Page 31 - 《中国药科大学学报》2025年第4期

第 56 卷第 4 期 廖梦归，等：ASO 的发展、递送与免疫疗法的机遇挑战 427

显著增加，不仅改变了其在水溶液中的溶解性，还 替代途径被激活 。因此需关注反义寡核苷酸药
[26]
对其与细胞膜的相互作用产生了深远影响。在电 物在长期使用中的免疫刺激副作用，尤其是纹状体
荷分布方面，尽管修饰并未直接改变寡核苷酸整体 等敏感脑区，尽管化学修饰可降低免疫刺激，但仍
的负电荷属性，但由于空间位阻等因素，影响了其 无法完全避免，所以还需优化以减少免疫反应。
与其他带电分子的相互作用方式。 总而言之，第二代 ASO 相比第一代展示出了对
值得关注的是，ASO 在全身给药时是否存在 mRNA 具有更高的亲和力、更好的组织摄取能力、
潜在的免疫刺激风险，为了探究“大脑中对于反义 更高的核酸酶耐性、更长的体内半衰期和更低的毒
[27]
寡核苷酸药物治疗的反应产生的免疫刺激”，Toonen 性 ，这些改进提升了 ASO 在临床应用中的作用。

等 [25] 通过对经过 PS、2'-OMe 修饰的 ASO 药物处 2.3 第三代 ASOs
理的小鼠进行脑组织 RNA 测序分析。在注射后的 第一代硫代磷酸酯（PS）修饰虽然提高了稳定
小鼠大脑中观察到免疫系统相关基因的显著上调， 性，但降低了与靶标的亲和力；第二代修饰（如
表现为免疫通路激活、小胶质细胞或星形胶质细 2'-F、2'-OMe）进一步增强了抗性，但仍未完全解决
胞激活等，这说明脑室内注射修饰后的 ASO 可能 成药性问题。第三代修饰通过更深层次的结构优
会激活小鼠大脑的先天免疫系统，且这种反应持续 化在稳定性、靶向性和免疫原性调控上展现出显著
时间长且为非序列特异性。此外，对模型猴长期静 优势 。
[28]
脉输注 PS 主链上带有 2'-MOE 修饰的 ASO，血浆 在此主要介绍 3 类非天然骨架修饰，结构如
中补体裂解产物浓度明显升高，这表明补体系统的 图 4 所示。

O

Base
P O O
O -

O O
O Base

O N
Base Base N
P O O N P O
O - O O O Base
O NH
O N

锁核酸（LNA） 肽核酸（PNA） 磷酸二酰胺吗啉代寡聚体（PMO）
图 4 锁核酸、肽核酸、磷酸二酰胺吗啉代寡聚体修饰的化学结构

[30]
1.锁核酸（LNA）：在核糖的 2'-氧和 4'-碳之间 抵抗力 。与传统 ASO 相比，PMO 的吗啉代骨架
引入亚甲基桥，形成受限核糖环，使寡核苷酸保持 以及中性电荷特性可减少非特异性结合，提高体内
C3'-endo 构型，增强与互补链的亲和力和特异性，同 稳定性和安全性 。PMO 修饰的 ASO 在生理 pH
[31]
时提升核酸酶稳定性。 下呈中性，不支持招募 RNase H 的活性，因此主要
2.肽核酸（PNA）：以 N-(2 - 氨基乙基) 甘氨酸单 用于基于空间位阻机制的药物 [32] 。Eteplirsen 是
元替代天然糖–磷酸骨架，形成不带电的伪肽链。 首个获批用于杜氏肌营养不良症（DMD）的 PMO
[33]
常用于体外检测及细胞内靶向阻断。PNA 和 PMO 药物 。
结构均不带电，与血浆蛋白结合的亲和力低于带电 人们普遍认为 PS 修饰具有免疫刺激作用，而
的 ASO，这增加了它们在尿液中的分布和消除 。 中性骨架结构（如 PMO）具有较低的免疫刺激性 ，
[34]
[29]
3.磷酸二酰胺吗啉代寡聚体（PMO）：通过整体 尽管第二、三代修饰在稳定性和免疫原性上优势比
将天然核糖替换为六元吗啉环、磷酸二酯键替换 较显著，但其依赖空间位阻的作用机制效率较低，
为磷酰二胺键，使 ASO 具有电中性，提高了其水溶 且可能通过引起核糖体机制的空间位阻来产生生
[27]
性和细胞膜穿透能力，同时增强了其对核酸酶的 物学效应 。为了解决这一问题，设计了反义寡核