 奶 为 401 bp（图 3） 。PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳结
牛（Bovini） 、大羚羊（Taurotragus oryx）及泥鳅 果显示，7 株分离菌在 401 bp 位置均出现清晰且与
（Paramisgurnus dabryanus ssp.）] 菌株聚集成独 阳性对照一致的特异性条带，未检测到非特异性扩
立进化分支，揭示了无乳链球菌在跨宿主传播过程 增产物，阳性率为 100%。结果表明，本研究分离
中产生了显著的遗传分化。 的全部菌株均携带 cfb 基因。

尼罗罗非鱼（广东）O. niloticus KF111277.1 Guangdong
尼罗罗非鱼（海南）O. niloticus JF423946.1 Hainan
99%
金鲳 T. ovatus KP729639.1 Hainan
99% 尼罗罗非鱼（广西）O. niloticus JQ990156.1 Guangxi
金鲳 T. ovatus KF826095.2 Hainan
99% 尼罗罗非鱼（广东）O. niloticus TW2018-78 Guangdong
尼罗罗非鱼（海南）O. niloticus TW2021-21 Hainan
尼罗罗非鱼（海南）O. niloticus KU561093.1 Hainan
97%
99% 黄鳍鲷 Acanthopagrus latus PP530142.1 Guangdong
99% 尼罗罗非鱼（广西）O. niloticus KT328489.1 Guangxi
泥鳅 P. dabryanus ssp. MH423900.1 Taiwan, China
99%
奶牛 Bovini MF037710.1 Anhui
98%
大羚羊 T. oryx MK123503.1 Kenya
牛蛙（广西）R. catesbeiana 24 Guangxi
99% 97% 牛蛙（四川）R. catesbeiana 20 Sichuan
黑斑蛙（四川）P. nigromaculatus 14 Sichuan
98% 牛蛙（四川）R. catesbeiana 19 Sichuan
97% 雅鱼 Schizothorax prenanti HQ658089.1 Sichuan
97% 牛蛙（广西）R. catesbeiana 25 Guangxi
0.001 0
图 2 利用无乳链球菌 16S rRNA 基因序列构建系统发育树
Fig. 2 Phylogenetic trees constructed from 16S rRNA gene sequences of S. agalactiae

2.4 溶血性与 CAMP 实验 19 、20 、24 和 # 25 在 # 28℃ 培养条件下未观测到溶
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根据 2.1 节研究的结果，进一步对 5 株蛙源和 血环（图 4a） ；尼罗罗非鱼源分离株 TW2018-78
2 株尼罗罗非鱼源无乳链球菌分离株进行溶血性观 和 TW2021-21 在 37℃ 培养条件下呈现 β 溶血环
测与 CAMP 实验。从图 4 结果可知，蛙源分离株 14 、 （图 4b） ；2 株尼罗罗非鱼源分离株在血（琼脂）
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长度/bp 阳性
Length 14 # 19 # 20 # 24 # 25 # TW TW 对照
2018-78 2021-21 Positive
2 000 control
1 500

1 000
700
cfb 401 bp
500

250

100

图 3 无乳链球菌 cfb 基因 PCR 检测结果
Fig. 3 PCR detection results of the cfb gene of S. agalactiae