Page 242 - 《水产学报》2026年第2期
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2 期 水 产 学 报 50 卷
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 素、四环素、复方新诺明、头孢他啶和氯霉素高
bp
度敏感,对多黏菌素 B 中度敏感,对羧苄西林、
2 000 青霉素、苯唑西林、氨苄西林、红霉素、环丙沙
1 000
750 星等 种药物耐药 (表 5)。
500 18
250
耐药基因检测 耐药基因检测结果显示,
100
分离菌株 AC240602 携带 blaTEM、aadA1、aadA2、
图 4 毒力基因检测结果 strA、strB、aacC、Aph(3')-Ia、tetA、parC、dhfrV、
Fig. 4 Virulence gene test results dhfrVⅩⅡ、 dhfrVⅩIII、 sulI、 sulII、 3'CS、 int1、
M. marker, 1. lip, 2.alt, 3. act, 4. gcaT, 5. ompA, 6. ahp, 7. aer, 8. epr- VR 等 17 种耐药基因,表明分离菌株为多重耐药
CAI, 9. hly, 10. ompTsx, 11. flgA, 12. flaH.
菌株 (图 7)。
双纸片协同扩散实验 双纸片协同扩散实
验 结 果 显 示 , 分 离 菌 株 Ac240602 对 头 孢 他 啶
和头孢他啶/克拉维酸的抑菌圈直径为分别为 23
和 18 mm,对头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸的抑
菌圈直径为分别为 9 和 17 mm (图 8),表明分离菌
株 Ac240602 为 ESBLs 阳性菌株;分离菌株 Ac24-
0602 对美罗培南和美罗培南/EDTA 的抑菌圈直径
为分别为 17 和 0 mm,表明分离菌株 Ac240602
为 MBLs 阴 性 。 上 述 结 果 表 明 , 分 离 菌 株
Ac240602 为 1 株产 ESBLs 的耐药菌株,对其所携
带的与 ESBLs 相关的耐药基因 blaTEM 进行测序
分析发现,分离菌株 Ac240602 的 blaTEM 基因与
图 5 溶血性实验结果
TEM-1 (GenBank 登录号:MT387455.1) 的序列一
Fig. 5 Hemolytic test results
致;以数据库中 blaTEM 所有的基因分型序列构
8
9
10 、7.70×10 和 7 7.20×10 CFU/g,其中血液中菌
建进化树,发现 TEM-1 与 TEM-155、TEM-47 的
载量最高 (图 6-b)。根据黄鳝的死亡情况绘制生存 亲缘关系最近 (图 9)。
曲线 (图 6-c),采用改良寇氏法计算得到该分离菌
中药敏感性实验 中药敏感性实验结果显
对黄鳝的半数致死量为 1.00×10 CFU/mL。 示,分离菌株 AC240602 对五味子、乌梅子、赤
10
病理组织学结果显示,与健康组黄鳝相比
芍、五倍子和丁香高度敏感,抑菌圈直径分别为
(图版 Ⅲ-1~4),攻毒组黄鳝的肠组织出现溃疡、
15、16、15、18 和 16 mm;对连翘、地榆、蒲公
出血,肠绒毛断裂 (图版 Ⅲ-5);肝脏组织出现出
英、半支莲、川贝母、艾叶、苦棟树皮、黄连、
血、有大量空泡,中性粒细胞渗出 (图版 Ⅲ-6); 黄芩和苏木中度敏感,对柯子、鸡血藤、丹参、
脾脏组织脾索消失、有明显出血,并伴有大量中性
鱼腥草和金银花为低度敏感 (表 6)。
粒细胞渗出 (图版 Ⅲ-7);肾组织肾小球内毛细血
管增生,大量炎性细胞浸润,出血明显 (图版 Ⅲ-8)。 3 讨论
2.6 药物敏感性分析
豚鼠气单胞菌作为一种人-畜-鱼共患的致病
生物被膜形成能力 分离菌株 Ac240602 菌,具有广泛的致病性。近年来,陆续有豚鼠气
[35]
的 OD 550n m 为 0.358 4,空白对照组 OD 值为 0.093 1, 单胞菌感染导致草鱼 、凡纳滨对虾 (Litopenaeus
[40]
[39]
根据 2OD 空白 <OD≤4OD 空白 判断标准,判定分离 vannamei) 、大口黑鲈 、中华绒螯蟹 [37] 等水产
菌株 Ac240602 具有中等的生物被膜形成能力。 动物死亡的报道,并出现多起豚鼠气单胞菌感染
[41]
[42]
药敏实验 药物敏感性实验结果显示,豚 猪 (Sus scrofa) 、鸡 (Gallus gallus) 、袋鼠 (Mac-
鼠气单胞菌 Ac240602 对哌拉西林、头孢曲松、头 ropus spp.) [43] 等动物的病例。本研究首次从黄鳝病
孢哌酮、丁胺卡那、新霉素、庆大霉素、多西环 变组织中分离到豚鼠气单胞菌,进一步丰富了豚
https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
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