Page 177 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 水 产 学 报 50 卷

表 2 荧光定量 PCR 基因引物
Tab. 2 Primers used for quantitative Real-time PCR
基因 正向引物 反向引物 基因编号
gene forward primer (5′-3 ′) reverse primer (5 ′-3′) GenBank no.
mef2a ACGTGGTTTCAGCATGTCAG GGCTATCAGCTGGAGAGTGG XM_027161140.1
mef2c ACGTGGTTTCAGCATGTCAG GGCTATCAGCTGGAGAGTGG XM_027138429.1
mef2d GAGTCCGAGGACAAGTACCG CTGCACTTGGTGGTCTGTGT XM_027148846.1
mrf4 TGATGGACCTTTTCGAGACC CGCTTTTGGGACAAAAACAT NC_062536.1
mstn AGACGCAGGCTGAAGAAG GATGAAGGACTGGAGGGTT XM_027171347
myf5 CTTCTTCCCTTCCAGGCTTT TGGTTGGGTGAGAGTGACAG XM_027155249
myhc TCAAGGATGCTCAACTGCAC TCACTTGCATCAACCAGCTC XM_027137425.1
myod CTTCAGGCTTTCACACCACA CATCTCCCCGTTCTGTTTGT HM363525
myog ATGATGACCCCTGCTTCAAC ATCTGCGTTGGTGGTTTTTC XM_027144245
pax7 GCTTCCAACCCTATCTCAG CTCCACTTGTAGCAGTCCC XM_027170273.1
acsl4 TGGCTGTCGTCATGTACACC CAGTGCCGACTCAACTTTGC MG599799.1
fsp1 TTCCTTCAAGGGCGTGTCAT ACTCTTCCCTTCAGCGTCAC NC_062521.1
gpx4 GCTTGTGGGTTCCTGTCATT GCATAAAAATGGGCTCCAAA NC_062539.1
lpcat3 CGCTTTTGTTTGGGTTCATT GGATACACACGCCCTCAGTT NC_062520.1
ncoa4 GTCAGACTGTGGCTCATGCT TTGGCCCTCTTGCGTAGAAG NC_062521.1
slc7a11 TCGCTACAGCAATCGGACTC AAAACCGCCGGGATGAAGAT NC_062534.1
il6 ATGCCTCACCTAGAGCAGGA GTGAAGCTGTGCAGAATGGA XM_027176013
il8 GACTGCGATGCTTTGTGAAG TCAGGCAGACCTTCATTCCT KY218792
il10 TCCTGCTTTCTTTGCTGACA GAATAGTGCGGTGTCCAGGT XM_027144360
nf-κb1 AGCAGAAGGAAGCAGTCGAG CACATAATTCCAGTGCCTCA NC_062532.1
tgfβ TTCCATGACATCTCCAACGA GGCCATTAAGTTGGCAAGAA XM_047806424
tnfα GCGATCAGGTTTTGTTGGAT CGGCAAGAAGAACTCCACA XM_027133763
b2m1 GCTGATCTGCCATGTGAGTG TCAAGAAGAGCCAGTGGAG KP938520
elfα GTCGAGACTGGTGTGCTCAA GATGACCTGAGCAAGGAAGC NC_062541.1
gapdh ACTGCTGATGGGTGAGAACA ATGACTCTCTTGGCACCTCC KP938521
rpl7 GGCAAATGTACAGGAGCGAG GCCTTGTTGAGCTTGACGAA KP93852
18s AAACGGCTACCACATCCAAG TCCCGAGATCCAACTACGAG NC_062538.1
ubce AGCAAAGAGTGAGGAGCAGT TTTCAGCGAGAGAGACCCA KP938524

表 3 黄颡鱼 myog、slc7a11 基因启动子构建引物序列
Tab. 3 Cloning primer sequences of myog, slc7a11 gene promoters in P. fulvidraco
基因 正向引物 反向引物
gene forward primer reverse primer
myog cagtaccggaatgccaagcttGCAGAAGTAGATCCTGAGACCATGT ctatcgataggtaccgagctcAGCTACGTGACACATTTCCAATACA
slc7a11 ctatcgataggtaccgagctcATATTTAACCCTCTGTCTCTGGTTACTACA cagtaccggaatgccaagcttCCCCTGCTCTCTATTAGCTTACATC

1.9 myog 和 slc7a11 启动子上 NF-κB1 转录因 素酶活性分析。以 10% 胎牛血清的 DMEM 培养
子的位点突变分析及双荧光素酶活性检测 基为对照组，处理组同时加入 160 mg/L Fe O NPs，
3
2
2
根据生物信息学预测和启动子活性检测结果， 于 37 ℃、5% CO 中培养 24 h。次日收集细胞，
选择关键的转录因子结合位点 (NF-κB1) 进行点突 进行双荧光素酶活性检测，参照双荧光素酶活性
变，引物设计见表 4。然后进行质粒转染及荧光 检测商品试剂盒 (上海碧云天生物技术股份有限公

https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
4