Page 194 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 水 产 学 报 50 卷

400 1 000 PBS 2.5 *
Ciifi27l2a 相对表达量 relative expression of Ciifi27l2a 300 Ciifi27l2a 相对表达量 relative expression of Ciifi27l2a 500 * GCRV 攻毒组 * * Ciifi27l2a 相对表达量 relative expression of Ciifi27l2a 2.0

200
*
1.5
*
100
1.0
20
60
0.5
10
15
0
0
0
4
1 2 3 4 5 6 7 8 9
组织
组织
攻毒时间/h
attack time
tissue 2 3 tissue 6 7 0 12 24 36 48
(a) (b) * (c)
Scifi27l2a 相对表达量 relative expression of Scifi27l2a 30 Scifi27l2a 相对表达量 relative expression of Scifi27l2a 160 PBS * * Scifi27l2a 相对表达量 relative expression of Scifi27l2a 2.5 *
GCRV 攻毒组
2.0
110
20
1.5
60
10
40
1.0
20
0.5
2
0
0
0
4
12 24 36 48
1 2 3 4 5 7 8 9 10
组织
组织
attack time
tissue 2 3 tissue 1 7 0 攻毒时间/h
(d) (e) (f)
图 5 草鱼和赤眼鳟 ifi27l2a 的组织分布及应对 GCRV 感染的免疫响应
(a) 健康草鱼，(b) GCRV 攻毒后草鱼，(c) CIK 细胞系，(d) 健康赤眼鳟，(e) GCRV 攻毒后赤眼鳟，(f) SCK 细胞系。1. 心脏，2. 肝脏，3. 脾
脏，4. 肾脏，5. 头肾，6. 肠道，7. 鳃，8. 皮肤，9. 肌肉，10. 鳍条。“*”表示组间存在显著性差异，P<0.05，下同。
Fig. 5 Tissue distribution of ifi27l2a and its immune response to GCRV infection in C. idella and S. curriculus
(a) healthy C. idella, (b) C. idella after GCRV infection, (c) CIK cell lines, (d) healthy S. curriculus, (e) S. curriculus after GCRV infection, (f) SCK cell
lines. 1. heart, 2. liver, 3. spleen, 4. kidney, 5. head kidney, 6. intestine, 7. gill, 8. skin, 9. muscle, 10. fin, respectively. Significant differences between
groups (P<0.05) are indicated by an asterisk (*), the same below.
Scifi27l2a的上调倍数为 1.4～2.0 倍 (图 5-c,f)。草 测时间点均出现不同程度下调，尤其是 GCRV 攻
鱼 肾 细 胞 系 (CIK) 攻 毒 12 h 时 Ciifi27l2a 诱 导 毒后的 24、36 和48 h，ScIFI27L2A 的过表达对病
上 调 约 2.2 倍 ， 而 SCK 细 胞 系 攻 毒 12 h 时 毒复制的抑制效果最为显著 (图 6-b~d)。综上表明，
Scifi27l2a 仅诱导上调约 1.4倍，Ciifi27l2a 被诱导 IFI27L2A 的过表达可有效抑制 GCRV 在细胞内的
上调倍数约为 Scifi27l2a 的 1.6 倍，随着攻毒时 复制。
间的延长，在攻毒后 48 h 时二者表达水平均下降
2.5 IFI27L2A 重组蛋白的制备
至攻毒前水平 (图 5-c,f)。
由于过表达实验无法精准控制蛋白的表达量，
2.4 IFI27L2A 的过表达可抑制 GCRV 复制
为进一步验证 IFI27L2A 蛋白的直接抗病毒作用，
为了探讨 IFI27L2A 对 GCRV 病毒复制的影 并在同等蛋白量作用条件下比较分析草鱼和赤眼
响，实验通过在 SCK 细胞系中过表达 IFI27L2A， 鳟 IFI27L2A 蛋白的抗病毒能力差异。本实验采用
并检测感染 GCRV 病毒后 6、12、24、36 和 48 h 原核表达方法制备了 IFI27L2A 重组蛋白，在以上
的 GCRV 结构蛋白 vp7、vp5、vp2 的表达水平。 过 表 达 实 验 的 基 础 上 ， 分 别 将 CiIFI27L2A 和
qPCR 结果显示，SCK 细胞系中转染 ScIFI27L2A ScIFI27L2A 去除了信号肽的序列 (第 1～19 位氨
质粒后 Scifi27l2a 的表达量显著提高，倍数可达 基酸) 连接至 PGEX-4T-1 原核表达载体上，通
36~295 倍 (图 6-a)，确定 ScIFI27L2A 已成功过表 过 测 序 证 实 已 成 功 构 建 重 组 质 粒 PGEX-4T-1-
达。相较于对照组，过表达 ScIFI27L2A 后，细胞 CiIFI27L2A 和 PGEX-4T-1-ScIFI27L2A。随后，实
内的 GCRV 结构蛋白基因(vp7、vp5、vp2) 在各检 验分别对 GST 空载及 2 个含有目的重组质粒的菌

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