Page 42 - 《水产学报》2025年第7期
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陈庆宇,等 水产学报, 2025, 49(7): 079104
适应机制以应对捕食风险更大的淡水环境。其 rerio) 在皮肤提取液 (浓度为 3.5 mL/L) 处理 14 d,
中化学警示信号引起的惊恐反应在提高个体在 其运动和垂直活动减少,表现出焦虑行为 [17] 。
自然环境中的生存能力、适应新环境、躲避捕 然而,大量关于化学警示信号的研究聚焦于即
食者及群体间信息交流中起着重要的生态作用。 时的行为反应,对长期刺激下行为影响的研究
化学警示信号引起的惊恐反应存在种间差 尚不深入。
异,且种内个体间反应也有所不同 [1,6] 。研究结 斑马鱼是一种典型的模式生物,具有体型
果表明,当化学警示信号刺激时,鲫 (Caras- 小巧、产卵量大、幼鱼发育迅速、易于养殖等
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sius auratus) 、美洲鱥(Notropis volucellus) 和杂 特点,且斑马鱼对化学警示信号有着明显的惊
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色美洲鱥(N. texanus) 等鱼类出现横冲直撞、 恐反应行为,是研究应激行为的主要模式生
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快速摆尾的行为反应;黑头软口鲦 (Pimephales 物 。因此,本研究以斑马鱼为对象,通过皮
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promelas) 、溪刺鱼 (Culaea inconstans) [10] 等鱼 肤提取液刺激斑马鱼,研究斑马鱼的化学警示
类则会增加聚集、躲藏或减少活动以降低被 信号行为反应特征及其作用浓度和有效时长特
捕食的风险;细镖鲈 (Etheostoma exile)、黑体镖 性,进一步探究不同浓度长时间刺激下个体的
鲈 (E. nigrum) [11] 和 夏 大 鮈 鱥 (Hybopsis aestiv- 行为特征变化。相关研究不仅能够丰富鱼类化
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ali) 等鱼类则会出现游动减弱,甚至僵滞的行 学警示信号功能特性研究,为基于化学警示信
为反应。总的来说,惊恐反应使得鱼类个体产 号驯化鱼类以增强个体行为反应提高增殖放流
生有目标导向的回避或寻求庇护的行为反应 。 成活率提供理论支撑。
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此外,鱼类能够区分同种和异种的化学警示信
号,对同种个体皮肤提取液的惊恐反应比异种 1 材料与方法
更为强烈 。Mirza 等 [13] 在鲑科 (Salmonidae) 鱼
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1.1 实验对象
类的化学警示信号研究中发现,相较于异种皮
肤提取液,美洲红点鲑 (Salvelinus fontinalis)、 实验用斑马鱼体长 (3.38±0.07) cm,体重
褐鳟 (Salmo trutta) 和虹鳟 (Oncorhynchus mykiss) (0.36±0.15) g,购自南京一树梨花公司生物科技
对同种皮肤提取液表现出更高频率的反捕食行 有限公司,养殖于中国水产科学研究院东海水
为;大鳞大麻哈鱼 (O. tshawytscha) 在接受同种 产研究所循环水系统中。养殖用水由自来水充
皮肤提取液刺激下比接受剑尾鱼 (Xiphophorus 分曝气后进入循环水系统,水温 (25.0±1.0) °C,
helleri) 皮肤提取液刺激表现出更高水平的反捕 盐度 0.26,溶解氧 5~8 mg/L,pH 维持在 7.0~
[12]
食行为 。 7.5,自然光周期 (L∶D=14 h∶10 h)。循环水系
研究表明,惊恐反应行为的差异还与化学 统利用活性炭过滤,所有使用的工具均使用次
警示信号的浓度、环境因素、鱼类的性别和年 氯酸钠消毒。每天投喂初孵卤虫 (Artemia sal-
龄等因素有关。如黑头软口鲦在皮肤提取液原 ina) 3 次,喂食后 1 h 虹吸出粪便。实验过程中
液 (0.119 cm /mL) 和 10 倍稀释下表现出高频率 操作人员严格遵守中国水产科学研究院东海
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的僵滞行为,而随着刺激浓度稀释至 100 倍和 水 产 研 究 所 实 验 动 物 相 关 伦 理 规 范 (IACUC
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1 000 倍,其探索行为的反应潜伏期明显增加 。 #160413)。
相较于生理盐水的对照,金尾雀鲷 (Pomacen-
1.2 斑马鱼皮肤提取液储液的制备
trus chrysurus) 在同种皮肤提取液刺激下具有更
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强的学习识别能力 。此外,Brown 等 [16] 发现 为了避免麻醉剂成分对化学警示物质的
暴露于 0.1 cm /mL 同种警示信号下的孔雀花鳉 干扰和影响,用于制备皮肤提取液的斑马鱼于
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(Poecilia reticulata) 表现出明显的反捕食行为, −20 °C 快速致死。稍解冻后,解剖斑马鱼背部
且反应强度随着警示信号浓度的降低而逐渐减 两侧皮肤、剔除肌肉等杂质,使用 75% 的乙醇
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小。Durajczyk 等 的研究表明,长期暴露于一 棉球轻轻拭干血迹及黏液,并用超纯水轻轻漂
定浓度 (0.003 4 g/mL) 皮肤提取液下的鲫群体, 洗。随后,称重皮肤并置于冰上剪碎,放入预
其个体之间的距离增加。然而,皮肤提取液刺 冷的超纯水中,使用冷冻研磨仪 (JXFSTPRP-
激过强也会对个体造成应激,斑马鱼 (Danio CLBSC,净信) 6 800 r/min 研磨 30 s×3 次匀浆,
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