Page 181 - 《水产学报》2025年第10期

刘海静，等 水产学报, 2025, 49(10): 109613

表 1 基础饲料组成及其养分含量 究得到授权。

Tab. 1 Composition and nutrients content of
1.4 样品采集
the basal diet %
取样前，所有光棘球海胆禁食 24 h。首先，
成分 组别 group
ingredients 0 mg/kg 15 mg/kg 30 mg/kg 随机选取 9 只海胆，称重，并在水箱中逐个解
无维生素酪蛋白 15.00 15.00 15.00 剖。用无菌解剖剪刀小心剪开海胆围口膜，去
vitamin-free casein
除消化道和体腔液，并小心取出海胆性腺，确
明胶 gelatin 2.00 2.00 2.00
保其完整性。然后，依次称重每只海胆的性腺，
小麦粉 wheat meal 20.00 20.00 20.00
并计算性腺指数 (GSI)：
海带粉 kelp meal 15.00 15.00 15.00
微晶纤维素 19.31 19.308 5 19.307 GSI(%) =
microcrystalline cellulose
性腺最终湿重(g)/海胆最终体重(g)×100%
膨化玉米粉 braised corn flour 20.00 20.00 20.00
最后，将每只光棘球海胆的性腺分为 4 部
0.00 0.001 5 0.003
维生素B 2 vitamin B 2
分：第一部分置于 4% 多聚甲醛中固定，用于
维生素预混料 vitamin premix 1) 2.00 2.00 2.00
矿物质预混料 mineral premix 2) 2.00 2.00 2.00 性腺组织学分析；第二部分储存于−80 °C 冰箱，
用于分析性腺水分含量；第三部分快速置于液
丙酸钙 calcium propionate 0.18 0.18 0.18
氯化胆碱 choline chloride 0.10 0.10 0.10 氮中冷冻，储存于−80 °C 冰箱，用于测定性腺
乙氧基喹啉 ethoxyquin 0.01 0.01 0.01 胶原蛋白含量和胶原蛋白相关基因表达；第四
大豆卵磷脂 soybean lecithin 1.00 1.00 1.00 部分置于洁净无菌的一次性培养皿，用于性腺
鱼油 fish oil 2.40 2.40 2.40 质地特征测定。

1.00 1.00 1.00
磷酸二氢钙 Ca (H 2 PO 4 ) 2
1.5 性腺含水量分析
营养水平 nutrient levels 3)
首先，精确称重 湿性腺，并放入之前
粗蛋白 crude protein 19.25 19.27 19.24 1 g
干燥至恒重的玻璃培养皿中。再在 下干
粗脂肪 crude lipid 4.31 4.33 4.34 80 °C
维生素B 2 实际含量 0.00 0.001 4 6 0.002 9 6 燥至恒重。光棘球海胆性腺含水量的计算：
vitamin B 2 actual contents
含水量(%) =
注：1)维生素预混料(mg或g/kg diet)，维生素D，5 mg；维生素K，
[1−性腺湿重(g)/性腺干重(g)]×100%
10 mg；肌醇，800 mg；维生素C，2 000 mg；叶酸，20 mg；维生

素B 12 ，10 mg；维生素 A，32 mg；维生素 B 6 ，20 mg；泛酸，60 mg；
1.6 性腺胶原蛋白含量分析
生物素，60 mg；烟酸，200 mg；维生素E，240 mg；维生素 B 1 ，
25 mg；微晶纤维素，16.518 g。2)矿物质预混料(mg或g/kg diet)， 采用羟脯氨酸标准曲线法评估海胆性腺中
FeSO 4 ·H 2 O，80 mg；CuSO 4 ·5H 2 O，10 mg；ZnSO 4 ·7H 2 O，50 mg；
的胶原蛋白含量 。按照制造商提供的样品预
[2]
MnSO 4 ·H 2 O，60 mg；Na 2 SeO 3 ·5H 2 O(1%)，25 mg；CoCl 2 ·6H 2 O
(1%)，50 mg；Ca (IO 3 ) 2 ，180 mg；MgSO 4 ·7H 2 O，1 200 mg；沸石， 处理说明操作，使用商业试剂盒 (A030-2-1，南
18.35 g。3)营养水平均为实测值。
京建成生物工程研究所) 分析羟脯氨酸的含量。
Notes: 1) vitamin premix (mg or g/kg diet), vitamin D, 5 mg; vitamin K,
性腺胶原蛋白含量的计算公式：
10 mg; inositol, 800 mg; vitamin C, 2 000 mg; folic acid, 20 mg; vitamin
B 12 , 10 mg; vitamin A, 32 mg; vitamin B 6 , 20 mg; pantothenic acid,
胶原蛋白含量(mg/g)=羟脯氨酸含量(mg/g)×8
60 mg; biotin, 60 mg; niacin acid, 200 mg; α-tocopherol, 240 mg;
vitamin B 1 , 25 mg; microcrystalline cellulose, 16.518 g. 2) mineral
1.7 性腺组织结构分析
premix (mg or g/kg diet), FeSO 4 ·H 2 O, 80 mg; CuSO 4 ·5H 2 O, 10 mg;
ZnSO 4 ·H 2 O, 50 mg; MnSO 4 ·H 2 O, 60 mg; Na 2 SeO 3 (1%), 25 mg; 采用苏木精-伊红 (H.E) 和范吉森 (VG) 染
CoCl 2 ·6H 2 O (1%), 50 mg; Ca (IO 3 ) 2 , 180 mg; MgSO 4 ·7H 2 O, 1 200 mg;
色法对光棘球海胆的性腺进行组织学分析。性
zeolite, 18.35 g. 3) nutrient levels were all measured values.
腺在 4% 多聚甲醛中 4 °C 固定 24 h。然后用一
1.3 伦理声明 系列乙醇分级脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，
切片 (RM2016，徕卡，德国)。最后对连续 2 个
因为光棘球海胆是无脊椎动物，大连海洋 切片分别进行 H.E 和 VG 染色。用直立光学显

大学实验动物保护与使用委员会不要求这项研 微镜 (DM-4000，徕卡，德国) 观察性腺组织的

中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries https://www.china-fishery.cn
3