Page 112 - 《水产学报》2025年第11期

夏宁，等 水产学报, 2025, 49(11): 119409

个泛素化修饰差异蛋白的修饰位点基序与对应 的 直 接 前 体 ， 参 与 脂 滴 相 关 蛋 白 (perilipin
氨基酸位点被列出 (表 4)。磷酸化修饰差异蛋 3/4/5) 招募 [22] 。这预示着 poly(I:C) 可能通过诱
白 cPLA2 的 修 饰 肽 段 序 列 为 MSLTDHHI- 导 DAGLα 泛素化而影响脂滴相关蛋白的构成。
FVEQQISHK，其第 4 位苏氨酸 (T) 发生磷酸化 实验同样发现 poly(I:C) 刺激后巨噬细胞中三磷
修饰，该位点的修饰水平在 poly(I:C) 刺激后上 酸腺苷结合盒转运体 A1 (ABCA1) 与磷脂酶 D1
调 3.778 71 倍。 (PLD1) 显著上调。ABCA1 可利用载脂蛋白促
进胞内游离磷脂与胆固醇外流，而 PLD1 可以
3 讨论 催化细胞膜上磷脂的水解，并促进脂滴合成与

生长 [23-25] 。磷脂是组成脂滴外层的重要物质，
脂质代谢调控着病毒生命周期，胆固醇、
诱导磷脂代谢相关蛋白 ABCA1 与 PLD1 的泛素
磷脂代谢直接影响病毒膜融合、入侵和转运 [19-20] 。
化可能是 poly(I:C) 改变脂质代谢和影响脂滴合
另一方面，脂滴作为动态变化的多功能细胞器，
成的另一种方式。此外，poly(I:C) 刺激后巨噬
在病毒生命周期中起到重要作用，尤其是 RNA
细胞过氧化物酶酰基辅酶 A 氧化酶 1 (ACOX1)
[21]
病毒 ，机体通过调控脂滴及其内部脂肪酸的
与 HADHA 泛素化水平显著下调。ACOX1 与
合成与分解来间接影响病毒的复制与组装。相
应的是，病毒可通过各种手段调控细胞脂质代 HADHA 是脂肪酸 β 氧化的限速酶 [26-28] ，ACOX1
谢以增强自身的复制。蛋白修饰通过调节脂质 与 HADHA 既可以调控脂滴内部中性脂肪酸的
代谢相关蛋白的活性、稳定性和亚细胞定位， 氧化分解代谢，也可以通过调节外源脂肪酸的
影响着细胞内脂质的合成、分解和转运。因此， 分解以提供脂滴的脂质成分。因此，抑制脂肪
诱导脂质信号通路相关蛋白发生修饰是病毒调 酸 β 氧化关键酶的泛素化可能是 poly(I:C) 改变
控 脂 质 代 谢 的 一 种 潜 在 手 段 。 本 研 究 利 用 脂质代谢进而影响脂滴合成的第 3 种方式。目
poly(I:C) 模拟 dsRNA 病毒刺激草鱼头肾巨噬细 前已知的泛素化方式共分为 9 类，其作用涉及
胞，通过蛋白质谱技术在 PBS 对照组与 poly(I:C) 蛋白酶体降解、线粒体自噬、细胞周期调控等，
刺激组的泛素化修饰差异蛋白中检测到 8 条脂 由于目前并不清楚上述差异蛋白的泛素化类型，
质代谢相关通路的富集聚类，在磷酸化修饰差 因而不能确定这些差异蛋白在 poly(I:C) 诱导脂
异蛋白中检测到 1 条脂质代谢相关通路，表明 质代谢中的具体作用，但可以确定，泛素化修
poly(I:C) 可以诱导巨噬细胞中脂质代谢相关蛋 饰参与了 poly(I:C) 诱导的巨噬细胞脂质代谢变
白的泛素化与磷酸化修饰。 化过程。
实验发现巨噬细胞中二酰甘油脂肪酶 α poly(I:C) 刺激后诱导胞质磷脂酶 A2 (cPLA2)
(DAGLα) 在 poly(I:C) 刺激后泛素化水平上调最 磷酸化水平显著上调。cPLA2 属于磷脂酶 A2
为显著。DAGLα 是一种二酰甘油，即内源性大 (PLA2) 大类，静息状态下定位于细胞质，在钙
麻素 (2-AG) 的合成酶，而二酰甘油是三酰甘油 离子介导下可向核膜与内质网移位，优先于 sn-2

60 60

−lg (P value) 40 −lg(P value) 40

20
20
None None
None None
down up
down up
0 0
−7.5 −5.0 −2.5 0 2.5 5.0 −2.5 0 2.5
log 2 FC (polyIC/PBS) log 2 FC (polyIC/PBS)
(a) (b)
(图 3 Fig.3)

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