Page 114 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期 郭 香等: 基于 COⅠ基因的菲律宾蛤仔养殖与野生群体遗传多样性分析 805
with arithmetic means, UPGMA) 构 建 系 统 发 育 或者颠换。对野生和养殖群体分别进行分析,3 个
树,各分支的支持率均用 1 000 次自举法检验。运 野生群体的 COⅠ基因序列包含 45 个变异位点,占
用 ARLEQUIN v3.5 软 件 [13] 中 的 分 子 变 异 分 析 总变异位点的 71.4%,其中 23 个为单变异位点。2 个
(Analysisof molecular variance,AMOVA)方法估 养殖群体的 COⅠ基因序列包含 31 个变异位点,占
算遗传变异(组间方差 Φ 、组内群体间 Φ S C 及群 总变异位点的 49.2%,其中 10 个为单变异位点。
CT
体内 Φ )在群体内和群体间的分布,并计算群体 在 5 个菲律宾蛤仔群体中,检测到高水平的遗
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间遗传距离(F-statistics,F )及其显著性(P<0.01, 传多样性(表 1) ,单倍型多样性(Hd)为 0.880~
st
显著) ,重复次数设置为 10 000 次。由 DnaSP 软 0.938,核苷酸多样性(π)为 0.001~0.010,核苷酸
件输出单倍型文件,利用 POPART 软件 [14] 构建中 差异数(k)为 3.77~6.19。其中,野生群体的单倍
介邻接网络算法(Median joining network,MJN) 型多样性指数为 0.905~0.938,核苷酸多样性为
以分析单倍型之的关系,绘制基于 COⅠ单倍型 0.005~0.010,核苷酸差异数为 3.77~6.19。2 个养殖
之间的谱系关系的网络图。本研究中的核苷酸序 菲律宾蛤仔群体的单倍型多样性为 0.880~0.902,
列 数 据 在 GenBank 中 的 序 列 号 为 : MN393298~ 核苷酸多样性为 0.001~0.006,核苷酸差异数为 3.80~
MN393459。 3.85。单倍型多样性指数大于 0.9 的群体有 4 个,
包括 3 个野生群体和云霄养殖群体。核苷酸多样性
2 结果
指数最高的群体为朝鲜海州群体,其 π 值为 0.010;
2.1 群体遗传多样性 2 个朝鲜野生群体的核苷酸差异数均在 4.0 以上。
COⅠ基因序列经过组装分析、比较确认,除 通过比较 2 个养殖群体的单倍型多样性和核苷酸多
去引物和部分序列,最终得到长度为 646 bp 的基 样性,可知云霄群体均略高于东山群体。这些结果
因片段,变异位点为 63 个,占总位点数的 9.8%, 表明,菲律宾蛤仔野生群体的遗传多样性的丰富程
其中简约信息位点 34 个、单变异位点 29 个。变异 度显著高于养殖群体,其中 2 个朝鲜野生群体的遗
位点中,没有检测到插入和缺失变异,全部为转换 传多样性程度最高。
表 1 基于 COⅠ基因的 5 个菲律宾蛤仔群体的遗传多样性参数
Tab. 1 Summary of genetic diversity indices of 5 populations of R. philippinarum based on COⅠ gene
地点
Locality 样本数目 N 单倍型数 n 单倍型多样性 Hd 核苷酸差异数 k 核苷酸多样性 π
云霄 YX(23°56'N、117°23'E) 30 18 0.902 3.85 0.001
东山 DS(23°40'N、117°17'E) 37 17 0.880 3.80 0.006
莱州 LZ(37°02'N、119°69'E) 15 11 0.905 3.77 0.005
南浦 NP(38°43'N、125°25'E) 40 18 0.919 4.05 0.006
海州 HJ(38°02'N、126°36'E) 40 21 0.938 6.19 0.010
总计 Total 162 59 0.942 5.19 0.008
在所有的样品中,63 个多态性位点定义了 11 和 9 个独享单倍型。在全部群体中,单倍型数
59 个单倍型,其分布频率见表 2。其中,群体独享 量众多,但是未观测到占绝对优势的单倍型,其分
单倍型共 42 个,占单倍型总数的 71.2%;17 个单倍 布相当分散,显示出菲律宾蛤仔具有很高的单倍型
型被两个或者多个群体所共享。最大单倍型 Hap 4 多样性。
分布在除莱州群体外的 4 个群体的 25 个个体中,占 2.2 群体遗传结构
总样本数的 15.4%(25/162) 。仅 2 个单倍型 Hap 2 经 邦 弗 朗 尼 校 正 后 , 两 两 群 体 间 的 F 为
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s
(14.8%,24/162)和 Hap 3(4.9%,8/162)在 5 个 0.052~0.300,群体间 F 最大的是东山与海州群体
t
s
群体中均被观测到;第三大单倍型 Hap 13(7.4%, (表 3) 。2 个养殖群体间的 F 为 t 0.052,且遗传
s
12/162)被 2 个养殖群体共享。2 个养殖群体共有 分化不显著(P=0.036>0.01) 。野生群体两两间的
t
22 个单倍型,占单倍型总数的 37.3%,而东山和云 的遗传分化均达到极显著水平(P<0.01) ,F 介
s
霄群体分别仅有 4 和 5 个独享单倍型。朝鲜的海州 于 0.126~0.197;中国莱州群体与 2 个朝鲜群体的
和南浦、中国的莱州 3 个野生群体共有 41 个单倍 F 一样大,均为 0.197。养殖群体和野生群体间的
t
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型 , 占 单 倍 型 总 数 的 69.5%, 并 且 分 别 有 13、 F 介于 0.072~0.300 之间,其中莱州群体与 2 个养
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