Page 197 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 熊舒婷，等：草鱼和赤眼鳟 ifi27l2a 基因分子特性、原核表达及抗病毒功能比较 50 卷
ku ku 体激活强烈的免疫反应，有助于深入研究宿主-病

150 150
[36]
毒互作机制及抗病毒免疫调控 。实验引入 Poly
100 100 I:C 进行细胞刺激，结果发现，ScIFI27L2A 质粒
的过表达效果明显 (图 10-b)，并且在 GCRV 攻毒
70 70
36 h 后 ， 空 载 组 Scifi27l2a 表 达 被 诱 导 上 调 约
50 50
1.8 倍，而过表达 ScIFI27L2A 组中 GCRV 组并未
40 40 诱导更高的 Scifi27l2a 的表达 (图 10-b)。空载组
rCiIFI27L2A rScIFI27L2A
35 35
Poly I:C 诱导的 Scifi27l2a 表达上调了约 31 倍，显
著高于 GCRV诱导的 Scifi27l2a 表达水平，与此同
25 25
(a) (b) 时，过表达 ScIFI27L2A 组中 Poly I: C 组较空载组
图 8 IFI27L2A 纯化蛋白 Western blot 验证 诱导了更高的 Scifi27l2a 表达水平，倍数约为 2.8
(a) rCiIFI27L2A 纯化蛋白，(b) rScIFI27L2A 纯化蛋白；一抗为 anti- 倍 (图 10-b)。与此同时，GCRV 和 Poly I: C 均诱
GST 抗体。框中为目的蛋白的特异性条带。 导了 IFN 相关基因 (ifn、isg15、irf9) 的表达，其
Fig. 8 Western blot validation of purified 中 GCRV 诱导的 ifn、isg15、irf9 的上调幅度 (1.9~2.3
IFI27L2A protein 倍) 显著低于 Poly I: C 诱导表达 (4.6~178.8 倍)，
(a) rCiIFI27L2A, (b) rScIFI27L2A; primary antibody is anti-GST anti- 与预期结果相反，ScIFI27L2A 质粒的过表达显
body. Bands specific to the target protein are shown in the box.
著抑制 GCRV 和 Poly I: C 诱导的 ifn、isg15、irf9
结果显示，Scifi27l2a 的表达量在攻毒后上调幅度 的表达水平(图 10-e)。为证实结果可靠性，实验
较低，最高为 2 倍，与组织中的部分结果相似 检测了 GCRV攻毒后基因的表达情况，结果显
(图 10-a)；众所周知，Poly I:C 是一种经典的双链 示，攻毒 36 h 时 vp7、vp5、vp2 表达水平均显著上升
RNA 病毒模拟物和免疫激活剂，可通过 TLR3 受 (图 10-f~h)，表明此次攻毒 GCRV 在 SCK 细胞中

2×10 5 GST * * 2×10 5 GST * 2×10 5 GST *
vp7 相对表达量 relative expression of vp7 1×10 0 5 rCiIFI27L2A vp5 相对表达量 relative expression of vp5 1×10 0 5 rCiIFI27L2A vp2 相对表达量 relative expression of vp2 1×10 0 5 rCiIFI27L2A *
*
100
100
100
50
50
50
0 6 12 24 36 48
攻毒时间/h
攻毒时间/h
攻毒时间/h
attack time
attack time
attack time 0 6 12 24 36 48 0 6 12 24 36 48
(a) GST (b) * (c)
rScIFI27L2A
2×10
vp7 相对表达量 relative expression of vp7 1.5×10 0 5 5 5 4 GST * vp5 相对表达量 relative expression of vp5 3×10 0 5 5 5 * * vp2 相对表达量 relative expression of vp2 1.5×10 0 5 5 5 4 GST * *
2×10
2×10
rScIFI27L2A
rScIFI27L2A
1×10
1×10
1×10
5×10
5×10
10
20
10
10
0 6 12 24 36 48
攻毒时间/h
攻毒时间/h
攻毒时间/h
attack time
attack time 0 6 12 24 36 48 0 6 12 24 36 48
attack time
(d) (e) (f)
图 9 草鱼和赤眼鳟 IFI27L2A 重组蛋白抗病毒功能
rCiIFI27L2A 和 GST 蛋白孵育 CIK 后，GCRV 感染不同时间点 GCRV 基因 vp7 (a) ，vp5 (b)，vp2 (c) 的表达，rScIFI27L2A 和 GST 蛋白孵育
SCK 后，GCRV 感染不同时间点 GCRV 基因 vp7 (d)，vp5 (e)，vp2 (f) 的表达水平。
Fig. 9 Antiviral function of recombinant proteins IFI27L2A of C. idella and S. curriculus
Expression levels of GCRV gene vp7 (a), vp5 (b), vp2 (c) at different time points after GCRV infection, followed by incubation with rCiIFI27L2A and
GST proteins in CIK; expression levels of GCRV gene vp7 (d), vp5 (e), vp2 (f) at different time points after GCRV infection, followed by incubation
with rScIFI27L2A and GST proteins in SCK.
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