Page 78 - 《渔业研究》2026年第1期

第 1 期 吴琮琮等： 紫海胆地中海弧菌病病原鉴定及致病机理研究 75

力减弱、体色褪色，体表有明显溃烂和秃刺现象 琼脂培养基上呈现乳白色，不易形成单菌落，菌落
（图 1b） ；经人工回归感染后的患病紫海胆体表 为圆形隆起，表面光滑，边缘整齐，略黏稠且不易
明显出现溃烂等一系列症状（图 1c） ，与自然发病 被挑起，周边有淡乳色光晕（图 2b） ，这可能是
的紫海胆一致。经分离纯化后，优势菌株 HD4 在 由于病原菌生长速度较快，在固体培养基上可形成

TCBS 平板上呈现亮黄色，菌落大小中等，呈圆形 周生鞭毛，具有涌动能力 [15] ，从而导致其菌落不
隆起状，表面光滑，边缘不整齐，略黏稠且不易被 易形成单菌落。扫描电子显微镜可观察到菌株形态
挑起，周边有淡黄色环形光晕（图 2a） ；在 2216E 呈杆状，大小为 1.0~2.2 μm（图 3） 。

a) b) c)

1 cm 1 cm 1 cm
图 1 健康（a）和患病（b、c）紫海胆
Fig. 1 Healthy (a) and diseased (b, c) H. crassispina

注：a. 健康紫海胆；b. 自然发病的紫海胆症状；c. 人工回归感染后发病的紫海胆症状。
Notes: a. Healthy H. crassispina; b. Symptoms of naturally occurring diseases H. crassispina; c. Symptoms of diseased H.
crassispina that occured after artificial regression infection.

a) b)
下降、棘刺脱落；中期紫海胆均沉于养殖容器底部，
附着力大幅降低，可轻松被取出，体表出现溃疡状，
棘刺脱落明显；末期紫海胆大部分棘刺完全脱落，
体色褪色，最后空壳而死，其症状与自然发病的紫海
胆（图 1b）一致。通过改良寇氏法计算得出病原菌
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HD4 的 LD 为 0 2.82×10 /mL。从人工回归感染后患
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病紫海胆体表病灶部位分离纯化得到优势菌 HD-3，
经鉴定其理化性质与病原菌株 HD4 一致，根据科赫
法确定菌株 HD4 为引起此次紫海胆患病的病原菌。
图 2 病原菌 HD4 菌落形态
Fig. 2 Characteristics of colony morphology and electron
microscopy of pathogenic strain HD4
注：a. TCBS 培养基菌落形态；b. 2216E 培养基菌落
形态。
Notes: a. Colony morphology on TCBS medium; b. Colony
morphology on 2216E medium.

2.2 人工回归感染试验
1.00 μm
人工回归感染试验结果（表 2）表明，采用腹腔
注射病原菌 HD4 可导致紫海胆出现死亡现象，且随 图 3 病原菌 HD4 扫描电镜图
着菌液浓度的升高，死亡率也随之上升。攻毒期间， Fig. 3 Scanning electron microscopy of
初期紫海胆无明显特征，仅表现为运动减少、附着力 pathogenic strain HD4