Page 195 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 熊舒婷，等：草鱼和赤眼鳟 ifi27l2a 基因分子特性、原核表达及抗病毒功能比较 50 卷

* 1.25×10 6 EV *
600
EV
Scifi27l2a 相对表达量 relative expression of Scifi27l2a 400 * * * * * vp7 相对表达量 relative expression of vp7 6.5×10 5 4 * *
ScIFI27L2A-HA
ScIFI27L2A-HA
5×10
200
180
80
5
0
24
0
6
24
12
12
攻毒时间/h 36 48 15 0 0 6 攻毒时间/h 36 48
attack time attack time
(a) (b)
*
*
3.1×10 6 6 EV * 4.5×10 6 EV
ScIFI27L2A-HA
2.1×10
ScIFI27L2A-HA
vp5 相对表达量 relative expression of vp5 1.1×10 6 5 * vp2 相对表达量 relative expression of vp2 2.5×10 6 5 * *
1.0×10
5×10
350
500
100
30
0 100 0
0 6 12 24 36 48 0 6 12 24 36 48
攻毒时间/h 攻毒时间/h
attack time attack time
(c) (d)
图 6 IFI27L2A 抑制病毒复制
(a) Scifi27l2a，(b) vp7，(c)vp5，(d)vp2。EV. pcDNA3.1+空载体，下同。
Fig. 6 IFI27L2A inhibits GCRV virus replication
(a) Scifi27l2a, (b) vp7, (c) vp5, (d) vp2. EV. pcDNA3.1+ empty vector, the same below.
株进行诱导表达，表达后的细菌经过超声破碎， 的 IFI27L2A 的重组蛋白。
离心后收集上清液，纯化后进行 SDS-PAGE 电
2.6 草鱼和赤眼鳟 IFI27L2A 重组蛋白的抗病
泳 。 结 果 显 示 ， 实 验 成 功 获 得 了 重 组 蛋 白
毒功能的比较分析
rCiIFI27L2A 和 rScIFI27L2A 以及 GST 蛋白，其蛋
为进一步明确 IFI27L2A 蛋白的抗病毒效应是
白分子质量分别约为 33.4、33.5 和 26.0 ku (图 7-
蛋白本身直接作用还是依赖其他细胞因子、信号
a~c)。随后将这 3 个重组蛋白一起进行 SDS-PAGE
传导通路等间接调节的方式来实现的，分别在
电泳，结果显示，rCiIFI27L2A 和 rScIFI27L2A 中
CIK 细胞系和 SCK 细胞系中加入草鱼 IFI27L2A
有 IFI27L2A-GST 融 合 蛋 白 和 GST 蛋 白 的 存 在
重组蛋白 (rCiIFI27L2A) 和赤眼鳟 IFI27L2A 重组
(图 7-d)，这在其他研究者的工作中也出现过 。
[34]
蛋 白 (rScIFI27L2A) 进 行 孵 育 约 3 h， 随 后 进 行
利用 GST 抗体进行 Western blot 实验特异性
GCRV 攻 毒 实 验 。 qPCR 结 果 表 明 ， GCRV 在
识别 rIFI27L2A 的 GST 融合蛋白，进而确定重组
CIK 细胞系和 SCK 细胞系中均能有效复制，且草
蛋白的成功制备。结果显示，rCiIFI27L2A 在 26 鱼和赤眼鳟的 IFI27L2A 重组蛋白均可显著抑制
和 33.4 ku 处出现特异性识别条带 (图 8-a)，分别 病毒基因 (vp2、vp5、vp7) 的转录水平，其中攻毒
是 GST 蛋白与 CiIFI27L2A 的 GST 融合蛋白，而 后 48 h 的抑制效果最为显著 (图 9)。对比二者
rScIFI27L2A 在 26 和 33.5 ku 处出现特异性条带 IFI27L2A 重组蛋白在 GCRV 攻毒后期 48 h 时抑制
(图 8-b)，分别是 GST 蛋白与 ScIFI27L2A-GST 融 病毒增殖效果发现，rCiIFI27L2A 孵育组相较于
合蛋白。综上，本实验成功制备了草鱼和赤眼鳟 GST 孵育对照组抑制 GCRV 片段 vp7、vp5、vp2

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