Page 16 - 《水产学报》2026年第3期
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文章编号: 1000-0615(2026)03-039102-18 , 2026, 50(3): 039102
JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA
DOI: 10.11964/jfc.20250815111
钟照威, 袭宁, 杨真, 等. 日本鳗鲡性腺细胞系高效构建及其应用 [J]. 水产学报, 2026, 50(3): 039102.
Zhong Z W, Xi N, Yang Z, et al. Efficient establishment and application studies of the gonadal cell lines from Japanese eel
(Anguilla japonica) [J]. Journal of Fisheries of China, 2026, 50(3): 039102 (in Chinese).
日本鳗鲡性腺细胞系高效构建及其应用
1,2
1,3
1,3
1,3
1,3
钟照威 , 袭 宁 , 杨 真 , 丁 震 , 石胜凯 ,
罗丁园 , 卢一桢 , 姜永华 1,3*
1,3
1,3
(1. 集美大学,海水养殖生物育种全国重点实验室,福建 厦门 361021;
2. 厦门大学海洋与地球科学学院,福建 厦门 361005;
3. 集美大学,农业农村部东海海水健康养殖重点实验室,福建 厦门 361021)
摘要: 【目的】建立日本鳗鲡性腺组织细胞系并开展应用,旨在为其性腺发育机制、性别
决定机制、干细胞诱导等研究提供体外模型。 【方法】通过优化 L-15 基础培养基(添加
15% 胎牛血清、生长因子、日本鳗鲡血清及胚胎提取物等)、培养温度、传代比例,结合
组织块培养法开展性腺组织细胞的原代和传代培养;利用半定量 PCR 技术检测性腺标记
基因的表达;采用电穿孔法评估基因转染效率;通过基因过表达及 RNA 干扰实验验证细
胞系在基因功能研究中的适用性。 【结果】成功建立日本鳗鲡卵巢组织细胞系(AJOTCL)
和精巢组织细胞系(AJTTCL)并分别稳定传代至 120 代和 100 代,冻存复苏后细胞存活
率超过 90%;性腺细胞形态均以成纤维样为主(梭形、棱形),呈漩涡状排列,其中
AJOTCL 高密度时呈卵圆形;标记基因检测显示,AJOTCL 中 foxl2、sox3 高表达(与卵巢
组织相似),AJTTCL 中 dmrt1、amh 高表达(与精巢组织相似),均弱表达生殖细胞标
记基因 dnd,表明两个细胞系均以性腺体细胞为主;电穿孔法转染 pEGFP-N1 质粒的效率
高(≥60%);基于细胞系的基因功能研究表明,过表达多能性因子 nanog、oct4 及
lin28a/b 可激活下游通路从而促进细胞增殖,而敲降 nanog 后导致细胞的分裂功能显著抑
制,导致细胞开始衰亡。 【结论】本研究建立的日本鳗鲡 AJOTCL 以卵巢体细胞为主体,
AJTTCL 以精巢支持细胞为主体,性腺细胞系具有稳定的生长特性和高效的基因操作潜能。
关键词: 日本鳗鲡;细胞系;原代培养;卵巢;精巢;基因转染
中图分类号: S 917.4 文献标志码: A
鳗鲡 (Anguilla spp.) 是世界性的水产养殖种类, 量的 70%,2024 年我国鳗鲡养殖产量为 31.04 万 t,
具有很高的营养价值和经济价值。近 30 年来,我 第一产业年产值 400 亿元以上 。鳗鲡是降海洄游
[1]
国鳗鲡养殖产量一直居世界首位,约占全球总产 型鱼类,生活史复杂,包括受精卵、柳叶鳗、玻
收稿日期:2025-08-29 修回日期:2025-09-19
资助项目:国 家 重 点 研 发 计 划 (2024YFD2401002); 国 家 自 然 科 学 基 金 (42476103, 41306174); 福 建 省 自 然 科 学 基 金
(2024J01704);厦门市自然科学基金 (3502Z202473056)
第一作者:钟照威,从事海洋生物学研究,E-mail:zzw1996@jmu.edu.cn
通信作者:姜永华,从事水产动物生殖生理及发育生物学研究,E-mail:yhjiang1974@jmu.edu.cn
©《水产学报》编辑部(CC BY-NC-ND 4.0) Copyright © Editorial Office of Journal of Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)
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