Page 27 - 《水产学报》2025年第5期

郑卫卫，等 水产学报, 2025, 49(5): 059102

180 中仍然可以获得相同的扩增条带 (图 2-b)。目的
155
160 条带序列比对结果显示，用引物对 扩增得
140 131 M9
120 到的雄性个体和雌性个体中共有的短条带长度
数目 number 100 为 145 bp，雌性个体中特异性扩增的长条带长
80
60 56 度 为 214 bp， 即 引 物 对 M9 对 应 的 雌 性 特 异
40 插入片段的大小为 69 bp (图 3)。上述结果
20 12 5 DNA
0 表明，这段位于 W 染色体上的 69 bp 的插入片
≤100 101~200 201~300 301~400 ＞400
段可以作为圆斑星鲽雌性特异 DNA 分子标记。

DNA 片段长度/bp
size of the DNA fragments 2.3 圆斑星鲽雌性特异 NDA 分子标记及遗传
图 1 雌性特异 DNA 片段大小分布 性别鉴定方法的应用
Fig. 1 Statistics for the size distribution of
为了进一步验证雌性特异 DNA 分子标记
female-specific DNA fragments
的普遍适用性和遗传性别检测方法的可操作性，
条带，而在雄性个体中仅扩增出一条短条带 实验用其对乳山市元泽水产养殖有限公司养殖
(图 2-a)。用引物对 M9 对另外 10 个雌性和 10 群体中的 117 尾圆斑星鲽进行了性别检测，同
个雄性个体 DNA 进行的第 2 轮 PCR 扩增验证 时对其性腺组织进行石蜡包埋切片和 H.E 染色。
♂ ♀

1 2 3 4 1 2 3 4 M bp
250
100
(a)
♂ ♀

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
bp
214
145

(b)
图 2 雌性特异 DNA 分子标记对圆斑星鲽雌雄个体的鉴定
(a) 雌性特异 DNA 分子标记对圆斑星鲽雌雄各 4 个个体的鉴定，(b) 雌性特异 DNA 分子标记对圆斑星鲽雌雄各 10 个个体的鉴定。“♂”代表
雄性个体，“♀”代表雌性个体，“M”代表 DL2000 DNA Marker；下同。
Fig. 2 Genetic sex identification of male and female individuals of V. variegatus using the female-specific DNA marker
(a) the genetic sex identification of 4 male and 4 female individuals of V. variegatus using female-specific DNA marker, (b) the genetic sex identifica-
tion of 10 male and 10 female individuals of V. variegatus using female-specific DNA marker. "♂" represents the male individuals, "♀" represents the
female individuals, "M" represents the DL2,000 DNA Marker; the same below.

F-L CTCACACTGCGGACTCCATCCAGAGGTCTCTCATCAACACCACTAGTTTTACTGCAGAGAAACACAATTGTCACCCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAACACAT 107
F-S CTCACACTGCGGACTCCATCCAGAGGTCTCTCATCAACACCACTAGTTTTACTGCAGAGAAACACAATTGTCACCCAAAAAAAAAAAAAATA............... 92
M-S CTCACACTGCGGACTCCATCCAGAGGTCTCTCATCAACACCACTAGTTTTACTGCAGAGAAACACAATTGTCACCCAAAAAAAAAAAAAATA............... 92
MF-F
F-L TTACAGATACTCACACAAAAGCTGAAAATAAATCAAATAATAGTCTGGTCAAATAAATACAGGATTGGAAATACCTGCCCTGTGACAGCTCACAAAGTAAAGCCAGT 214
F-S ......................................................AAATACAGGATTGGAAATACCTGCCCTGTGACAGCTCACAAAGTAAAGCCAGT 145
M-S ......................................................AAATACAGGATTGGAAATACCTGCCCTGTGACAGCTCACAAAGTAAAGCCAGT 145
MF-R
图 3 雌性特异 DNA 分子标记在雌雄个体中扩增的目的条带序列比对及引物位置
“M-S”和“F-S”分别代表在雄性和雌性个体中扩增出的短条带，“F-L”代表在雌性个体中扩增出的长条带，“MF-F”代表上游引物，“MF-R”代
表下游引物。
Fig. 3 Sequence alignment of the short band and the long band amplified using the female-specific DNA marker in
male and female individuals of V. variegatus and the position of primers
"M-S" and "F-S" represent the short band amplified in male and female individuals, "F-L" represents the long band amplified in female individuals, "MF-
F" and "MF-R" represent the upstream and downstream primer, respectively.

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