Page 167 - 《水产学报》2025年第5期
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车行,等                                                                  水产学报, 2025, 49(5): 059114

              ORF 模块 (ORFA     和  ORFB) 组成,ORFB 编码             ICESag1535 核心元件的菌株共 78 株,分别为
              位置相对      ORFA 分别具有      (−1 bp) 和 (+1 bp) 的     2014—2016 年收集的 26 株,2020—2021 收集
              移码特征,当转座被激活时,ORFB 发生程序                           的 52 株,核心元件的携带率分别为 78.8% 和
              化移码,使      ORFA 和 ORFB 处于同一阅读框中,                 96.3%。在所有具有 ICEs 核心元件的菌株中,
              形成融合蛋白 ORFAB,成为具有活力的转座酶                          同时检出 Ser   IME 、Ser 、Ser  和 Ser  的有   76 株,
                                                                                        M
                                                                                  I
                                                                                               E
                。而 IS982 复合转座子中仅 3′端的 IS982 具有                                                         IME
              [25]                                             2 株具有 ICE 核心元件的菌株未检出 Ser                  ,
              转座活力。此外,7           个 IS 元件的 C-端皆具有              可能使用其他类型的重组酶。

              DDE 特征性基序,TSPSI 和多复合转座元件同                        2.8    ICESag1535 水平转移验证
              时存在可介导 ICE 形成的多种水平转移机制。
                                                                   根据细菌表面荚膜多糖的不同,无乳链球

              2.6    ICESag1535 同源性比较                          菌可分为不同的血清型。WC1535 为 Ⅰa 血清
                                                               型,cpsG 引物扩增产物为 272 bp,而 Sag158
                   Tn5252 是链球菌属最早被鉴定的接合型转
                                                               为Ⅲ型血清型,cpsG-3 扩增产物为 352 bp。通
              座子,此后,不同来源的 Conj             Tn5252  型 ICEs 不
                                                               过接合实验成功获得 ICESag1535 转入 Sag158
              断被报道 。ICESa2603 家族 ICEs 以人无乳链
                       [26]
                                                               的接合子 Sag158::ICESag1535,引物         attICE 检
              球菌株 2603V/R 编码的 ICE_Sag2603_rplL 为代
                                                               测到了环状中间体         (图  6)。
              表,具有 30 个骨架基因 (图           5,ICESa2603 中黑
                                                                   接合子中 ICESag1535 插入在受体菌 Sag158
                                        [27]
              色、蓝色、灰色箭头所示) ,属于 Conj                   Tn5252   基因组 mutT 基因内,测序发现接合子 attL 和
              型接合模式。ICE_SsuT15_mutT 来自猪链球菌
                                                               attICE 位点与 WC1535 上完全相同,但在 attR
                  [28]
              T15 ,缺失 AbiEii/AbiGii 蛋白,与 ICESag1535
                                                               的测序结果中发现 1 537 bp 的插入元件 IS30 位
              都编码三串联丝氨酸整合酶;根据 ICEs 结构组
                                                               于 Ser  终止密码后 (+3 bp) 处,并使插入位点
                                                                    E
              成,ICESag1535 和 ICE_SsuT15_mutT 都鉴定为
                                                               前 14 bp 序列形成重复,分别位于 IS30 两端
                                  [29]
              类 ICESa2603 型 ICEs ,接合模式为 Conj
                                                      Tn5252   (图  6-f),比对发现在 WC1535 和 Sag158 基因组
              型。这种接合模式的 ICEs 存在于多种微生物内,
                                                               上其他位置存在与 IS30 完全相同的拷贝。

              且结构保守,具有种间扩散能力。

                                                               3    讨论
              2.7    ICESag1535 在 罗 非 鱼 无 乳 链 球 菌 中 的
              检测
                                                                   类 ICESa2603 家族的 ICEs 被大量报道,
                   87  株 罗 非 鱼 源 无 乳 链 球 菌 中 , 具 有             编码 Conj       型接合元件,可发生跨种扩散,
                                                                        Tn5252

                      Tn5252
                    ٫က৽౯ऩ                   20 000              40 000             60 000
                    S. pneumoniae
                     (48 559 bp)                                              tyR
                     ICESa2603  repA
                    无乳链球菌
                    S. agalactiae
                     (54 792 bp)                                                     tyR int
                  ICE_Sag1535_mutT  repA
                    无乳链球菌
                    S. agalactiae
                     (74 108 bp)  repA                                                          Ser I  int  Ser E  int
                                                                                                 Ser M  int
                  ICE_SsuT15_mutT
                   猪链球菌 S. suis
                     (56 097 bp)  repA                                        Ser I  int  Ser E  int

                                                                                Ser M  int
                                                图 5    ICESag1535 比对示意图
              比例示意图,ICESag1535 与无乳链球菌 ICESa2603、肺炎链球菌中 Tn5252 、猪链球菌 T15 中的 ICE_SsuT15_mutT 线性比对。Conj Tn5252  家
              族的 25 个保守核心基因用黑色箭头指示,灰色箭头表示转座酶和整合酶,绿色箭头表示抗性基因,4                      个 ICEs 之间的同源基因分别用蓝色
              箭头表示,同源区域用灰色阴影表示。
                                Fig. 5 Schematic diagram of the ICESag1535 and linear DNA comparison
              Schematic, but to scale, representation of ICESag1535 and linear DNA comparison against ICESa2603 from S. agalactiae 2603V/R and fragments of
              Tn5252 from S. pneumoniae and ICE_SsuT15_mutT from S. suis T15 strain. The 25 conserved core genes of the Conj Tn5252  family are indicated by black
              and dark gray arrows, green arrow indicate antibiotic gene, blue arrows indicate homologous genes, homologous regions are shaded in gray.
              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
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