Page 196 - 《水产学报》2026年第2期
P. 196

2 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

                                                                    1   2  3  4   5  6  7   8  9
                        ku  1   2  3  4   5  6  7   8  9        ku
                        150                                    150
                        100
                                                               100

                         70                                     70
                         50                                     50
                         40                                     40                       rScIFI27L2A
                                                  rCiIFI27L2A
                         35                                     35

                         25                                     25
                                                                20
                         20
                                                                15
                         15
                                         (a)                                     (b)

                            1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13
                                                                    ku  1   2   3  4   5   6   7
                        ku
                                                                    150
                        150
                                                                    100
                        100
                                                                     70
                         70                                                              rCiIFI27L2A
                                                                     50
                         50
                                                                                  rScIFI27L2A
                                                                     40
                         40                          GST                    GST
                                                                     35
                         35
                        25                                           25
                        20
                                                                     20
                        15
                                                                     15
                                             (c)                                   (d)
                                          图 7    草鱼和赤眼鳟的    IFI27L2A  重组蛋白制备
              (a) rCiIFI27L2A,(b) rScIFI27L2A,(c) GST  重组蛋白纯化产物;1. 蛋白  Marker,2. 未纯化上清液,3. 菌体破碎沉淀,4. 流穿液,5~7. 第  1、
              2  和  7  次洗涤,8~13. 纯化后洗脱目的蛋白  1~2、3~4、5~6、7~8、9~10  和  11~12  次的洗脱液混样;图中黑色框中代表目的纯化产物。(d)
              GST、rCiIFI27L2A  及  rScIFI27L2A  的纯化蛋白,1. 蛋白  Marker,2-3. GST  蛋白  1~2  次洗脱缓冲液混样,4~5. rCiIFI27L2A  蛋白  1~2  次洗脱
              缓冲液混样,6~7. rScIFI27L2A  蛋白  1~2  次洗脱缓冲液混样。
                            Fig. 7 Preparation of recombinant protein IFI27L2A of C. idella and S. curriculus
              (a) rCiIFI27L2A, (b) rScIFI27L2A, (c) the purification process of the GST protein; 1. protein Marker, 2. unpurified supernatant, 3. bacterial cell debris, 4.
              flow-through, 5-7. the first and the second and the seventh wash, respectively, 8-13. mixed sample of the eluate that eluted the target protein 1-2, 3-4, 5-6,
              7-8, 9-10, 11-12 times after purification; the black box indicates the purified target protein; (d) SDS-PAGE gel of the purified GST, rScIFI27L2A and
              rCiIFI27L2A proteins. 1. protein Marker, 2-3, 4-5 and 6-7. eluted GST, rCiIFI27L2A and rScIFI27L2A protein 1-2 elution buffer mix, respectively.
              表 达 分 别 约 为    1.3、 1.9、 1.9  倍  (图  9-a~c)。 而   GCRV  病毒复制能力强于        rCiIFI27L2A。
              rScIFI27L2A  孵育组相比于      GST  孵育对照组抑制             2.7    草鱼和赤眼鳟     IFI27L2A  在抗病毒免疫反
              GCRV  片段   vp7、vp5、vp2  表达分别约为      3.6、3.8、     应中的调控分析比较
              3.6  倍  (图  9-d~f)。 对 比  48  h  时  CiIFI27L2A  与
                                                                   IFN  反应是宿主对抗病毒感染的关键免疫防
              ScIFI27L2A  抑 制 病 毒 增 殖 的 综 合 水 平 来 看 ,          御机制 ,本研究证实          IFI27L2A  具有抗病毒功能,
                                                                     [35]
              ScIFI27L2A  抑 制 病 毒 复 制 倍 数 约 是   CiIFI27L2A     但  IFI27L2A  是否是通过促进      IFN  途径来增强抗病
              的  2  倍。综上,草鱼和赤眼鳟           IFI27L2A  重组蛋白       毒效应尚需进一步探讨。为此,以赤眼鳟                  IFI27L2A
              均具有明确的抗病毒功能,且                rScIFI27L2A  抑制     为代表在     SCK  细胞系中开展过表达及攻毒实验。

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
                                                            10
   191   192   193   194   195   196   197   198   199   200   201