Page 16 - 《水产学报》2026年第3期
P. 16

文章编号: 1000-0615(2026)03-039102-18                                            , 2026, 50(3): 039102





                                              JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA

                                                 DOI: 10.11964/jfc.20250815111

              钟照威, 袭宁, 杨真, 等. 日本鳗鲡性腺细胞系高效构建及其应用 [J]. 水产学报, 2026, 50(3): 039102.
              Zhong Z W, Xi N, Yang Z, et al. Efficient establishment and application studies of the gonadal cell lines from Japanese eel
              (Anguilla japonica) [J]. Journal of Fisheries of China, 2026, 50(3): 039102 (in Chinese).


                               日本鳗鲡性腺细胞系高效构建及其应用



                                1,2
                                               1,3
                                                                            1,3
                                                                                           1,3
                                                              1,3
                        钟照威 ,  袭    宁 ,  杨    真 ,  丁    震 ,  石胜凯 ,
                                        罗丁园 ,  卢一桢 ,  姜永华                     1,3*
                                                               1,3
                                                 1,3
                                (1. 集美大学,海水养殖生物育种全国重点实验室,福建 厦门 361021;
                                      2. 厦门大学海洋与地球科学学院,福建 厦门 361005;
                              3. 集美大学,农业农村部东海海水健康养殖重点实验室,福建 厦门 361021)

                   摘要: 【目的】建立日本鳗鲡性腺组织细胞系并开展应用,旨在为其性腺发育机制、性别
                   决定机制、干细胞诱导等研究提供体外模型。 【方法】通过优化                                L-15  基础培养基(添加
                   15%  胎牛血清、生长因子、日本鳗鲡血清及胚胎提取物等)、培养温度、传代比例,结合
                   组织块培养法开展性腺组织细胞的原代和传代培养;利用半定量                                 PCR  技术检测性腺标记
                   基因的表达;采用电穿孔法评估基因转染效率;通过基因过表达及                                  RNA  干扰实验验证细
                   胞系在基因功能研究中的适用性。 【结果】成功建立日本鳗鲡卵巢组织细胞系(AJOTCL)
                   和精巢组织细胞系(AJTTCL)并分别稳定传代至                       120  代和  100  代,冻存复苏后细胞存活
                   率超过    90%;性腺细胞形态均以成纤维样为主(梭形、棱形),呈漩涡状排列,其中

                   AJOTCL  高密度时呈卵圆形;标记基因检测显示,AJOTCL                       中  foxl2、sox3  高表达(与卵巢
                   组织相似),AJTTCL         中  dmrt1、amh  高表达(与精巢组织相似),均弱表达生殖细胞标
                   记基因    dnd,表明两个细胞系均以性腺体细胞为主;电穿孔法转染                             pEGFP-N1  质粒的效率
                   高(≥60%);基于细胞系的基因功能研究表明,过表达多能性因子                                       nanog、oct4  及
                   lin28a/b  可激活下游通路从而促进细胞增殖,而敲降                    nanog  后导致细胞的分裂功能显著抑
                   制,导致细胞开始衰亡。 【结论】本研究建立的日本鳗鲡                            AJOTCL   以卵巢体细胞为主体,
                   AJTTCL  以精巢支持细胞为主体,性腺细胞系具有稳定的生长特性和高效的基因操作潜能。
                   关键词: 日本鳗鲡;细胞系;原代培养;卵巢;精巢;基因转染
                   中图分类号: S 917.4                              文献标志码: A


                   鳗鲡  (Anguilla spp.) 是世界性的水产养殖种类,            量的  70%,2024  年我国鳗鲡养殖产量为           31.04  万  t,
              具有很高的营养价值和经济价值。近                  30  年来,我       第一产业年产值       400  亿元以上 。鳗鲡是降海洄游
                                                                                         [1]
              国鳗鲡养殖产量一直居世界首位,约占全球总产                            型鱼类,生活史复杂,包括受精卵、柳叶鳗、玻



              收稿日期:2025-08-29        修回日期:2025-09-19
              资助项目:国 家 重 点 研 发 计 划  (2024YFD2401002); 国 家 自 然 科 学 基 金  (42476103, 41306174); 福 建 省 自 然 科 学 基 金
                      (2024J01704);厦门市自然科学基金  (3502Z202473056)
              第一作者:钟照威,从事海洋生物学研究,E-mail:zzw1996@jmu.edu.cn
              通信作者:姜永华,从事水产动物生殖生理及发育生物学研究,E-mail:yhjiang1974@jmu.edu.cn
              ©《水产学报》编辑部(CC BY-NC-ND 4.0)                Copyright © Editorial Office of Journal of Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)
              中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries                        https://www.china-fishery.cn
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