Page 30 - 《水产学报》2025年第12期
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李伟嘉,等 水产学报, 2025, 49(12): 129602
50 * GFP 疏水性的蛋白。蛋白结构预测分析发现,斑马
鱼
为跨膜蛋白,这与酿酒酵母
seipin-GFP-24
(Saccharo-
seipin
mRNA 相对表达量 relative mRNA expression 30 myces cerevisiae)、黑腹果蝇 (Drosophila melano-
40
gaster) 和人
。
[6, 18-19]
(Homo sapiens) 相同
2
脂滴的生成
哺乳动物中的研究表明,TG
1
通过自身形成寡聚体调控
分
TG
配,在促进脂滴生成和维持脂滴大小中发挥重
0
要功能,从而实现脂滴的可控生长
1 2 * 3 4 5 * 6 过程中,seipin [20-22] 。为了
不同基因 探究 在 代谢中的功能,本研究检测
different gene seipin TG
了 seipin 敲降和过表达后 TG 代谢相关基因表达
图 8 seipin-GFP 电转过表达 seipin 24 h 后斑马鱼肝细
的变化。酰基辅酶 A,二酰基甘油酰基转移酶
胞中脂代谢相关基因的 mRNA 表达量
(DGAT) 作用于 TG 合成的最后一个反应,真核
Fig. 8 Relative expression of lipid metabolism-related
生物体内具有两种序列不同源的 DGAT,即
genes in D. rerio liver cells after seipin expression was
overexpressed with seipin-GFP transfection for 24 h DGAT1 和 DGAT2。DGAT2 与 DGAT1 的不同
之处在于 DGAT2 不仅是内质网蛋白,其还可
测 TG 代谢相关基因变化发现,seipin 过表达组
以 定 位 到 脂 滴 , 促 进 脂 滴 TG 的 合 成 , 而
TG 合成相关基因 dgat1a 和 dgat1b 表达无显著
DGAT1 仅作为内质网驻留蛋白发挥功能 [23-24] 。
性差异 (P>0.05),dgat2 表达显著升高 (P<0.05);
哺乳动物中的研究发现,干扰 seipin 表达后小
在 TG 转 运 方 面 , 过 表 达 seipin 显 著 升 高 了
鼠肝脏 TG 含量升高,干扰斑马鱼 seipin 表达
mttp 基 因 表 达 (P<0.05); 而 与 对 照 组 相 比 ,
24 h 后升高的 dgat1b 和 dgat2 水平可能导致斑
seipin 过表达组 TG 分解相关基因 lpl 表达无显
著性差异 (P>0.05)(图 9)。 马鱼肝脏内 TG 含量升高。由于 DGAT2 对底物
的 米 氏 常 数 显 著 低 于 DGAT1, 有 研 究 推 测
60 * GFP DGAT2 可能在较低的浓度下酯化底物合成 TG,
seipin-GFP-36
mRNA 相对表达量 relative mRNA expression 40 * * 当干扰斑马鱼 seipin 表达显著升高,而斑马鱼肝
可能只在较高的底物浓度下起作用 。
而
50
[25]
DGAT1
后,伴随着升高
表达
seipin
36 h
3
的底物浓度,dgat1
2
表达升高可能来源
细胞内过表达
后
dgat2
1
0
由
基因编码,在将
mttp
MTP
1 2 3 4 5 6 于较低的底物浓度。 TG 转移到内
不同基因 质网腔来组装极低密度脂蛋白中发挥重要作用,
[26]
different gene 是肝脏分泌 ApoB100 所必需的 。哺乳动物研
图 9 seipin-GFP 电转过表达 seipin 36 h 后斑马鱼肝细 究发现,seipin 敲除小鼠肝脏 TG 升高的同时,
胞中脂代谢相关基因的 mRNA 表达量 [27-28]
血浆 TG 显著降低,mttp 基因表达显著下降 。
Fig. 9 Relative mRNA expression of lipid metabolism-
与之一致,干扰 seipin 表达 36 h 后斑马鱼肝脏
related genes in D. rerio liver cells after
mttp 基因显著降低。而过表达 seipin 的小鼠肝
seipin gene expression was overexpressed with
脏中 TG 含量降低,因此斑马鱼肝细胞内过表
seipin-GFP transfection for 36 h
达 seipin 后 mttp 基因显著升高也可能导致肝脏
TG 蓄积减少。但是,干扰 seipin 表达 24 h 后
3 讨论
mttp 基因显著升高和过表达 seipin 24 h 后 mttp
由于与人类疾病的密切相关性,seipin 的 基因显著降低的原因目前尚不清楚。研究表明,
[29]
功能及调控机制成为研究热点。本研究克隆获 MTP 可定位到脂滴 ,在脂滴的生成和成熟过
得斑马鱼 seipin 基因编码序列。生物信息学分 程中发挥潜在功能,敲降和过表达 seipin 不同
析表明,斑马鱼 seipin 蛋白是碱性、不稳定、 时间后 mttp 基因表达变化的不同趋势可能来自
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