Page 44 - 《水产学报》2025年第7期

陈庆宇，等 水产学报, 2025, 49(7): 079104

光暗测试鱼缸如图 1-b 所示，将其分成左 故组间差异采用非参数检验，即两组数据使用
右大小相等的两个区域，在四周和底部分别贴 Mann-Whitney U 检验，多组数据使用 Kruskal-
上不透明的白纸和黑纸，制备成亮区和暗区。 Wallis H 检验和 All pairwise 事后检验以分析差
测试开始时，同上述转移和适应方法，记录 异。数据分析使用 IBM SPSS Statistics 22 软件

6 min 内实验鱼进入亮区的次数和总时间 (s)、 进行统计分析，文中数据采用中间值±四分位数
僵滞行为的次数和持续时间 (s) 以及进入暗区的 间距表示。

潜伏期 (s)。
新物体测试鱼缸如图 1-c 所示，以鱼缸底 2 结果
面对角线为界，将鱼缸分割成两个区域，在其
2.1 斑马鱼警示物质细胞观察
中一个区域的角落放入一个圆柱形物体 (直径
4 cm，高 6 cm)，称该区域为有物体区，另一个 化学警示物质由皮肤中的警示物质细胞释
区域为无物体区。测试开始时，同上述转移和 放，在 PAS 染色下细胞质不显色，区别于呈蓝
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适应方法，记录 6 min 内斑马鱼的行为轨迹， 色细胞质染色的黏液细胞 。斑马鱼警示物质
包括在有物体区和无物体区所花费的时间 (s) 和 细胞的细胞质在 PAS 染色下无反应，而细胞核
跨越的格子数。上述行为测试均以斑马鱼尾巴 呈蓝紫色；区别于蓝色细胞质 PAS 染色的黏液
通过视为通过。每处理组各测试 15 尾不同的斑 细胞 (图 2)。组织分布显示，警示物质细胞位于
马鱼。 表皮中间层，呈椭圆形、圆形或细长状；细胞

相对较大 [ 平均直径为 (15.8±3.7) μm]、轮廓清
1.6 数据分析
晰，排列整齐。

为了避免观察者不同所导致的主观偏差，
行为测试数据均由同一人记录和分析。行为学 2.2 皮肤提取液刺激下斑马鱼的行为特征分析
数据通过 Shapiro-Wilk 检验均不符合正态分布， 通过向水体添加皮肤提取液作为实验组或

2 1 4 3

50 μm
图 2 斑马鱼皮肤 PAS 染色
1.警示物质细胞；2.黏液细胞；3.颗粒细胞；4.表皮层。
Fig. 2 PAS-staining of D. rerio skin
1. alarm substance cells; 2. mucus cells; 3. granular cells; 4. epidermis.

蒸馏水作为对照组，观察和记录斑马鱼的惊恐 结果表明，斑马鱼皮肤提取液中的化学警示物
反应行为特征。结果显示，皮肤提取液刺激下， 质能够引起长时间的多次僵滞和潜底的行为
斑马鱼首次出现僵滞行为的时间和次数与蒸馏 特征。

水对照组无显著差异 (P>0.05，N=15)，而首次
2.3 不同浓度皮肤提取液下斑马鱼的行为特征
僵滞行为持续时间和僵滞行为总时间显著高于
分析
对照组 (P<0.01，N=15)；突然加速游动次数和
缸壁处累计时间与对照组无显著差异 (P>0.05， 通过对 5.5 mg/mL 的皮肤提取液原液进行
N=15)； 而 在 鱼 缸 底 部 三 分 之 一 处 累 计 时 间 灭菌超纯水 10、30、50 和 100 倍稀释，研究不
(P<0.01，N=15) 和底部累计时间显著高于对照 同浓度化学警示信号作用下斑马鱼的惊恐反应
组 (P<0.001，N=15)；此外，跨越格子的次数与 行为变化。行为测试结果表明，与原液刺激相
蒸馏水对照组无显著差异 (P>0.05，N=15)(表 1)。 比，10 倍、30 倍和 50 倍稀释下斑马鱼的僵滞

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