Page 161 - 《水产学报》2025年第6期

程庚，等 水产学报, 2025, 49(6): 069613

表 5 三种途径诱导长牡蛎“海大 2 号”四倍体稚贝 (60 日龄) 倍性结果
Tab. 5 Ploidy results of three pathways on tetraploid induction of C. gigas "Haida No.2" (60 d)
诱导条件 induction condition
倍性
CB 低渗 hypotonic treatment
ploidy
2n♀+2n♂ 3n♀+2n♂ 2n♀+4n♂ 2n♀+2n♂ 3n♀+2n♂ 2n♀+4n♂
2n 13(26%) 4(8%) 2(4%) 17(34%) 25(50%) 3(6%)
3n 35(70%) 6(12%) 43(86%) 33(66%) 10(20%) 45(90%)
4n 2(4%) 40(80%) 5(10%) 0 15(30%) 2(4%)
注：括号外的数字表示测定各种倍性个体数量，括号内的数字表示该种倍性个体数量占总测定数量的比例。
Notes: Numbers outside brackets indicate the number of individuals of each ploidy detected, and numbers inside brackets indicate the proportion of
individuals of that ploidy to the total number detected.
幼虫受精卵产生不可逆转的毒害作用，严重影 3.2 幼虫存活率和幼虫与稚贝倍性
响了受精卵正常生理活动有关。诱导时机和诱
在幼虫阶段，处理组幼虫存活率均低于二
导持续时间则直接影响极体的排放。诱导试剂
倍体对照组，且在 8 日龄之前处理组幼虫存活
过早或诱导持续时间过长会导致同时抑制第一
率均明显降低，这可能与诱导剂对幼虫的毒害
极体和部分第二极体，会导致非整倍体的产
作用以及诱导过程中产生的大量非整倍体死亡
[27]
生 ，而诱导试剂过晚或诱导持续时间过短则
[30]
有关 。然而，在三种途径下，CB 和低渗处理
难以有效抑制住极体的排放，导致诱导失败。
组幼虫存活率也存在一定差异。这可能与幼虫
除以上可控因素之外，卵子发育同步性也会对
群体中不同倍性幼虫存活率不同相关。通过途
幼虫四倍体率产生很大影响 。因此，有必要
[13]
使用同批次人工繁育且同步促熟的长牡蛎“海 径Ⅰ(2n♀+2n♂) 诱导四倍体时，CB 处理组幼虫
大 2 号”二倍体、三倍体及四倍体群体，同时通 由二倍体、三倍体及四倍体组成，而低渗处理
过显微镜检查精卵成熟度并进行预实验，及时 组仅由二倍体和三倍体幼虫组成。而在稚贝阶
移除卵子受精率低、极体排除时间点异常的个 段，CB 处理组四倍体率仅为 4%，表明诱导产
体，最大限度降低由于卵子发育不同步对幼虫 生的四倍体幼虫在幼虫大量死亡，这可能是
四倍体率的影响。 CB 处理组幼虫存活率低于低渗处理组的部分原
此外，即使使用相同诱导途径或诱导剂， 因。Qin 等 [29] 使用 CB 通过途径Ⅰ(2n♀+2n♂) 诱
不同牡蛎种间的最佳诱导途径也存在一定差异。 导香港牡蛎和熊本牡蛎四倍体时发现，在处理

Liang 等 [28] 使用 CB 通过途径Ⅱ(3n♀+2n♂) 诱导 组培育过程中，幼虫四倍体率呈现不断降低的
福建牡蛎 (C. angulata) 四倍体时，最佳处理浓 趋势，与本研究结果一致。同样，通过途径
度要高于本实验研究结果；使用低渗通过途径 Ⅲ(2n♀+4n♂) 诱导四倍体时，在稚贝阶段，CB
Ⅰ(2n♀+2n♂) 诱导时，处理的最佳盐度则高于 和低渗处理组从幼虫到稚贝四倍体率降幅分别
本实验研究结果；使用途径Ⅰ(2n♀+2n♂) 时， 为 50.45% 和 21.51%，说明在幼虫阶段四倍体
通过低渗处理四倍体率较低，而在本研究中则 幼虫大量死亡，且 CB 处理组幼虫死亡比例远
并未诱导出四倍体幼虫。Qin 等 [29] 使用 CB 通 大于低渗处理组，因此也能解释 CB 处理组幼
过途径Ⅰ(2n♀+2n♂) 诱导香港牡蛎 (C. hongkon- 虫存活率低于低渗处理组。途径Ⅰ(2n♀+2n♂)
gensis) 和熊本牡蛎 (C. sikamea) 四倍体时，诱导 和途径Ⅲ (2n♀+4n♂) 诱导四倍体的共同点是这
的最佳处理时机和处理时长也与本研究实验结 两种途径均通过二倍体卵子直接诱导四倍体牡
果存在一定差异。这可能是由于物种本身生理 蛎。大量研究人员将四倍体牡蛎幼虫大量死亡
特性的影响。同时，即使使用一样的处理方法， 归因于“细胞数量不足”假说，即四倍体牡蛎细
在具体操作过程中也需要根据实际情况进行适 胞具有正常二倍体牡蛎细胞 2 倍的遗传物质，
当调整。因此，在进行大规模诱导操作时，最 而诱导获得的四倍体牡蛎细胞质含量与正常二
好先做预实验，确保诱导路线的正确性，然后 倍体牡蛎相当，导致核质比异常，因而造成有
进行大规模诱导，以此保证较高的四倍体率。 丝分裂异常和细胞数量的下降，认为卵细胞大

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