Page 202 - 《水产学报》2025年第8期
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王玲,等 水产学报, 2025, 49(8): 089417
人 H. sapiens : MEFGAKRHC----FLRELFSRLGDEEKRAKLAEAAERRQKEAASRGILDVQSVQEKRKKKEKIEKQIATSGPPPE---GGLRWTVS- : 79
斑马鱼 D. rerio : --MGMCLPCL-SGAEDDVVVTPDPETRRKQLAEAAEKRQKETTYRGIKDPEALERKKKKQEESE-KQTMSSAPSGG---GGLKWQVG : 80
小鼠 M. musculus : --MGLCFPC----PAESAPPSPSPEEKREKLAEAAERRQKEAATRGILDIQSVEAKKKKKEQLEKQMATSGPPTA---GGLRWTVS- : 77
热带爪蟾 X. tropicalis : --MGLCLPCL-GGAAGDVVETPDPEVRRRQLAEAAEKRQMEASTRGIKDPYSVEQKKKKKEEMEKALSDSSPAGEG--GGLRWQVG- : 81
黑腹果蝇 D. melanogaster : --MGACLSCC-GQSAEETNLMPSPEERRQQQLDAAEKRRQENEHRGIKNPDSVRRQQQRAEEMQRREEEAARQGQGQ-SNLRWQTS- : 82
虾夷扇贝 M. yessoensis : --MGICYSCFEGGPESSSDDDETRELRRQQMADAALKRQGNAANRGIKDPASVKRKQEAQQRLEEEENKRARMGGGGNGNLKWNMD- : 84
大堡礁海绵 A. queenslandica : --MGNCF-----GFEADEPPQEDLEARRERQAEAAMKRQKENESKGIKNPELLRAKQERREETERRAEATNRQQGSG-GGLKWTVG- : 78
长牡蛎 C. gigas : --MGICLPCL-GGQADD-YDQPSPETRRRQMAEAAEKRKRDDEGRGVKDPEALKRKQQRREDIEKKAEQSGGGGEG--GGLRWQVS- : 80
图 3 长牡蛎与其他物种的 SVIP 氨基酸序列同源比对
黑色、深灰色和灰色分别表示氨基酸多序列比对同源性为 100%、≥75% 和≥50%。
Fig. 3 The multiple sequence alignment of SVIP amino acid sequences from C. gigas and other species
Black, dark gray, and gray represent amino acid multi sequence alignment homology of 100%, ≥75%, and ≥50%, respectively.
线,拟合公式:lg (模板初始拷贝数) = −0.305 7× 的 mRNA 表达变化特征,明确其用于长牡蛎病
C 值+11.062 (R >0.99),标准曲线拟合程度良 害预警的表达量阈值,实验检测了长牡蛎血淋
2
t
好,能够用于计算 CgSVIP 在 PAMPs 或病原刺 巴细胞中 CgSVIP 响应 PAMPs 和病原菌胁迫的
激下每毫克血淋巴细胞中 CgSVIP mRNA 的绝 mRNA 绝对表达量变化。在 LPS 刺激长牡蛎过
对表达量。 程中,血淋巴细胞中 CgSVIP 的 mRNA 绝对表
2.4 CgSVIP mRNA 在不同组织中的相对表达水平 达量呈先上升后下降的趋势,LPS 刺激后 12、
24 和 48 h,与 SW 组相比,CgSVIP 的 mRNA 绝对
采 用 RT-qPCR 检 测 不 同 组 织 中 CgSVIP
表达量出现显著变化,其中 SW 组的 mRNA 绝
mRNA 的相对表达水平。结果显示,CgSVIP 在
对表达量分别为 2.96、2.84 和 3.10 lg(拷贝数/mL),
长牡蛎的所有组织中呈组成型表达,其中在外
LPS 组 mRNA 绝对表达量分别为 3.71、3.52 和
套膜中表达水平最低,在唇瓣和血淋巴细胞中
3.55 lg(拷 贝 数 /mL), 分 别 为 SW 组 的 1.25、
表达水平较高,分别为外套膜中表达水平的
1.24 和 1.15 倍 (P<0.001) (图 5)。
5.10 (P<0.001) 和 8.69 倍 (P<0.001) (图 4)。
10 f 4 3 海水组 SW *** ** ***
脂多糖组 LPS
CgSVIP 的相对表达水平 relative expression levels of CgSVIP 8 6 4 2 a ab bc cd de e CgSVIP 的绝对表达量 absolute expression values of CgSVIP 2 1
12
24
6
0
2
4
3
1
刺激时间/h
组织 5 6 7 0 0 3 time after stimulation 48 72
tissue 图 5 LPS 刺激后长牡蛎血淋巴细胞中 CgSVIP 的
图 4 CgSVIP mRNA 在不同组织中的相对表达水平
mRNA 绝对表达量
1. 外套膜,2. 肝胰腺,3. 鳃,4. 闭壳肌,5. 性腺,6. 唇瓣,7. 血
“**” 表示 P<0.01;“***” 表示 P<0.001,下同。
淋巴细胞。
Fig. 5 The absolute expression values of
Fig. 4 The relative mRNA expression levels of
CgSVIP mRNA in C. gigas after LPS stimulation
CgSVIP in different tissues
"**" indicates P<0.01; "***" indicates P<0.001, the same below.
1. mantle, 2. hepatopancreas, 3. gill, 4. adductor muscle, 5. gonad,
6. labial palp, 7. haemocytes.
在灿烂弧菌刺激长牡蛎过程中,血淋巴细
胞中 CgSVIP 的 mRNA 绝对表达量呈上升趋势。
2.5 PAMPs 和病原刺激下 CgSVIP 的 mRNA
在灿烂弧菌刺激 3、6、12、48 和 72 h,其中
绝对表达量变化
SW 组的 mRNA 绝对表达量分别为 2.95、2.62、
为了探明 CgSVIP 在 PAMPs 和病原刺激下 2.88、 3.25 和 3.15 lg(拷 贝 数 /mL), Vs 组 CgS-
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