Page 70 - 《渔业研究》2026年第1期
P. 70

第 1 期            陈锦莉等: 培养条件对微拟球藻           FACHB-2541  生长和  EPA  合成的影响                  67

                  综上可知,微拟球藻           FACHB-2541  最适宜的          3.2 氮浓度对微拟球藻          FACHB-2541  生长及油
              光照强度为      75 µmol/(m ·s) 。                      脂积累的影响
                                    2
                                                                   氮浓度对微藻的生物量积累和生化组成具有显
               3 讨论
                                                               著的调控作用。低氮浓度会限制微藻细胞合成有机
               3.1 氮源种类对微拟球藻           FACHB-2541   生长及        物,影响生长;而当氮浓度过高时,NH 可能会
                                                                                                    +
                                                                                                   4
              油脂积累的影响                                          对微藻细胞产生毒性,通过抑制光合电子传递链或
                  氮是微拟球藻生长的关键营养元素,是合成蛋                         解偶联光合磷酸化来降低能量转换效率,最终影响
              白质、氨基酸及三磷酸腺苷等重要生物分子的主要                           氮同化速率和碳氮平衡           [27] 。本研究中,以乙酸铵
              成分。研究表明,微拟球藻在不同氮源条件下的生                           作为氮源,在       50 mg/L  氮浓度条件下,微拟球藻
              长和油脂积累表现出显著的差异,可能是由各类氮                           FACHB-2541  生长速率较低,可能与氮源供应不足
              源的利用效率及其代谢途径的差异导致的                    [19] 。硝    限制了关键生物大分子(如蛋白质和核酸)的合成
              酸钠需先在硝酸还原酶和亚硝酸还原酶的作用下,                           有关,进而阻碍微藻细胞生长。在该条件下,微拟
              催化还原为铵根(NH ) ,再通过谷氨酰胺合成                          球藻  FACHB-2541  尽管生长受限,却获得了最高
                                   +
                                  4
              酶−谷氨酸合成酶途径被微藻同化利用,该代谢过                           的油脂含量(59.75%) 。其机制可能是在低氮条件
              程能耗较高且转化效率较慢,导致氮利用率偏                             下,微藻细胞中乙酰辅酶            A  羧化酶活性降低,抑
              低 [20] ;但其毒性较低,因此常作为微拟球藻培养                       制了其将乙酰辅酶         A  转化为丙二酰辅酶        A,进而
              的标准氮源。尿素为有机氮源,需要在胞内经脲酶                           限制脂肪酸的生物合成           [28] 。这不仅限制细胞膜磷
                         +
              分解为    NH 与二氧化碳(CO )后才能被进一步                      脂的合成,抑制细胞分裂,还可能诱导细胞将碳流
                        4
                                         2
              吸收利用,其氮利用效率的高低取决于微拟球藻脲                           更多地转向油脂合成途径,从而导致油脂积累的增
              酶活性   [21] 。有研究发现,与其他氮源相比,微拟                     加。相比之下,在         200 mg/L  氮浓度条件下,微拟
              球藻优先利用        NH 形式的氮源进行生长            [22] 。但    球藻  FACHB-2541  在早期(0~8 d)时快速积累生
                               +
                               4
              是,微拟球藻吸收培养基中氯化铵的                  NH 会导致         物量,但在第      8  天后生长趋于停滞,这表明较高氮
                                                    +
                                                   4
              培养基的     pH  值变低,呈酸性。已有研究表明,微                    水平虽然能促进初期生长,但过量                NH 可能引发
                                                                                                  +
                                                                                                 4
              拟球藻作为海洋微藻,最适宜合生长的                  pH  值范围       氨毒胁迫,最终抑制微拟球藻               FACHB-2541  的后
              为  7.5~8.5;过低的   pH  值则不利于微拟球藻的生长                续生长;值得注意的是,在该条件下,EPA                    含量
              和油脂合成     [23] 。                                 (19.79%)最高,说明充足的氮源更有利于                EPA  的
                  与氯化铵(强酸弱碱盐)不同的是,乙酸铵是                         合成,这与张元博等        [29]  的研究结果一致。100 mg/L
              一种弱酸弱碱盐。有研究指出,微拟球藻可以利用                           处理组和    150 mg/L  处理组在整个培养期内的生物
              乙酸为碳源进行同化生长和产物合成                  [24] 。正如本      量均呈现稳定增长,表明该浓度区间的氮供应能够
              研究所得结果(图         1)所示,与其他氮源相比,利                  满足微拟球藻       FACHB-2541  持续增长的需求,且
              用乙酸铵培养的微拟球藻             FACHB-2541  拥有更高         未造成氮源过量引起的抑制效应或碳氮失衡,是微
              的生物量和氮消耗能力。由此可表明,乙酸铵不仅                           拟球藻    FACHB-2541  良好生长的适宜范围。综合
              为微拟球藻      FACHB-2541  生长提供氮源,还提供                考虑生物量、油脂含量及              EPA  产量,150 mg/L
              了额外的碳源,进而促进营养物质吸收和微藻生                            处理组在保持较高生物量的同时实现了                  EPA  的最
              长。为此,利用乙酸铵培养微拟球藻                 FACHB-2541      大产出(142.67 mg/L) ,体现了最佳的生物量积
              可作为混养培养模式。有研究表明,混养培养微藻                           累与目标产物(EPA)合成的协调性。
              细胞的生长性能优于自养培养              [25] 。此外,微拟球           3.3 光照强度对微拟球藻           FACHB-2541  生长及
              藻可以利用乙酸盐延长碳链用于合成油脂                    [26] ,这    油脂积累的影响
              与本研究的实验结果一致。本研究中,在以乙酸铵                               光照强度是影响微拟球藻的生长、生物量积累
              作为氮源时,微拟球藻            FACHB-2541 的油脂含量           以及脂肪酸生物合成的关键环境因子                 [30] 。适度的
              最高可达     49.83%。综上所述,乙酸铵具有良好的                    光照是微藻进行光合作用的基本前提,然而过高的
              生物可利用性(既提供氮源又提供碳源) ,可使微                          光照强度会导致光抑制效应,电子传递链受阻,进
                                                                                                        2
              拟球藻获得更高的生物量、油脂含量及                     EPA  产     而限制了碳固定效率。在本实验               200 µmol/(m ·s)
              量,是本研究中最适宜的氮源。                                   高光照强度条件下,微拟球藻               FACHB-2541  生长
   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75