Page 30 - 《水产学报》2025年第12期
P. 30

李伟嘉,等                                                                水产学报, 2025, 49(12): 129602


                      50    *                  GFP             疏水性的蛋白。蛋白结构预测分析发现,斑马
                                                               鱼
                                                                       为跨膜蛋白,这与酿酒酵母
                                               seipin-GFP-24
                                                                                                 (Saccharo-
                                                                 seipin
                  mRNA 相对表达量 relative mRNA expression  30      myces cerevisiae)、黑腹果蝇    (Drosophila melano-
                      40
                                                               gaster) 和人
                                                                                                 。
                                                                                            [6, 18-19]
                                                                          (Homo sapiens) 相同
                       2
                                                                                               脂滴的生成
                                                                   哺乳动物中的研究表明,TG
                       1
                                                                             通过自身形成寡聚体调控
                                                                                                         分
                                                                                                     TG
                                                               配,在促进脂滴生成和维持脂滴大小中发挥重
                       0
                                                               要功能,从而实现脂滴的可控生长
                           1     2 *  3    4     5 *  6        过程中,seipin                       [20-22] 。为了
                                     不同基因                      探究        在     代谢中的功能,本研究检测
                                    different gene                  seipin  TG
                                                               了  seipin  敲降和过表达后     TG  代谢相关基因表达
               图 8    seipin-GFP  电转过表达  seipin 24 h  后斑马鱼肝细
                                                               的变化。酰基辅酶          A,二酰基甘油酰基转移酶
                     胞中脂代谢相关基因的         mRNA  表达量
                                                               (DGAT) 作用于    TG  合成的最后一个反应,真核
               Fig. 8 Relative expression of lipid metabolism-related
                                                               生物体内具有两种序列不同源的                   DGAT,即
                genes in D. rerio liver cells after seipin expression was
                overexpressed with seipin-GFP transfection for 24 h  DGAT1  和  DGAT2。DGAT2  与  DGAT1  的不同
                                                               之处在于     DGAT2   不仅是内质网蛋白,其还可
              测  TG  代谢相关基因变化发现,seipin            过表达组
                                                               以 定 位 到 脂 滴 , 促 进 脂 滴       TG  的 合 成 , 而
              TG  合成相关基因        dgat1a  和  dgat1b  表达无显著
                                                               DGAT1  仅作为内质网驻留蛋白发挥功能                  [23-24] 。
              性差异    (P>0.05),dgat2  表达显著升高       (P<0.05);
                                                               哺乳动物中的研究发现,干扰                seipin  表达后小
              在  TG  转 运 方 面 , 过 表 达     seipin  显 著 升 高 了
                                                               鼠肝脏    TG  含量升高,干扰斑马鱼             seipin  表达
              mttp  基 因 表 达  (P<0.05); 而 与 对 照 组 相 比 ,
                                                               24 h  后升高的   dgat1b  和  dgat2  水平可能导致斑
              seipin  过表达组   TG  分解相关基因        lpl 表达无显
              著性差异     (P>0.05)(图  9)。                         马鱼肝脏内      TG  含量升高。由于        DGAT2  对底物
                                                               的 米 氏 常 数 显 著 低 于     DGAT1, 有 研 究 推 测
                      60    *                  GFP             DGAT2  可能在较低的浓度下酯化底物合成                  TG,
                                               seipin-GFP-36
                  mRNA 相对表达量 relative mRNA expression  40  *  *  当干扰斑马鱼     seipin  表达显著升高,而斑马鱼肝
                                                                         可能只在较高的底物浓度下起作用 。
                                                               而
                      50
                                                                                                        [25]
                                                                 DGAT1
                                                                                           后,伴随着升高
                                                                                  表达
                                                                            seipin
                                                                                       36 h
                       3
                                                               的底物浓度,dgat1
                       2
                                                                                         表达升高可能来源
                                                               细胞内过表达
                                                                                  后
                                                                                    dgat2
                       1
                       0
                                                                        由
                                                                               基因编码,在将
                                                                           mttp
                                                                   MTP
                           1     2    3    4     5    6        于较低的底物浓度。                       TG  转移到内
                                     不同基因                      质网腔来组装极低密度脂蛋白中发挥重要作用,
                                                                                            [26]
                                    different gene             是肝脏分泌      ApoB100  所必需的 。哺乳动物研
               图 9    seipin-GFP  电转过表达  seipin 36 h  后斑马鱼肝细   究发现,seipin    敲除小鼠肝脏        TG  升高的同时,
                     胞中脂代谢相关基因的         mRNA  表达量                                                     [27-28]
                                                               血浆  TG  显著降低,mttp     基因表达显著下降             。
               Fig. 9 Relative mRNA expression of lipid metabolism-
                                                               与之一致,干扰         seipin  表达  36 h  后斑马鱼肝脏
                     related genes in D. rerio liver cells after
                                                               mttp  基因显著降低。而过表达            seipin  的小鼠肝
                   seipin gene expression was overexpressed with
                                                               脏中   TG  含量降低,因此斑马鱼肝细胞内过表
                        seipin-GFP transfection for 36 h
                                                               达  seipin  后  mttp  基因显著升高也可能导致肝脏
                                                               TG  蓄积减少。但是,干扰             seipin  表达  24 h  后
               3    讨论
                                                               mttp  基因显著升高和过表达           seipin 24 h  后  mttp
                   由于与人类疾病的密切相关性,seipin                 的      基因显著降低的原因目前尚不清楚。研究表明,
                                                                                 [29]
              功能及调控机制成为研究热点。本研究克隆获                             MTP  可定位到脂滴 ,在脂滴的生成和成熟过
              得斑马鱼      seipin  基因编码序列。生物信息学分                  程中发挥潜在功能,敲降和过表达                   seipin  不同
              析表明,斑马鱼          seipin  蛋白是碱性、不稳定、              时间后    mttp  基因表达变化的不同趋势可能来自
              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
                                                            7
   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35