Page 79 - 《渔业研究》2026年第1期

76 渔 业 研 究 第 48 卷

表 2 病原菌 HD4 人工回归感染试验结果
Tab. 2 Results of artificial regression infection test of pathogenic strain HD4
组别 菌液浓度/（CFU/mL） 试验数量/头 死亡数量/头 累计死亡率/% 半致死浓度/（CFU/mL）
Groups Strain concentration Test quantity/ind Number of deaths/ind Death rate LD 50
10 5 10 3 30
10 6 10 5 50
试验组 7
Test groups 10 10 6 60
2.82×10 6
10 8 10 10 100
10 9 10 10 100
对照组 Control group — 10 0 0

2.3 生理生化鉴定 酸盐利用、脲酶、西蒙氏枸橼酸盐利用及鸟氨酸脱
生理生化鉴定结果（表 3）表明，病原菌 HD4 羧酶试验均呈阴性。在生长温度适应性上，病原
为革兰氏阴性菌，其生理生化反应呈现鲜明的阳性/ 菌 HD4 的生存区间具有严格限制，无法在 4 ℃ 以
阴性特征：在碳源代谢与酶活性方面，该菌株对葡 下低温或 40 ℃ 以上高温环境中生长。对比已知的菌
萄糖表现为发酵型产酸，且精氨酸双水解酶、触 株 V. mediterranei 117-T6 的生理生化特征，菌株 HD4
酶、赖氨酸脱羧酶、淀粉酶、氧化酶试验均呈阳 仅在麦芽糖发酵与蔗糖利用两项指标上存在显著差
性，明胶液化能力也为阳性；而 V-P、吲哚、柠檬 异，其余理化指标均高度一致。

表 3 病原菌 HD4 生理生化特征
Tab. 3 Physiological and biochemical characteristics of pathogenic strain HD4
测定项目 V. mediterranei 测定项目 V. mediterranei
Determination items HD4 117-T6 [15] Determination items HD4 117-T6 [15]
革兰氏染色 Gram staining − − 西蒙氏枸橼酸盐 Simmons citrate − −
运动 Motility + + 蔗糖利用 Sucrose utilization − +
单极生鞭毛 Monopolar flagella + + 淀粉酶 Amylase + +
氧化酶 Oxidase + + 脲酶 Urease − −
D-葡萄糖产气 D-glucose + + 麦芽糖发酵 Maltose fermentation − +
乳糖 Lactose − − 鸟氨酸脱羧酶 Ornithine decarboxylase − −
触酶 Catalase + + 明胶液化 Gelatin liquefaction + +
吲哚 Indole − − 柠檬酸盐利用 Citrate utilization − −
精氨酸双水解酶 Arginine dihydrolase + + 40 ℃ 生长 Growth at 40 ℃ − −
赖氨酸脱羧酶 Lysine decarboxylase + + V-P 试验 Voges-Proskauer (V-P) test − −
注: ＋表示阳性，−表示阴性。
Note: ＋ indicates positive，and − indicates negative.

2.4 系统发育树 HD4 对红霉素、大观霉素、氯霉素等 3 种抗生素
基于测序获得的病原菌 HD4 的 16S rRNA 序 表现为高度敏感；对克拉霉素表现为中度敏感；而
列与从 NCBI 数据库下载的基因序列进行系统发育 对青霉素 G、氨苄西林、万古霉素、克林霉素、四
分析。BLAST 序列比对结果显示，分离菌株 HD4 与 环素、米诺环素、诺氟沙星、环丙沙星、左氟沙星、多
数据库中地中海弧菌（序列登录号：X74710.1）的 黏霉素 B 和呋喃妥因等 11 种抗生素表现出耐药性。
一致性最高，相似度达到 100%；在系统发育树 2.6 抑菌试验分析
中，病原菌 HD4 与地中海弧菌聚为一支，聚类置 MIC 测定结果（表 5）显示，病原菌 HD4 对恩
信度为 100%，由此确认分离得到的 HD4 菌株为地 诺沙星、甲砜霉素、氟甲喹、磺胺间甲嘧啶钠、磺胺
中海弧菌（图 4） 。 甲噁唑+甲氧苄啶、氟苯尼考 6 种水产用抗菌药物均
2.5 药物敏感性 表现出较高的敏感性，上述 6 种抗菌药物的 MIC 值分
抗生素药物敏感性结果如表 4 所示，病原菌 别为 0.015、0.25、0.125、1、0.06/1.20、0.25 μg/mL。