Page 27 - 《水产学报》2025年第6期

2025, 49(6): 069403 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA

DOI: 10.11964/jfc.20230213905

中国花鲈 IgM 重链 (IgMH) 和 MHCⅡβ 基因
的克隆及表达分析

1,2*
3
1,2
雷丽娜 ， 高 谦 ， 王 伟 ， 孙兆盛 ， 罗 璋 ， 刘其根 1,2 第一作者：雷丽娜，从事鱼类免疫学
1,2
1,2
与 病 害 防 控 研 究 ， E -mail ：
1. 上海海洋大学，水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306；
leilina1206@163.com

2. 上海海洋大学，国家海洋生物科学国际联合研究中心，上海 201306；3. 天津
农学院水产学院，天津市水产生态及养殖重点实验室，天津 300384

摘要：
【目的】进一步了解中国花鲈适应性免疫机制在病害防治中的作用。
【方法】本研究通过荧光定量 PCR (RT-PCR) 和快速扩增 cDNA 末端
(RACE) 技术克隆获得了免疫球蛋白 M 重链 (IgMH) 和主要组织兼容性
复合体 MHC II β 基因的全长；通过实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 检测 通信作者：高谦，从事鱼类免疫学与
病害防控研究，E-mail：qgao@shou.
其在中国花鲈各组织的分布情况以及 LPS、Poly (I:C) 刺激及迟缓爱德 edu.cn

华氏菌人工感染后其对应 mRNA 水平的表达变化情况；实验构建了 资助项目：国家重点研发计划 (2018YFD
0900605)
IgMH-pET21d、IgMCH -pET21d 和 MHCⅡβ-pET21d 原核重组表达质
1-2
粒，进行重组蛋白表达，并通过分子筛层析技术纯化中国花鲈 IgMH、 收稿日期：2023-02-12
修回日期：2023-07-18
IgMCH 1- 2 和 MHCⅡ β 重组蛋白，进而制备了抗中国花鲈 IgMH 的多克
文章编号：
隆抗体。 1000-0615(2025)06-069403-18
中图分类号：Q 785；S 942.5
【结果】中国花鲈 IgMH 和 MHCII β 的 cDNA 全长分别为 1 977 bp 和 文献标志码：A
1 242 bp；二者在鳃、脾脏和头肾等免疫相关组织中对应 mRNA 表达
作者声明本文无利益冲突
量较高；LPS、Poly (I:C) 刺激及迟缓爱德华氏菌人工感染中国花鲈导
© 《水产学报》编辑部(CC BY-NC-ND 4.0)
致鳃、脾脏和头肾中这两个基因的表达水平发生显著变化，表明 Copyright © Editorial Office of Journal of
Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)
IgMH 和 MHCII β 均参与了中国花鲈的抗感染免疫反应；此外，抗中
国花鲈 IgM 的多克隆抗体能与中国花鲈全血清发生强烈反应，与鳜全
血清弱反应，与大口黑鲈和草鱼血清不发生反应，推测其反应强度反
映了物种间亲缘关系的远近。
【结论】本研究首次克隆了中国花鲈的 IgMH 和 MHCⅡβ 基因全长，
表达了 IgMH 和 MHCⅡβ 原核重组蛋白，制备了抗中国花鲈 IgM 的多
克隆抗体，揭示了 IgMH 和 MHCⅡβ 参与中国花鲈的抗感染免疫应答，
为深入研究中国花鲈的免疫调控机制和疾病防控策略奠定了基础。
关键词: 中国花鲈；IgMH；MHCⅡ β；表达调控；蛋白纯化

鱼体受到病原感染时先天免疫系统率先发挥作用，同时会激活鱼
类特异性免疫应答。在鱼类特异性体液免疫反应中起关键作用的是
免疫球蛋白 (immunoglobulin, Ig) 。硬骨鱼类的 Ig 包括 IgM、IgD、
[1]
IgZ/IgT 及 IgM-IgZ 嵌合体等类型 [2-3] ，其中 IgM 是大部分硬骨鱼血清
[2]
[4]
中主要的免疫球蛋白 。IgM 可衔接先天和适应性免疫系统 ，具有激
中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries https://www.china-fishery.cn
1