Page 242 - 《水产学报》2026年第2期
P. 242

2 期                                     水    产    学    报                                 50 卷


                     M  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12    素、四环素、复方新诺明、头孢他啶和氯霉素高
                 bp
                                                               度敏感,对多黏菌素          B  中度敏感,对羧苄西林、
                2 000                                          青霉素、苯唑西林、氨苄西林、红霉素、环丙沙
                1 000
                 750                                           星等     种药物耐药     (表  5)。
                 500                                               18
                 250
                                                                    耐药基因检测  耐药基因检测结果显示,
                 100
                                                               分离菌株    AC240602  携带  blaTEM、aadA1、aadA2、
                           图 4    毒力基因检测结果                     strA、strB、aacC、Aph(3')-Ia、tetA、parC、dhfrV、
                       Fig. 4 Virulence gene test results      dhfrVⅩⅡ、 dhfrVⅩIII、 sulI、 sulII、 3'CS、 int1、
              M. marker, 1. lip, 2.alt, 3. act, 4. gcaT, 5. ompA, 6. ahp, 7. aer, 8. epr-  VR  等  17  种耐药基因,表明分离菌株为多重耐药
              CAI, 9. hly, 10. ompTsx, 11. flgA, 12. flaH.
                                                               菌株  (图  7)。
                                                                    双纸片协同扩散实验  双纸片协同扩散实

                                                               验 结 果 显 示 , 分 离 菌 株    Ac240602  对 头 孢 他 啶
                                                               和头孢他啶/克拉维酸的抑菌圈直径为分别为                      23
                                                               和  18 mm,对头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸的抑
                                                               菌圈直径为分别为        9  和  17 mm (图  8),表明分离菌
                                                               株  Ac240602  为  ESBLs 阳性菌株;分离菌株        Ac24-
                                                               0602  对美罗培南和美罗培南/EDTA          的抑菌圈直径
                                                               为分别为     17  和  0 mm,表明分离菌株        Ac240602
                                                               为  MBLs 阴 性 。 上 述 结 果 表 明 , 分 离 菌 株
                                                               Ac240602  为  1  株产  ESBLs 的耐药菌株,对其所携
                                                               带的与   ESBLs 相关的耐药基因         blaTEM  进行测序

                                                               分析发现,分离菌株          Ac240602  的  blaTEM  基因与
                           图 5    溶血性实验结果
                                                               TEM-1 (GenBank  登录号:MT387455.1) 的序列一
                         Fig. 5 Hemolytic test results
                                                               致;以数据库中        blaTEM  所有的基因分型序列构
                8
                                    9
              10 、7.70×10 和 7  7.20×10  CFU/g,其中血液中菌
                                                               建进化树,发现         TEM-1  与  TEM-155、TEM-47 的
              载量最高     (图  6-b)。根据黄鳝的死亡情况绘制生存                  亲缘关系最近      (图  9)。
              曲线   (图  6-c),采用改良寇氏法计算得到该分离菌
                                                                    中药敏感性实验  中药敏感性实验结果显
              对黄鳝的半数致死量为           1.00×10 CFU/mL。             示,分离菌株       AC240602  对五味子、乌梅子、赤
                                          10
                   病理组织学结果显示,与健康组黄鳝相比
                                                               芍、五倍子和丁香高度敏感,抑菌圈直径分别为
              (图版 Ⅲ-1~4),攻毒组黄鳝的肠组织出现溃疡、
                                                               15、16、15、18   和  16 mm;对连翘、地榆、蒲公
              出血,肠绒毛断裂          (图版 Ⅲ-5);肝脏组织出现出
                                                               英、半支莲、川贝母、艾叶、苦棟树皮、黄连、
              血、有大量空泡,中性粒细胞渗出                  (图版 Ⅲ-6);       黄芩和苏木中度敏感,对柯子、鸡血藤、丹参、
              脾脏组织脾索消失、有明显出血,并伴有大量中性
                                                               鱼腥草和金银花为低度敏感             (表  6)。
              粒细胞渗出      (图版 Ⅲ-7);肾组织肾小球内毛细血
              管增生,大量炎性细胞浸润,出血明显                 (图版 Ⅲ-8)。       3    讨论

               2.6    药物敏感性分析
                                                                   豚鼠气单胞菌作为一种人-畜-鱼共患的致病
                    生物被膜形成能力  分离菌株                Ac240602     菌,具有广泛的致病性。近年来,陆续有豚鼠气
                                                                                 [35]
              的  OD 550n m  为  0.358 4,空白对照组  OD  值为  0.093 1,  单胞菌感染导致草鱼 、凡纳滨对虾                (Litopenaeus
                                                                                    [40]
                                                                       [39]
              根据 2OD   空白 <OD≤4OD    空白 判断标准,判定分离              vannamei) 、大口黑鲈  、中华绒螯蟹            [37]  等水产
              菌株   Ac240602  具有中等的生物被膜形成能力。                    动物死亡的报道,并出现多起豚鼠气单胞菌感染
                                                                           [41]
                                                                                             [42]
                    药敏实验  药物敏感性实验结果显示,豚                        猪  (Sus scrofa) 、鸡  (Gallus gallus) 、袋鼠  (Mac-
              鼠气单胞菌      Ac240602  对哌拉西林、头孢曲松、头                ropus spp.) [43]  等动物的病例。本研究首次从黄鳝病
              孢哌酮、丁胺卡那、新霉素、庆大霉素、多西环                            变组织中分离到豚鼠气单胞菌,进一步丰富了豚

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
                                                            8
   237   238   239   240   241   242   243   244   245   246   247