Page 49 - 《渔业研究》2025年第6期

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其具有较强的致病潜力；相比之下，蛙源菌株毒力 过程中毒力表达出现一定程度的“减弱”或呈现“缓
基因的数量和种类均较少，可能反映其在环境适应 和化”趋势。

表 7 无乳链球菌测序菌株的等位基因型
Tab. 7 The allele genotypes of the sequencing bacterial strains of S. agalactiae
宿主 代表菌株 等位基因型 Allele genotypes ST 序列号
Hosts Representative strains （adhP，glnA，sdhA，glcK，pheS，atr，tkt） ST serial number
黑斑蛙 P. nigromaculatus 14 # 54，4，26，25，17，31，39 ST-261
牛蛙 R. catesbeiana 19 # 54，4，26，25，17，31，39 ST-261
牛蛙 R. catesbeiana 20 # 54，4，26，25，17，31，39 ST-261
牛蛙 R. catesbeiana 24 # 54，4，26，25，17，31，39 ST-261
牛蛙 R. catesbeiana 25 # 54，4，26，25，17，31，39 ST-261
尼罗罗非鱼 O. niloticus TW2018-78 10，1，3，2，1，2，2 ST-7
尼罗罗非鱼 O. niloticus TW2021-21 10，1，3，2，1，2，2 ST-7

表 8 不同来源无乳链球菌 9 种毒力基因检测
Tab. 8 Detection of nine virulence genes of S. agalactiae from different derived strains
菌株 基因 Genes
Strains
cfb hylB bca bibA fbsB cylE scpB lmb sip
14 # + + − − − − − − +
19 # + + − − − − − − +
20 # + + − − − − − − +
24 # + + − − − − − − +
25 # + + + + + − − − +
TW2018-78 + + + + + + − − +
TW2021-21 + + + + + + − − +
注：+表示阳性；−表示阴性。表 10 同此。
Notes: + indicates positive; − indicates negative. It’s the same as table 10.

2.8 药敏实验与耐药基因分析 2 天，牛蛙开始出现明显的大体病理变化并陆续死
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从表 9 结果可见，蛙源分离株 14 、19 、20 、 亡，第 3 天累计死亡率达 100%；牛蛙表现出多器
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24 和 # 25 对强力霉素、阿莫西林及头孢噻肟表现为 官病理性改变，其中肝脏颜色灰褐，表面可见明显
敏感（S） ；对氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、 瘀血斑，伴随腹腔内血性积液，提示存在严重肝损
复方新诺明及硫酸新霉素则表现为耐药（R） 。相 伤及体腔炎症反应（图 7a） ；心肌组织出现出血
较而言，尼罗罗非鱼源分离株对氟苯尼考、强力霉 改变，胃黏膜可见多处出血性溃疡灶，病灶边界清
素、恩诺沙星、阿莫西林和头孢噻肟均表现为敏感 晰，提示感染可能波及心胃系统（图 7b） ；脾脏
（S） ；对环丙沙星和复方新诺明为中度敏感（I） ； 体积显著增大，呈充血状态，质地相较正常状态明
对硫酸新霉素表现为耐药（R） 。结合药敏实验结 显变软，提示脾功能亢进或炎性反应（图 7c） ；
果，进一步对 7 株分离菌的 8 种耐药相关基因进行 肾脏体积增大、颜色加深，表面明显充血，提示可
了 PCR 检测（表 10） ，结果显示，尼罗罗非鱼源 能存在系统性炎症或感染性损伤（图 7d） 。相比
分离株 TW2018-78 和 TW2021-21 携带 sul1、ermA、 之下，注射尼罗罗非鱼源分离株 TW2021-21（8.4×
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qnrS 及 pbp2x 等多种耐药相关基因，而 5 株蛙源分 10 CFU/mL）和无菌生理盐水的对照组牛蛙在连
离株中仅检出 ermA 基因，这与体外药物敏感筛选 续观察 7 d 内均未出现明显临床症状、病理解剖变
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结果并不完全一致。 化或死亡。结果表明，蛙源分离株 25 对牛蛙具有
2.9 人工回归感染实验分析 较强的致病力，而尼罗罗非鱼源无乳链球菌株则在
如图 6 所示，在以蛙源无乳链球菌分离株 25 # 本实验条件下未引发感染性变化，提示其对牛蛙缺
（ 5.1×10 CFU/mL） 人 工 回 归 感 染 牛 蛙 后 的 第 乏跨种致病能力。
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