Page 21 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 水 产 学 报 50 卷

通讯螯虾 P. leniusculus (CAD44570.1)
99
▲ 中华绒螯蟹 E. sinensis
74
佛罗里达弓背蚁 C. floridanus (EFN70407.1)
40
拇鲁斯按蚊 A. merus (XP_041762551.1)
54 体虱 P. h. corporis (XP_002427623.1)
83
77
柑桔木虱 D. citri (XP_026684955.1)
100 米象 S. oryzae (XP_0307629191)

雕纹似刺尾蝎 C. sculpturatus (XP_023230130.1)
黑腹果蝇 D. melanogaster (NP_001096919.1)

人 H. sapiens (XP_002427621.1)
0.10

图 3 EsRunx 与其他物种的 Runx 氨基酸序列系统进化树分析
使用 MEGA 7.0 软件包采用 NJ 法构建系统发育树；分支数值为 1 000 次分析得到的 bootstrap 值；▲示 EsRunx 在 NJ 树中的位置。
Fig. 3 Phylogenetic analysis of the sequences of Runx proteins in E. sinensis with other species
The phylogenetic tree was constructed by neighbor-joining methods using MEGA 7.0 and bootstrapped 1 000 times; ▲ indicated the site of EsRunx.

HPT Hem Sto Tes Gil Hea Mus Hep
Esβ-actin
EsRunx

图 4 半定量 RT-PCR 分析 EsRunx 在中华绒螯蟹
不同组织中的表达
HPT. 造血组织；Hem. 血细胞；Sto. 胃；Tes. 精巢；Gil. 鳃；Hea.
心脏；Mus. 肌肉；Hep. 肝胰腺；Esβ-actin 作为阳性对照。EsRunx
25 μm
半定量 RT-PCR 循环数 30。 1
Fig. 4 Expression analysis of EsRunx in several tissues
of E. sinensis by semi-quantitative RT-PCR
HPT. hematopoietic tissue; Hem. hemocytes; Sto. stomach; Tes. testis;
Gil. gill; Hea. heart; Mus. muscle; Hep. hepatopancreas; Esβ-actin was
used as a positive control. Semi-quantitative RT-PCR cycle was 30 for
EsRunx
25 μm
2.6 EsRunx dsRNA 最佳干扰时间 2

中华绒螯蟹在注射 EsRunx dsRNA 干扰后， 图版 Percoll 梯度离心法分离的中华绒螯蟹
利用 RT-qPCR 方法检测 EsRunx 在造血组织和血 两种类型血细胞
细胞中的表达变化，结果显示，dsEsRunx 干扰 1. 位于上层的透明细胞，2. 位于下层的颗粒细胞。
24 和 48 h 后，造血组织中 EsRunx 的表达量显著 Plate Two hemocyte subpopulations of E. sinensis
separated by Percoll gradient centrifugation
降低，而在血细胞中 EsRunx 的表达量在 48 和 72 h
1. hyalinocytes in the top layer, 2. granulocytes in the bottom layer.
出现显著下降 (图 8)，因此确定注射 dsEsRunx 的
血细胞依据颗粒特征明显区分为 4 个类群：无颗
最佳干扰时间为 48 h。
粒的透明细胞 (R1)、小颗粒 (R2)、中颗粒 (R3) 及
2.7 EsRunx 基因 dsRNA 干扰后不同类型血细
大颗粒细胞 (R4)，类群之间界限清晰，在 EsRunx
胞的变化 基因干扰 48 h 后，透明细胞比例显著升高，而中

通过流式细胞仪对 EsRunx 干扰后中华绒螯 颗粒和大颗粒细胞比例显著降低，小颗粒细胞的
蟹血细胞亚群的变化情况进行检测， 结果显示， 比例没有明显变化 (图 9)。

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