Page 119 - 《水产学报》2025年第12期
P. 119

邹奥锟,等                                                                水产学报, 2025, 49(12): 129610

               1.9    转录组数据测定                                  但无显著性差异         (P < 0.05)(表  1)。养殖实验开
                     测序、组装和序列对比  在养殖实验结                        始前,F    组的初始平均体重和初始总体重显著
                                                               大于   S  组  (P < 0.05),F  组初始平均体重为       S  组
              束停食     24 h  后,通过    MS-222 (100 mg/L) 对鱼
                                                               的  2.27  倍。养殖实验结束后,S          组和   F  组间终
              体进行麻醉,随后对其进行解剖,每组选取                        3
                                                               末平均体重仍存在显著性差异                (P < 0.05),F  组
              个重复、每个重复取            6  尾鱼的内脏团迅速装入
                                                               终末平均体重和终末总体重为                S  组的  2.50  倍。
              冻存管,−80 °C      保存,用于内脏转录组测定。
              从七彩神仙鱼的内脏组织样本中提取总                      RNA,      整个养殖过程中         S  组和  F  组平均体重的测定结
              随后使用      Nanodrop 2000  对提取   RNA  的浓度和         果显示,S     组的终末平均体重为初始平均体重
              纯度进行检测,通过琼脂糖凝胶电泳方法对                              的  2.65  倍,而  F  组的终末平均体重为初始平均
              RNA  的 完 整 性 进 行 检 测 , 同 时 使 用        Agilent    体重的    2.92  倍。
              2100  确定  RNA  完整性值     (RIN  值)。                    异速生长七彩神仙鱼在生长方面,F                   组日
                   所有转录的      mRNA   均使用   Illumina Novaseq    平均增重显著大于          S  组  (P < 0.05);摄食方面,

              6 000  测序平台进行测序,使用             Illumina Truseq   F  组日平均摄食量显著大于            S  组  (P < 0.05),摄
              TMRNA   样本制备套件方法构建序列库,其中                         食率显著小于        S  组  (P < 0.05);饲料效率方面,
              序列库的构建和测序由上海美吉生物医药科技                             F  组饲料效率显著大于          S  组  (P < 0.05);蛋白沉
              有限公司完成。然后使用              fastp  软件删除未插入          积方面,F     组蛋白质沉积率大于            S  组,但差异
              片段的读序       (reads),利用   Hisat2  将质控后的原          不显著    (表  2)。

              始数据与七彩神仙鱼基因组序列进行比对。                                 表 1    异速生长七彩神仙鱼的存活率和体重变化
                     差异表达基因      (DEGs) 的筛选、功能注释                   Tab. 1    Changes in survival rate and weight of
              和富集分析  使用软件              RSEM  来量化基因和                       allometric growth S. haraldi
              转录本表达水平,TPM            被用作表达水平的定量                           项目               S组        F组
                                                                          item            S group   F group
              指标。在获取基因转录本读取的短片段数量
                                                                                                 a
                                                               存活率/% survival rate      96.429±2.525 98.571±3.194 a
              (read counts) 后,使用   DEG-seq  软件鉴定样本之
                                                               初始平均体重/g initial average weight  0.153±0.011 a  0.347±0.030 b
              间  DEGs,将筛选出的         DEGs 进行聚类分析,随
                                                               终末平均体重/g final average weight  0.405±0.080 a  1.014±0.254 b
              后进行功能注释,可以在            NR、Swiss-Prot、Pfam、
                                                               初始总体重/g initial total weight  4.270±0.317 a  9.713±0.853 b
              EggNOG、GO     和  KEGG  等数据库中得到         DEGs
                                                                                                 a
                                                               终末总体重/g final total weight  11.351±2.258 28.382±7.115 b
              的注释结果。                                           注:同一行中不同的小写字母表示差异显著(P < 0.05);下同。
                   对  S  和  F 2  组样品的  DEGs 进行   GO  分析,       Notes: Different lowercase letters in the same row indicate significant
              以更好地了解        2  组  DEGs 富集的    GO  分组和其         differences (P < 0.05); the same below.
              之间的层次关系。采用             KEGG  富集方法,对        S       表 2    异速生长七彩神仙鱼的日平均增重、日平均摄食
              和  F  组  2  组  DEGs 进行富集分析,把互相协调                       量、摄食率、饲料效率和蛋白质沉积率
              的基因富集到共同的代谢通路中,从而更好地                              Tab. 2    Daily average weight gain, daily average feed
              分析   2  组间差异显著的原因。                                     intake, feeding rate, feed efficiency, and
                                                                protein deposition rate of allometric growth S. haraldi
               1.10    数据分析
                                                                       项目              S组          F组
                   使用   SPSS 27.0  统计软件进行单因素方差                         item           S group     F group
              分析   (One-Way ANOVA)。当      P≤0.05  时,表示          日平均增重/(g/d)         0.038±0.011 a  0.102±0.035 b
                                                                daily average weight gain
              差异具有统计学意义,即差异显著。
                                                                日平均摄食量/g            0.221±0.030 a  0.410±0.087 b
                                                                daily average feed intake
               2    结果                                          摄食率/(%/d)           16.131±0.946 b  12.252±0.687 a
                                                                feeding rate
               2.1    生长指标                                      饲料效率/%              17.208±2.622 a  24.321±3.118 b
                                                                feed efficiency
                   通过测定异速生长七彩神仙鱼的存活率和                           蛋白质沉积率/%            20.756±4.380 a  24.662±4.445 a
              体重,结果显示,F           组的存活率较         S  组更高,        protein deposition rate

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
                                                            4
   114   115   116   117   118   119   120   121   122   123   124