Page 33 - 《水产学报》2025年第5期
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瞿才惠,等 水产学报, 2025, 49(5): 059103
尾 鮰 (Ictalurus punctatus) 、 石 斑 鱼 (Epineph- 数据库 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genome/?te-
[10]
elus spp.) [11] 及 鲢 (Hypophthalmichthys molitrix)、 rm=Sebastiscus+marmoratus)。
鳙 (Aristichthys nobilis) [12] 等鱼类全基因组微卫
1.2 数据分析
星序列的特征分析和标记开发研究。
许氏平鲉 (Sebastes schlegelii) 属鲉形目 (Scor- 利用微卫星搜索软件 MISA(http://pgrc.ipk-
gatersleben.de/misa/) 对许氏平鲉和褐菖鲉全基因
paeniformes) 平 鲉 科 (Sebastiae) 平 鲉 属 (Sebas-
tes) [13-14] ,是一种冷温性近海底层经济鱼类,在 组中完整型微卫星序列进行搜索和统计。MISA
我国渤海、黄海和东海均有分布。秋天雄性许 工具 (MIcroSAtellite identification tool) 是一套开
氏平鲉先成熟,在自然海区 11 月前后交尾,精 源的 perl 语言脚本,用于高通量的微卫星位点
子留在雌性体内,待次年 3 月底卵成熟时受精, 搜索与引物设计,并适用于 EST 和 RNA 测序
胚胎发育在雌体内进行,属于典型的卵胎生鱼 序列 (RNA-seq)、文库核酸序列 (nucleotide) 及
类。利用分子生物学手段辅助许氏平鲉种质资 基因组测序片段 (genome) 等 [23] 。MISA 软件具
源开发,了解其种质资源状况是进行渔业资 有运行指令较简单、运行耗时短以及可与多种
源保护、良种选育和增殖放流工作的重要技术 工具联用等优点,已成为大部分微卫星筛选及
基础 [15-19] 。 引物设计的首选工具 [24-25] 。本研究统计标准设
褐菖鲉 (Sebastiscus marmoratus) 隶属鲉形 置为 MISA 默认参数,经过前期研究可知,以
[27]
目鲉科 (Scorpaenidae) 菖鲉属 (Sebastiscus) [13-14] , 此标准搜索全基因组微卫星得出的结果最优 ,
是一种暖水性底层鱼类,主要栖息于近海底层 即单碱基重复序列最小拷贝数设置为 10,二碱
岩礁区;主要分布于西北太平洋中部、南部沿 基重复序列最小拷贝数设置为 6,三、四、五、
海暖水地带,在我国渤海、黄海、东海和南海 六碱基重复序列最小拷贝数设置为 5。考虑碱
均有分布,是重要的广布型海洋经济鱼类;繁 基互补配对原则和碱基排列顺序的差异,对聚
殖方式为卵胎生,体内受精 [16, 20-21] 。与此同时, 为同一类型的微卫星进行兼并统计。
褐菖鲉也被作为海洋水系生态环境的指示生物,
用于监测海域生态环境,在生态系统中的物质 2 结果
[22]
循环和能量流动方面发挥着重要作用 。 2.1 微卫星位点的分布特点
生物以 DNA 作为遗传信息的载体,得到
利用 MISA 检测的许氏平鲉基因组序列总
DNA 序 列 信 息 有 利 于 生 命 的 探 索 。 自 1990
长度为 848 024 649 bp,序列总数为 741 条,其
年人类基因组计划推进以来,DNA 测序技术的
中有 635 条序列含有 534 272 个微卫星位点,微
发展速度迅猛,生物研究进入了组学时代 [23] 。
卫星序列总长度为 14 151 681 bp,占基因组总
本研究利用微卫星筛选软件 MISA [24-26] ,对许氏
长度的 1.67%,平均每 1 587.25 bp 含有 1 个微
平鲉和褐菖鲉两种鱼类全基因组中的微卫星进
卫星位点 (表 1)。包含 1 个以上微卫星位点的序
行筛选并统计分析,初步探究这两种鱼类基因
列有 584 条,占发生微卫星位点序列的 91.97%。
组中微卫星的分布规律,为进一步研究许氏平
51 条序列包含 1 个微卫星位点,占包含微卫星
鲉和褐菖鲉全基因组的特征提供参考,并为今
位点序列的 8.03%。所有微卫星位点中,共包
后开展两种鱼类种质资源评估和遗传育种等工
含 125 415 个复合型微卫星 (C 型微卫星),占微
作奠定基础。
卫星位点总数的 23.47%。褐菖鲉基因组序列总
1 材料与方法 长度为 795 691 141 bp,序列总数为 90 条,其
中有 77 条序列含有 571 370 个微卫星位点,微
1.1 全基因组来源 卫星序列总长度为 15 854 826 bp,占基因组总
许氏平鲉全基因组数据来自 NCBI Geno- 长度的 1.99%,平均每 1 392.60 bp 含有 1 个微
me 数据库下载,以 FASTA 格式文件保存 (https:// 卫星位点 (表 1)。其中包含 1 个以上微卫星位点
www.ncbi.nlm.nih.gov/genome/?term=Sebastes+ 的 序 列 有 74 条 , 占 发 生 微 卫 星 位 点 序 列 的
schlegelii)。 褐 菖 鲉 全 基 因 组 数 据 来 自 NCBI 96.10%;3 条序列包含 1 个微卫星位点,占包
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