Page 189 - 《水产学报》2023年第1期

孙东方，等 水产学报, 2023, 47(1): 019614

域分别为 49.54% 和 43.06%；与鱼类虹鳟 (Onco- 在三倍体成熟期不育型 (3nβ) 中，Htatip2 表达水
rhynchus mykiss) 和黄河鲤 (Cyprinus carpio haemat- 平显著低于成熟期 α，约为成熟期 α 的 0.26 倍，
opterus) 的同源性均为 51.64% (图 1-a)。系统进化 表明 Htatip2 在不育型牡蛎性腺的低表达可能与
树显示，长牡蛎 Htatip2与巨蛎属中美洲牡蛎的 3nβ 的不育有关 (图 2-b)。
Htatip2 聚为一支，然后与虾夷扇贝聚在一起 (图 1-
2.3 二倍体和三倍体长牡蛎成熟期 Htatip2 的
b)。长牡蛎 Htatip2 与其他无脊椎动物的 Htatip2
形成了一个有别于脊椎动物同源物的主要群体 DNA 甲基化模式
(图 1-b)。 用 IGV 软件展示了该基因在二倍体成熟期、
三倍体成熟期可育型 3nα 和成熟期不育型 β 的甲
2.2 Htatip2 在长牡蛎不同组织和性腺不同发
基化谱。Htatip2 的甲基化主要发生在外显子区域，
育时期的表达模式
在内含子区域几乎不发生 DNA 甲基化。比较可育
Htatip2 在 8 个组织中的 qPCR 结果显示，该 和不育型三倍体牡蛎的甲基化模式发现，在 Hta-
基因在各组织中广泛表达且在雌性生殖腺中表达
tip2 上游 2 kb 范围内存在差异甲基化区域，该差
量最高 (图 2-a)。Htatip2 在性腺不同发育时期的表 异甲基化区域在可育三倍体牡蛎中为低甲基化，
达水平结果显示，在二倍体中，Htatip2 在休止期 在不育型三倍体牡蛎中为高甲基化(图 3)。
和增殖期的表达水平较低，在成熟期的表达量最
2.4 Htatip2 在不同性腺发育时期的 DNA 甲基
高，分别为休止期和增殖期的 11.3 倍和 11.8 倍。
化水平
在三倍体中，Htatip2 在休止期、增殖期和成熟期
可育型 (3nα) 呈现与二倍体相似的表达模式，但 根据差异甲基化区域，在 Htatip2 转录起始

长牡蛎 C. gigas
美洲牡蛎 C. virginica
厚壳贻贝 M. coruscus
紫贻贝 M. edulis
虾夷扇贝 M. yessoensis
地中海贻贝 M. galloprovincialis
三疣梭子蟹 P. trituberculatus
凡纳滨对虾 L. vannamei
虹鳟 O. mykiss
黄河鲤 C. haematopterus
长牡蛎 C. gigas
美洲牡蛎 C. virginica
厚壳贻贝 M. coruscus
紫贻贝 M. edulis
虾夷扇贝 M. yessoensis
地中海贻贝 M. galloprovincialis
三疣梭子蟹 P. trituberculatus
凡纳滨对虾 L. vannamei
虹鳟 O. mykiss
黄河鲤 C. carpio haematopterus
(a)
长牡蛎 C. gigas
100
美洲牡蛎 C. virginica
100
虾夷扇贝 M. yessoensis

三疣梭子蟹 P. trituberculatus
100

凡纳滨对虾 L. vannamei

虹鳟 O. mykiss
100

0.10 黄河鲤 C. carpio haematopterus
(b)
图 1 长牡蛎与其他物种 Htatip2 CC3_like_SDR_a 结构域的氨基酸序列比对及进化树分析
Fig. 1 Multiple sequence alignment and NJ phylogenetic tree analysis of CC3_like_SDR_a of Htatip2 in
C. gigas and other species

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