Page 193 - 《水产学报》2025年第11期
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葛恒,等                                                                 水产学报, 2025, 49(11): 119616

                    差异表达基因       (DEGs) 筛选  将组织样               显著的相互作用        (表  1)。流速处理      2 w,流速组
              品中比对到参考基因组的             reads 数目和转录本长            大口黑鲈体长和体重显著低于静水组                   (P<0.05);
              度进行归一化,采用            FPKM  法计算转录本或基              处理  4 w,流速组与静水组差异不显著               (P>0.05);
              因表达量。利用         DESeq 2  软件对各组样本中的               处理   6 w,2.5 bl/s 流速显著促进大口黑鲈体长
              基因表达进行差异显著性分析,获取各组之间                             和体重增加      (P<0.05),这与增重率和特定生长
              的  DEGs 集,具体标准为 Fold Change≥2 且假                 率的结果一致。同时,2.5 bl/s 流速处理               6 w  导
              发现率 (FDR) <0.05。                                 致大口黑鲈累积死亡率显著低于静水组、4.5
                    实时荧光定量       PCR(q-PCR) 验证  根据             和  6.5 bl/s 组  (P<0.05) (图  2)。
              转录组测序结果,挑选与氧化应激和生长相关
                                                                2.2    流速对大口黑鲈肠道氧化应激和抗氧化的
              的  DEGs 进行    q-PCR  验证。以    β-actin  为内参基
                                                               影响
              因,使用      Primer 5.0  软件设计由武汉天一华煜
              基因科技有限公司合成的引物。采用                   2 −∆∆C t  法分      双因素方差分析显示,时间对大口黑鲈肠
              析基因的相对表达量。                                       道  MDA、 SOD    和  GPX  有 显 著 影 响   (P<0.05),
                                                               但对  CAT  影响不显著;时间和流速对大口黑鲈
               1.7    数据分析
                                                               肠道   MDA、SOD、CAT       和  GPX  具有显著的相
                   本实验所有生长指标数据通过                 Excel 软件      互作用    (表  1)。2.5~6.5 bl/s 流速处理    24  和  48 h
              进行整理汇总,然后采用             SPSS 22.0 软件  (SPSS,     导致大口黑鲈肠道          MDA  含量显著升高。流速
              美国) 中的单因素方差分析              (One-Way ANOVA)       处理   24 h,2.5 bl/s 组  CAT  和  6.5 bl/s 组  GPX  活
              对大口黑鲈幼鱼的生长指标进行分析,使用                              性均显著高于静水组           (P<0.05)。流速处理      48 h,
              Dunnett 事后检验进行统计分析,当               P<0.05  时     2.5  和  6.5 bl/s 组  SOD  活性显著降低,4.5   和  6.5
              为显著差异。所有指标数据均以平均值±标准                             bl/s 组  CAT  和  GPX  活性显著升高     (P<0.05)。流
              差  (mean±SD) 的方式表示。                              速处理    96 h,2.5 bl/s 组  CAT  活性显著降低,

               2    结果                                         4.5  和  6.5 bl/s 组  SOD、CAT  和  GPX  活性均显
                                                               著降低    (P<0.05) (图  3)。

               2.1    流速对大口黑鲈生长性能和死亡率的影响                        2.3    流速对大口黑鲈肠道消化的影响

                   各实验组大口黑鲈增重率随时间不断增加,                             由图   4  可见,时间对大口黑鲈肠道胰蛋白
              而特定生长率不断降低。双因素方差分析表明                             酶有显著影响,0、2.5         和  6.5 bl/s 流速组胰蛋白
              时间和流速对大口黑鲈增重率和特定生长率有                             酶活性随时间增加而增加,4.5 bl/s 流速组胰蛋

                      表 1    时间和流速对大口黑鲈幼鱼生长性能、肠道抗氧化酶与消化酶活性的双因素方差分析结果
                  Tab. 1    Results of Two-Way Analysis of variance (ANOVA) of time and flow rate on growth performance and
                          activities of intestinal antioxidant enzymes and digestive enzymes in juvenile M. salmoides
                        因素                 时间 time           流速 flow rate         时间+流速 time and flow rate
                       parameters         F        P        F          P            F              P
                 增重率 WGR                318.58    0.00     15.93      0.00        11.02           0.00
                 特定生长率 SGR              156.83    0.00     10.65      0.00         5.48           0.00
                 丙二醛 MDA                77.75     0.00     31.51      0.00        14.95           0.00
                 超氧化物歧化酶 SOD            61.10     0.00     19.77      0.00         7.24           0.00
                 过氧化氢酶 CAT               0.67     0.52      3.14      0.04        30.74           0.00
                 谷胱甘肽过氧化物酶 GPX          60.02     0.00      7.18      0.00        22.52           0.00
                 胰蛋白酶 trypsin           137.99    0.00     59.18      0.00        55.91           0.00
                 α-淀粉酶 AMS               1.49     0.25      3.73      0.03         7.73           0.00
                 脂肪酶 LPS                 2.32     0.12      3.58      0.03         4.05           0.01

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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