Page 114 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期            郭    香等: 基于  COⅠ基因的菲律宾蛤仔养殖与野生群体遗传多样性分析                                805

              with  arithmetic  means, UPGMA) 构 建 系 统 发 育      或者颠换。对野生和养殖群体分别进行分析,3                     个
              树,各分支的支持率均用            1 000  次自举法检验。运           野生群体的     COⅠ基因序列包含        45  个变异位点,占
              用  ARLEQUIN  v3.5  软 件  [13]  中 的 分 子 变 异 分 析    总变异位点的     71.4%,其中    23  个为单变异位点。2      个
              (Analysisof molecular variance,AMOVA)方法估         养殖群体的     COⅠ基因序列包含        31  个变异位点,占
              算遗传变异(组间方差           Φ 、组内群体间        Φ S C  及群   总变异位点的      49.2%,其中    10  个为单变异位点。
                                    CT
              体内   Φ )在群体内和群体间的分布,并计算群体                            在  5  个菲律宾蛤仔群体中,检测到高水平的遗
                    ST
              间遗传距离(F-statistics,F )及其显著性(P<0.01,              传多样性(表      1) ,单倍型多样性(Hd)为           0.880~
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              显著) ,重复次数设置为           10 000  次。由  DnaSP  软     0.938,核苷酸多样性(π)为          0.001~0.010,核苷酸
              件输出单倍型文件,利用            POPART  软件  [14]  构建中     差异数(k)为      3.77~6.19。其中,野生群体的单倍
              介邻接网络算法(Median joining network,MJN)              型多样性指数为         0.905~0.938,核苷酸多样性为
              以分析单倍型之的关系,绘制基于                  COⅠ单倍型          0.005~0.010,核苷酸差异数为       3.77~6.19。2  个养殖
              之间的谱系关系的网络图。本研究中的核苷酸序                            菲律宾蛤仔群体的单倍型多样性为                  0.880~0.902,
              列 数 据 在   GenBank  中 的 序 列 号 为 : MN393298~       核苷酸多样性为      0.001~0.006,核苷酸差异数为       3.80~
              MN393459。                                        3.85。单倍型多样性指数大于            0.9  的群体有   4  个,
                                                               包括  3 个野生群体和云霄养殖群体。核苷酸多样性
               2 结果
                                                               指数最高的群体为朝鲜海州群体,其                π  值为  0.010;
               2.1 群体遗传多样性                                     2  个朝鲜野生群体的核苷酸差异数均在                 4.0  以上。
                  COⅠ基因序列经过组装分析、比较确认,除                         通过比较    2  个养殖群体的单倍型多样性和核苷酸多
              去引物和部分序列,最终得到长度为                  646 bp  的基     样性,可知云霄群体均略高于东山群体。这些结果
              因片段,变异位点为           63  个,占总位点数的       9.8%,     表明,菲律宾蛤仔野生群体的遗传多样性的丰富程
              其中简约信息位点         34  个、单变异位点      29  个。变异       度显著高于养殖群体,其中            2  个朝鲜野生群体的遗
              位点中,没有检测到插入和缺失变异,全部为转换                           传多样性程度最高。


                                     表 1    基于  COⅠ基因的  5  个菲律宾蛤仔群体的遗传多样性参数
                      Tab. 1    Summary of genetic diversity indices of 5 populations of R. philippinarum based on COⅠ gene
                         地点
                        Locality         样本数目   N    单倍型数  n    单倍型多样性    Hd    核苷酸差异数   k    核苷酸多样性 π
                 云霄 YX(23°56'N、117°23'E)    30          18          0.902           3.85          0.001
                 东山 DS(23°40'N、117°17'E)    37          17          0.880           3.80          0.006
                 莱州 LZ(37°02'N、119°69'E)    15          11          0.905           3.77          0.005
                 南浦 NP(38°43'N、125°25'E)    40          18          0.919           4.05          0.006
                 海州 HJ(38°02'N、126°36'E)    40          21          0.938           6.19          0.010
                        总计  Total           162         59          0.942           5.19          0.008

                  在所有的样品中,63           个多态性位点定义了               11  和  9  个独享单倍型。在全部群体中,单倍型数
              59  个单倍型,其分布频率见表           2。其中,群体独享             量众多,但是未观测到占绝对优势的单倍型,其分
              单倍型共    42  个,占单倍型总数的        71.2%;17  个单倍       布相当分散,显示出菲律宾蛤仔具有很高的单倍型
              型被两个或者多个群体所共享。最大单倍型                     Hap 4    多样性。
              分布在除莱州群体外的          4  个群体的   25  个个体中,占          2.2 群体遗传结构
              总样本数的      15.4%(25/162) 。仅  2  个单倍型    Hap 2        经 邦 弗 朗 尼 校 正 后 , 两 两 群 体 间 的      F 为
                                                                                                        t
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              (14.8%,24/162)和    Hap 3(4.9%,8/162)在    5  个    0.052~0.300,群体间   F 最大的是东山与海州群体
                                                                                   t
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              群体中均被观测到;第三大单倍型                Hap 13(7.4%,      (表  3) 。2  个养殖群体间的        F 为 t  0.052,且遗传
                                                                                          s
              12/162)被  2 个养殖群体共享。2 个养殖群体共有                    分化不显著(P=0.036>0.01) 。野生群体两两间的
                                                                                                        t
              22  个单倍型,占单倍型总数的           37.3%,而东山和云           的遗传分化均达到极显著水平(P<0.01) ,F 介
                                                                                                       s
              霄群体分别仅有        4  和  5  个独享单倍型。朝鲜的海州             于  0.126~0.197;中国莱州群体与        2  个朝鲜群体的
              和南浦、中国的莱州          3  个野生群体共有       41  个单倍      F 一样大,均为       0.197。养殖群体和野生群体间的
                                                                t
                                                                s
              型 , 占 单 倍 型 总 数 的     69.5%, 并 且 分 别 有   13、     F 介于   0.072~0.300  之间,其中莱州群体与        2  个养
                                                                t
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