Page 202 - 《水产学报》2025年第8期
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王玲,等                                                                  水产学报, 2025, 49(8): 089417
                   人 H. sapiens              : MEFGAKRHC----FLRELFSRLGDEEKRAKLAEAAERRQKEAASRGILDVQSVQEKRKKKEKIEKQIATSGPPPE---GGLRWTVS- : 79

                   斑马鱼 D. rerio              : --MGMCLPCL-SGAEDDVVVTPDPETRRKQLAEAAEKRQKETTYRGIKDPEALERKKKKQEESE-KQTMSSAPSGG---GGLKWQVG : 80
                   小鼠 M. musculus            : --MGLCFPC----PAESAPPSPSPEEKREKLAEAAERRQKEAATRGILDIQSVEAKKKKKEQLEKQMATSGPPTA---GGLRWTVS- : 77
                   热带爪蟾 X. tropicalis        : --MGLCLPCL-GGAAGDVVETPDPEVRRRQLAEAAEKRQMEASTRGIKDPYSVEQKKKKKEEMEKALSDSSPAGEG--GGLRWQVG- : 81
                   黑腹果蝇 D. melanogaster      : --MGACLSCC-GQSAEETNLMPSPEERRQQQLDAAEKRRQENEHRGIKNPDSVRRQQQRAEEMQRREEEAARQGQGQ-SNLRWQTS- : 82
                   虾夷扇贝 M. yessoensis        : --MGICYSCFEGGPESSSDDDETRELRRQQMADAALKRQGNAANRGIKDPASVKRKQEAQQRLEEEENKRARMGGGGNGNLKWNMD- : 84
                   大堡礁海绵 A. queenslandica    : --MGNCF-----GFEADEPPQEDLEARRERQAEAAMKRQKENESKGIKNPELLRAKQERREETERRAEATNRQQGSG-GGLKWTVG- : 78
                   长牡蛎 C. gigas              : --MGICLPCL-GGQADD-YDQPSPETRRRQMAEAAEKRKRDDEGRGVKDPEALKRKQQRREDIEKKAEQSGGGGEG--GGLRWQVS- : 80
                                       图 3    长牡蛎与其他物种的      SVIP  氨基酸序列同源比对
              黑色、深灰色和灰色分别表示氨基酸多序列比对同源性为              100%、≥75%  和≥50%。
                     Fig. 3 The multiple sequence alignment of SVIP amino acid sequences from C. gigas and other species
              Black, dark gray, and gray represent amino acid multi sequence alignment homology of 100%, ≥75%, and ≥50%, respectively.

              线,拟合公式:lg (模板初始拷贝数) = −0.305 7×                  的  mRNA  表达变化特征,明确其用于长牡蛎病
              C 值+11.062 (R >0.99),标准曲线拟合程度良                   害预警的表达量阈值,实验检测了长牡蛎血淋
                             2
                t
              好,能够用于计算          CgSVIP  在  PAMPs 或病原刺          巴细胞中     CgSVIP  响应  PAMPs 和病原菌胁迫的
              激下每毫克血淋巴细胞中               CgSVIP mRNA   的绝       mRNA  绝对表达量变化。在           LPS  刺激长牡蛎过
              对表达量。                                            程中,血淋巴细胞中           CgSVIP  的  mRNA  绝对表

              2.4    CgSVIP mRNA  在不同组织中的相对表达水平                达量呈先上升后下降的趋势,LPS                 刺激后     12、
                                                               24  和  48 h,与  SW  组相比,CgSVIP  的  mRNA  绝对
                   采 用  RT-qPCR  检 测 不 同 组 织 中     CgSVIP
                                                               表达量出现显著变化,其中              SW  组的   mRNA   绝
              mRNA   的相对表达水平。结果显示,CgSVIP                在
                                                               对表达量分别为       2.96、2.84  和  3.10 lg(拷贝数/mL),
              长牡蛎的所有组织中呈组成型表达,其中在外
                                                               LPS  组  mRNA  绝对表达量分别为         3.71、3.52  和
              套膜中表达水平最低,在唇瓣和血淋巴细胞中
                                                               3.55  lg(拷 贝 数 /mL), 分 别 为    SW  组 的  1.25、
              表达水平较高,分别为外套膜中表达水平的
                                                               1.24  和  1.15  倍  (P<0.001) (图  5)。
              5.10 (P<0.001) 和  8.69  倍  (P<0.001) (图  4)。
                      10                             f                 4 3   海水组 SW    ***  **  ***
                                                                             脂多糖组 LPS

                  CgSVIP 的相对表达水平 relative expression levels of  CgSVIP  8 6 4 2  a  ab  bc  cd  de  e  CgSVIP 的绝对表达量 absolute expression values of CgSVIP  2 1










                                                                                       12
                                                                                            24
                                                                                   6
                       0
                                2
                                        4
                                    3
                            1
                                                                                    刺激时间/h
                                       组织    5   6   7                 0   0   3  time after stimulation  48  72

                                      tissue                     图 5    LPS  刺激后长牡蛎血淋巴细胞中       CgSVIP  的
                图 4    CgSVIP mRNA  在不同组织中的相对表达水平
                                                                             mRNA  绝对表达量
              1. 外套膜,2. 肝胰腺,3. 鳃,4. 闭壳肌,5. 性腺,6. 唇瓣,7. 血
                                                               “**” 表示  P<0.01;“***” 表示  P<0.001,下同。
              淋巴细胞。
                                                                     Fig. 5 The absolute expression values of
                  Fig. 4 The relative mRNA expression levels of
                                                                  CgSVIP mRNA in C. gigas after LPS stimulation
                          CgSVIP in different tissues
                                                               "**" indicates P<0.01; "***" indicates P<0.001, the same below.
              1. mantle, 2. hepatopancreas, 3. gill, 4. adductor muscle, 5. gonad,

              6. labial palp, 7. haemocytes.
                                                                   在灿烂弧菌刺激长牡蛎过程中,血淋巴细
                                                               胞中  CgSVIP  的  mRNA  绝对表达量呈上升趋势。
              2.5    PAMPs 和病原刺激下        CgSVIP  的  mRNA
                                                               在灿烂弧菌刺激         3、6、12、48     和  72 h,其中
              绝对表达量变化
                                                               SW  组的  mRNA   绝对表达量分别为          2.95、2.62、
                   为了探明     CgSVIP  在  PAMPs 和病原刺激下            2.88、 3.25  和  3.15 lg(拷 贝 数 /mL), Vs 组  CgS-
              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
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