Page 48 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期     戴景辉等:蛙源与鱼源无乳链球菌的遗传分化、基因分型、毒力谱、耐药性与致病性比较研究                                    739

              板上表现为      CAMP  阳性反应,所有蛙源分离菌株                   特异性   dltS  内参基因   PCR  检测均为阳性(图        5b) 。
              均表现为     CAMP  阴性反应(图      4c) 。                  2.6 MLST  分析
               2.5 荚膜多糖血清型分析                                       根据  MLST  数据库分析结果(表           7) ,2  株尼
                                            #
                  从图   5a 可知,蛙源分离株        14 、19 、20 、24  #    罗罗非鱼源无乳链球菌         TW2018-78  和  TW2021-21  均
                                                     #
                                                 #
              和  25 均为Ⅰb  型;尼罗罗非鱼源        TW2018-78  和  TW-    归属于   ST-7  型;5  株蛙源无乳链球菌分离株均为
                   #
              2021-21  均为Ⅰa 型。针对无乳链球菌荚膜多糖的                     ST-261  型。


                 a)                                          b)                c)  TW2018-78 TW2021-21
                      14 #           19 #           20 #
                                                                TW2018-78



                                                                                  14 #  19 #  20 #  24 #  25 #
                      24 #           25 #                       TW2021-21







                                        图 4    无乳链球菌溶血实验(a、b)和      CAMP  实验 (c)
                                     Fig. 4    Hemolytic test (a, b) and CAMP test (c) of S. agalactiae
                  注:a. 蛙源无乳链球菌(28 ℃) ;b. 尼罗罗非鱼源无乳链球菌(37 ℃) ;c. 蛙源与尼罗罗非鱼源无乳链球菌                       CAMP  实
              验结果。
                  Notes:  a.  S.  agalactiae  from  frog  origin  (28℃);  b.  S.  agalactiae  from  tilapia  (37℃);  c.  CAMP  experimental  results  of
              S. agalactiae from frog and tilapia-source strain.



                      a)                                        b)
                   长度/bp                      # TW    TW    长度/bp                         TW    TW
                   Length     14 #  19 #  20 #  24 #  25  2018-78 2021-21  Length  14 #  19 #  20 #  24 #  25 # 2018-78 2021-21
                    2 000          cps ⅠaH 1 826 bp           2 000
                    1 500                                     1 500      dltS 952 bp
                                 cps ⅠbJ 770 bp
                    1 000                                     1 000
                     700                                       700

                     500                                       500
                                       cps ⅠaH 521 bp

                     250                                       250


                     100                                       100


                                        图 5    无乳链球菌荚膜多糖血清分型的        PCR  凝胶电泳图
                            Fig. 5    PCR gel electrophoresis of capsular polysaccharide serotyping of S. agalactiae
                  注:a. 多重  PCR  检测荚膜多糖类型Ⅰa、Ⅰb;b. 无乳链球菌特异性基因            dltS PCR  检测结果。
                  Notes: a. Multiplex PCR for detection of capsular polysaccharide types Ⅰa, Ⅰb; b. Specific gene dltS PCR of S. agalactiae.

               2.7 毒力基因分析                                      整;而    5  株蛙源菌株则表现出多样性,其中               cfb、
                  毒力基因检测结果显示,2            株尼罗罗非鱼源菌             hylB  和  sip  基因在所有菌株中均为阳性;bibA、
                                                                                        #
              株均携带     cfb、bca、hylB、bibA、fbsB、cylE、sip         bca、fbsB  等基因仅在蛙源      25 检出。总体而言,尼
              7  个毒力基因(表       8) ,表现为毒力基因谱相对完                 罗罗非鱼源菌株携带更为复杂的毒力因子谱,表明
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