Page 240 - 《水产学报》2026年第2期
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2 期                                     水    产    学    报                                 50 卷












                     30 mm                1  50 μm                  2  200 nm                      3

                                                 图版 Ⅰ    分离菌株形态观察
              1. 分离菌株  LB  琼脂培养板上的单菌落形态,2. 分离菌株的革兰氏染色结果,3. 分离菌株的扫描电镜结果。
                                       Plate Ⅰ Morphological observation of isolated strains
              1. single colony morphology of the isolated strain on LB solid medium, 2. gram staining results of isolated strains, 3. results of scanning electron micro-
              scopy of isolated strains.
              明胶生化管,能还原硝酸盐;不能发酵山梨醇、                            为豚鼠气单胞菌,命名为            Ac240602。
              水杨苷、木糖、棉子糖、硫化氢生化管、尿素酶、
                                                                2.4    MLST  分析
              D-葡萄糖、西蒙氏枸橼酸盐、丙二酸盐、氧化酶
                                                                   对菌株    Ac240602  的管家基因进行 PCR 和测
              (表  3)。根据《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见
              细菌系统鉴定手册》及结合相关文献初步判定分                            序,序列比对结果显示,Ac240602            的  6  个管家基
                                                               因  (gyrB、groL、gltA、metG、ppsA    和  recA) 的编
              离菌株为豚鼠气单胞菌。
                                                               号分别为     1 139、624、1 140、308、179、1 067,
               2.3    16S rRNA  鉴定
                                                               比对确定分离菌株         Ac240602  为  ST 2615  型;数据
                   以分离菌株为模板,通用引物扩增出约为                          收集发现,已有的        ST2615  型菌株均来自巴西,来
              1 400 bp  的  16S rRNA  片段  (图  2-a);分离菌株的        源于同一人源菌株        (表  4);在数据库中下载相关分
              16S rRNA  序列通过    NCBI Blast 进行同源性比对分            离菌株   MLST  信息并绘制进化树,结果显示,ST
              析,发现分离菌株的          16S rRNA  与豚鼠气单胞菌的            2615  型与  ST2115  型汇聚为一支,两者亲缘关系
              同源性最高,达到          99.7 %;选择同源性较高的不               最为相近    (图  3)。
              同种属构建进化树,结果显示,分离菌株与豚鼠气
                                                                2.5    致病性分析
              单胞菌    (NR 104 824.1) 处于同一进化分支上      (图  2-b)。
              结合形态学观察和生理生化结果,确定分离菌株                                 毒力基因检测  对分离菌株               Ac240602  的

                                           表 3    分离菌株  Ac240602  生理生化鉴定结果
                           Tab. 3    Physiological and biochemical identification results of isolated strain Ac240602
                                              结果 result                                        结果 result
                         测定项目                                          测定项目
                       measuring item            豚鼠气单胞菌               measuring item             豚鼠气单胞菌
                                          Ac240602                                        Ac240602
                                                  A. caviae                                        A. caviae
               蔗糖发酵管 sucrose fermentation tube  +   +      硫化氢生化管 hydrogen sulfide biochemical tube  −  −
               麦芽糖发酵管 maltose fermentation tube  +  +      七叶苷 esculin                       +       +
               山梨醇发酵管 sorbitol fermentation tube  −  −     果糖 fructose                       +       +
               甘露醇发酵管 mannitol fermentation tube  +  +     半乳糖 galactose                     +       +
               葡萄糖发酵管 glucose fermentation tube  +  +      西蒙氏枸橼酸盐 Simmons' citrate          −       −
               乳糖发酵管 glucose fermentation tube  −    −     丙二酸盐 malonate                     −       −
               海藻糖发酵管 trehalose fermentation tube  +  +    阿拉伯糖 arabinose                    +        /
               棉子糖发酵管 raffinose fermentation tube  −  −    明胶生化管 gelatin biochemical tube    +       +
               木糖发酵管 xylose fermentation tube  −     −     3 %过氧化氢酶试剂 3% catalase reagent    +
               尿素酶 urease                    −       −     硝酸盐还原 nitrate reduction           +
               D-葡萄糖 D-glucose              +       +      氧化酶 oxidase                       −       −

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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