Page 174 - 《水产学报》2026年第2期
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2 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

              可引发严重的系统性诺卡氏菌病，给水产养殖生                            通过减轻氧化损伤、缓解内质网应激和抑制炎症
              产带来巨大经济损失          [3-4] 。患诺卡氏菌病的大口黑             反应等机制提供更强的保护作用                [31-32] 。此外，富
              鲈常表现为内脏器官肿大，并在鳃弓、肾实质、                            硒益生菌还能协同提高微量元素生物利用度，增
              肝脏组织及脾脏等部位形成多发性肉芽肿结节                     [5-6] 。  强益生菌作用效能        [33-34] 。因此，富硒益生菌兼具
              血液学研究表明，感染鰤诺卡氏菌后鱼体出现明                            营养补充与免疫调节的双重功能，是水产养殖健
              显的生理指标紊乱，包括红细胞渗透脆性升高，                            康可持续发展的潜在策略           [35-36] 。
              多种血清生化指标如碱性磷酸酶                 (ALP)、溶菌酶             在本研究中，从健康大口黑鲈肠道中分离获
                                                        [7]
              活性、总蛋白和尿素氮             (BUN) 值的异常变化 。            得  1  株粪肠球菌，并成功构建富硒菌株。通过                42 d
              组织病理学观察发现，该菌主要在宿主巨噬细胞                            的养殖实验，系统评估了普通粪肠球菌                  (MSEF22)
              的吞噬体中增殖，由于病原体无法被彻底清除，                            与富硒粪肠球菌        (EFSe) 作为饲料添加剂对大口黑
              诱导了促炎因子基因           (如  IL-1β 和  TNF-α) 异常高      鲈生长性能、肝脏抗氧化能力及肠道菌群结构的
              表达，进而引发剧烈的炎症级联反应 。目前，                            影响。此外，通过鰤诺卡氏菌的攻毒实验，进一
                                                 [8]
              防治鰤诺卡氏菌感染的主要措施仍依赖于抗生素                            步探究富硒粪肠球菌在提升机体抗感染能力和调
              和疫苗 。然而这些防治策略存在耐药菌株频繁                            控促炎因子白细胞介素-1β (IL-1β) 和肿瘤坏死因
                     [9]
              出现、疫苗保护率不高等问题，且抗生素在水产                            子-α (TNF-α) 方面的潜在作用，为实现大口黑鲈
              养殖中的使用已对共生微生物群落和水域生态系                            健康、高效、可持续养殖提供了新思路和理论依据。
              统造成了不良影响         [10-12] 。因此，探索减少抗生素
                                                                1    材料与方法
              依赖的替代型防控措施，已成为当前水产疾病防

                                   [13]
              治领域的重要研究方向 。
                                                                1.1    实验鱼暂养管理
                   益生菌是指单一或混合的活性、非致病性微
              生物，通过调节宿主微生态平衡以增强其免疫功                                实验用健康大口黑鲈购自武汉泰宏源农业科
              能、促进生长发育，被视为饲料添加剂的功能性                            技有限公司，体重为          (10.2±3.3) g。实验鱼在具备
              替代物    [14-16] 。益生菌在水产养殖中的应用已被广                  持续曝气及机械过滤系统的圆形水槽 (直径                  3.0 m，
              泛报道    [17] 。粪肠球菌   (Enterococcus faecalis) 作为   水深  1.2 m) 中暂养   14 d，期间光照周期为         14L∶
              脊椎动物肠道中的优势益生菌，不仅在食品加工                            10D。适应期内每日监测水质指标，水温                   (22.1±
              和动物营养领域广泛应用，具有促进鱼类免疫功                            1.5)℃、pH  值  7.5±0.2、溶解氧>7.1 mg/L，氨氮 (痕
              能的潜力 ，在水生动物健康管理中亦展现出良                            量)。暂养期间投喂商品饲料             (武汉大北农水产科
                       [18]
              好前景    [19-20] 。相关研究表明，以粪肠球菌为饲料                  技有限公司)，每天投喂         2  次。实验开始前停食       24 h。
                                                        [21]
              添加剂可显著提升虹鳟             (Oncorhynchus mykiss) 、
                                                                1.2    细菌分离与鉴定
              银 高 体 鲃  (Puntius  gonionotus) [22]  和 细 手 正 螯 虾
              (Astacus leptodactylus) [23]  的生长性能、饲料转化效            无菌条件下采集健康大口黑鲈肠道组织，剪
              率及免疫反应，并显著提高其在感染嗜水气单胞                            碎后置入    1.5 mL  无菌离心管中匀浆处理，并接种
              菌  (Aeromonas hydrophila) 和格氏乳球菌    (Lactococ-   于肠球菌选择性培养基           (青岛高科技工业园海博生
              cus garvieae) 后的成活率   [23-24] 。                  物技术有限公司)。为最大限度减少采样对鱼体的
                   硒  (Se) 作为一种必需的微量元素，在适宜浓                    应激反应，所有采样操作前均使用麻醉剂                    MS222
              度下通过免疫调节、抗氧化防御及抗肿瘤等多种                            (Sigma-Aldrich，美国) 以  100 μg/mL  浓度对鱼体进
              机制发挥关键生物学功能              [25-26] 。研究证实，酿         行麻醉处理。采用        MRS  选择性培养基、肠球菌选
              酒 酵 母   (Saccharomyces cerevisiae) 和 乳 酸 杆 菌 属   择性培养基、Columbia 血琼脂培养基(青岛高科技
              (Lactobacillus) 可将无机硒   (如亚硒酸盐) 或有机硒             工业园海博生物技术有限公司) 及革兰氏染色观察
              (如硒代蛋氨酸) 转化为更高生物相容性和更低细                          菌体形态。菌株的生理生化特性采用微生物生化
              胞毒性的硒纳米颗粒           (SeNPs) [27-29] 。与单一益生菌      鉴定管    (青岛高科技工业园海博生物技术有限公
              相比，富硒粪肠球菌对金黄色葡萄球菌                   (Staphylo-   司) 进行鉴定。本研究中大口黑鲈的使用严格遵循
              coccus aureus) 展现出良好的体外抑菌活性 ；富                   动物伦理 委员会批准的动物福利法规、 指南及相
                                                    [30]
              硒益生菌在小鼠         (Mus musculus) 肝纤维化模型中           关政策。

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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