Page 48 - 《渔业研究》2025年第6期
P. 48
第 6 期 戴景辉等:蛙源与鱼源无乳链球菌的遗传分化、基因分型、毒力谱、耐药性与致病性比较研究 739
板上表现为 CAMP 阳性反应,所有蛙源分离菌株 特异性 dltS 内参基因 PCR 检测均为阳性(图 5b) 。
均表现为 CAMP 阴性反应(图 4c) 。 2.6 MLST 分析
2.5 荚膜多糖血清型分析 根据 MLST 数据库分析结果(表 7) ,2 株尼
#
从图 5a 可知,蛙源分离株 14 、19 、20 、24 # 罗罗非鱼源无乳链球菌 TW2018-78 和 TW2021-21 均
#
#
和 25 均为Ⅰb 型;尼罗罗非鱼源 TW2018-78 和 TW- 归属于 ST-7 型;5 株蛙源无乳链球菌分离株均为
#
2021-21 均为Ⅰa 型。针对无乳链球菌荚膜多糖的 ST-261 型。
a) b) c) TW2018-78 TW2021-21
14 # 19 # 20 #
TW2018-78
14 # 19 # 20 # 24 # 25 #
24 # 25 # TW2021-21
图 4 无乳链球菌溶血实验(a、b)和 CAMP 实验 (c)
Fig. 4 Hemolytic test (a, b) and CAMP test (c) of S. agalactiae
注:a. 蛙源无乳链球菌(28 ℃) ;b. 尼罗罗非鱼源无乳链球菌(37 ℃) ;c. 蛙源与尼罗罗非鱼源无乳链球菌 CAMP 实
验结果。
Notes: a. S. agalactiae from frog origin (28℃); b. S. agalactiae from tilapia (37℃); c. CAMP experimental results of
S. agalactiae from frog and tilapia-source strain.
a) b)
长度/bp # TW TW 长度/bp TW TW
Length 14 # 19 # 20 # 24 # 25 2018-78 2021-21 Length 14 # 19 # 20 # 24 # 25 # 2018-78 2021-21
2 000 cps ⅠaH 1 826 bp 2 000
1 500 1 500 dltS 952 bp
cps ⅠbJ 770 bp
1 000 1 000
700 700
500 500
cps ⅠaH 521 bp
250 250
100 100
图 5 无乳链球菌荚膜多糖血清分型的 PCR 凝胶电泳图
Fig. 5 PCR gel electrophoresis of capsular polysaccharide serotyping of S. agalactiae
注:a. 多重 PCR 检测荚膜多糖类型Ⅰa、Ⅰb;b. 无乳链球菌特异性基因 dltS PCR 检测结果。
Notes: a. Multiplex PCR for detection of capsular polysaccharide types Ⅰa, Ⅰb; b. Specific gene dltS PCR of S. agalactiae.
2.7 毒力基因分析 整;而 5 株蛙源菌株则表现出多样性,其中 cfb、
毒力基因检测结果显示,2 株尼罗罗非鱼源菌 hylB 和 sip 基因在所有菌株中均为阳性;bibA、
#
株均携带 cfb、bca、hylB、bibA、fbsB、cylE、sip bca、fbsB 等基因仅在蛙源 25 检出。总体而言,尼
7 个毒力基因(表 8) ,表现为毒力基因谱相对完 罗罗非鱼源菌株携带更为复杂的毒力因子谱,表明

