Page 190 - 《水产学报》2023年第1期

孙东方，等 水产学报, 2023, 47(1): 019614

2.0 40
a a
35
1.6
30
相对表达量 Relative expression 1.2 相对表达量 Relative expression 25 b
20
0.8
15
10
0.4
0 5 b b b b
0
1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7
组织 性腺组织
tissues gonad tissues
(a) (b)
图 2 长牡蛎 Htatip2 的表达情况
(a) 各组织，1.肌肉，2.雄性性腺，3.消化腺，4.外套膜，5.唇瓣，6.血细胞，7.鳃，8.雌性性腺。(b) 雌性性腺不同发育时期，1. Res-2n，二
倍体休止期；2. Pro-2n，二倍体增殖期；3. Mat-2n，二倍体成熟期；4. Res-3n，三倍体休止期；5. Pro-3n，三倍体增殖期；6. Mat-3nα，三
倍体成熟期 α；7. Mat-3nβ，三倍体成熟期 β，不同字母表示差异显著 (P<0.05)
Fig. 2 Relative expression of Htatip2 in C. gigas
(a) different tissues, 1. muscle, 2. male gonad, 3. digestive gland, 4. mantle, 5. labial palp, 6. hemocyte, 7. gill, 8. female gonad. (b) different gonad devel-
opment stages of females, 1. Res-2n, diploid resting stage; 2. Pro-2n, diploid proliferating stage; 3. Mat-2n, diploid mature stage; 3. Res-3n, triploid rest-
ing stage; 4. Pro-3n, triploid proliferating stage; 5. Mat-3nα, triploid mature stage α; 6. Mat-3nβ, triploid mature stage β; different letters indicate signific-
ant difference (P<0.05)

0 kb 1 kb Htatip2
[0 - 1.00]
2n-1
2n-2
2n-3
3nα-1
3nα-2
3nα-3
3nβ-1
3nβ-2
3nβ-3

图 3 长牡蛎 Htatip2 在二倍体和三倍体雌性性腺中的 DNA 甲基化谱
2n-1、2n-2、2n-3、3nα-1、3nα-2、3nα-3、3nβ-1、3nβ-2 和 3nβ-3 分别表示二倍体、三倍体 α 和三倍体 β 的 3 个生物学重复，线的高度为
DNA 甲基化水平 (0~1.00)，灰色框表示差异甲基化区域，Htatip2 表示基因结构，箭头表示转录方向
Fig. 3 DNA methylation profiles of C. gigas Htatip2 in diploid and triploid female gonads
2n-1, 2n-2, 2n-3, 3nα-1, 3nα-2, 3nα-3, 3nβ-1, 3nβ-2 and 3nβ-3 represent three biological replicates of diploid, triploid α and triploid β, respectively, the
height of the line represents the level of DNA methylation (0-1.00), the gray box indicates differentially methylated regions, Htatip2 represents the gene
structure, and the arrow indicates the direction of transcription
位点上游 2 kb 区域内选择 310 bp (包含 21 个 CpG 的甲基化水平在不同时期的性腺中无显著差异。
位点) 进行甲基化检测。利用亚硫酸氢盐测序检测 在 12~14 CpG 位点的甲基化模式分析表明，三倍
了 21 个 CpG 位点在二倍体雌性长牡蛎性腺的休 体成熟期 β 的甲基化水平最高，为 80.10%±3.12%，
止期、增殖期和成熟期，以及三倍体长牡蛎可育 二倍体成熟期甲基化水平最低，为 45.10%±2.44%。
型 (3nα) 和不育型 (3nβ) 成熟期的 DNA 甲基化水 方差分析表明，在 12~14 CpG 位点间，二倍体休
平。对 21 个 CpG 位点的启动子的甲基化水平分 止期、增殖期和三倍体成熟期 β 的甲基化水平显
析发现，在二倍体成熟期的甲基化水平最低，为 著高于二倍体成熟期和三倍体成熟期 α。二倍体的
65.24%±0.62%，而三倍体成熟期 β 的甲基化水平 DNA 甲基化水平伴随着性腺的发育而降低 (图 4)。
最高，为 82.38%±2.86%。方差分析显示，Htatip2

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