Page 27 - 《水产学报》2025年第12期

李伟嘉，等 水产学报, 2025, 49(12): 129602

基因，根据荧光定量 C 值，以 2 −∆∆C t 方法计算 负电荷残基 (Asp + Glu) 均为 30 (表 2)。编码氨
t
[17]
并归一化 ，最终使用 GraphPad Prism 7.0 软件 基酸不稳定指数为 60.21，为不稳定蛋白 (表 2)；
作图。 亲疏水性分析表示，seipin 蛋白第 36 位缬氨酸
疏水性最强 (3.822)，第 285 位谷氨酸亲水性最
1.8 数据分析
强 (−3.400)，总平均亲水性 0.107，为疏水性蛋
结果以平均值±标准误 (mean±SE) 表示。
白 (图 2)。seipin 蛋白含有 2 个跨膜域，属跨膜
使用 SPSS 25.0 进行数据分析，两组数据使用
蛋白 (图 3)。
独立样本进行 t 检验，P<0.05 表示差异显著。
2.2 在体 dsRNA 干扰 seipin 表达 24 h 后 TG
2 结果 代谢相关基因变化
DsRNA 腹腔注射斑马鱼 24 h 后取肝脏检
2.1 斑马鱼 seipin 基因克隆与序列分析
测 seipin 表达变化发现，与对照组相比，靶向
斑马鱼 seipin 编码序列长 1 053 bp，共编 seipin 的 dsRNA 显著降低斑马鱼肝脏内 seipin
码 350 个氨基酸 (图 1)。斑马鱼 seipin 蛋白分子 基因表达 (P<0.05)(图 4)。检测 TG 代谢相关基
式 C 1 774 H 2 800 N 468 O 509 19 因变化发现，seipin 敲降组 TG 合成相关基因
S ， 蛋 白 质 分 子 质 量 为
39.44 ku，理论等电点 7.05，属碱性蛋白。此蛋 dgat1a 表达无显著性差异 (P>0.05)，dgat1b 表
白 350 个氨基酸中，正电荷残基 (Arg + Lys) 和 达显著升高 (P<0.05)，dgat2 表达呈下降趋势 (P>

图 1 斑马鱼 seipin 基因编码序列碱基以及氨基酸序列分析
Fig. 1 Nucleotide and deduced amino acid sequences of seipin gene

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