Page 47 - 《水产学报》2025年第5期
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胡澄溪,等 水产学报, 2025, 49(5): 059104
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图版 酿酒酵母细胞经 Bodipy 染色后的显微图片
1. Scy62,2. H1246,3. tYES2,4. tDGAT1,5. tDGAT2A,6. tDGAT2B,7. tDGAT2C,下同。油体被染成绿色。
Plate Fluorescence micrographs of S. cerevisiae cells stained with Bodipy
1. Scy62, 2.H1246, 3. tYES2, 4. tDGAT1, 5. tDGAT2A, 6. tDGAT2B, 7. tDGAT2C, the same below. The oil bodies were denoted in green.
P>0.05),约为 Scy62菌株 (OD 600 =3.43) 的 75%, 细胞中,无论是类型 I 还是类型Ⅱ的 DGAT,均
这不仅说明了 pYES2 空载的转化对酵母进入稳 能使酵母稳定生长期时的细胞 OD 60 0 值达到
定生长期的细胞 OD 60 0 值没有产生显著的影响, 3.4~3.5,与 Scy62 菌株的值相近 (图 1)。说明缺
也说明了 TAG 合成相关的基因在被扰动后,会 刻缘绿藻的 DGAT 能使 TAG 合成缺陷型酵母的
细胞生长能力恢复到野生型的水平。同时还发
降低酵母稳定生长期时的细胞密度,尽管 Sand-
现,tDGAT2A、tDGAT2B 和 tDGAT2C等转基
ager 等 [14] 认为 TAG 不是酵母生长的必需物质。
因酵母株,均较 Scy62 菌株提前 8~16 h 进入细
不过,H1246 和 tYES2 菌株的生长速率 (0.08/h)
胞生长的稳定期 (图 1),因而,其生长速率 (依
与 Scy62 菌株 (0.09/h) 接近。
次为 0.11/h、0.14/h 和 0.14/h) 快于 Scy62 菌株。
但将缺刻缘绿藻的 4 个 DGAT 转化至酵母
但 tDGAT1 菌株因迟滞期延长,致使其 OD 600
值需要 才达到峰值 =3.51),这样,
4 72 h (OD 600
它的生长速率只有 0.05/h,说明缺刻缘绿藻的
引入对酵母细胞进入稳定生长期所需的
DGAT
600 nm 的光密度值 OD 600 value 2 Scy62 时间因基因而异。 2.23 和 和 tYES2
3
在批次培养的稳定生长期,H1246
H1246
菌 株 的 单 位 体 积 生 物 量 分 别 为
2.17
tYES2
tDGAT1
mg/mL (二者之间无显著差异,P>0.05),约为
Scy62
tDGAT2A
1
tDGAT2B
tDGAT2C 菌 株 (4.33 mg/mL) 的 50% (图 2); H1246和
tYES2 菌株在稳定生长期时的低水平体积生物
0 量应与它们的低细胞 0 值 (图 1) 有关。转
0 16 32 48 64 80 OD 60
培养时间/h 缺刻缘绿藻 DGAT 的 4 个菌株,其体积生物量
incubation time 虽较 H1246 菌株显著增加 (P<0.05),但却显著
图 1 酿酒酵母的生长曲线 低于 Scy62 菌株的水平 (P<0.05) (图 2)。结合上
Fig. 1 Growth curve of S. cerevisiae 述转目的基因与野生型的酵母在稳定生长期时
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