Page 32 - 《渔业研究》2026年第2期
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第 2 期               喻大鹏等: 大眼双锯鱼        HSPA8  基因特征及其对运输胁迫的响应                           175


                      3                                        属间的系统进化性分析发现,具有较近亲缘关系的
                          亲疏水性 Hydropathy/Kyte_Doolittle
                      2
                                                               物种在系统进化树上聚类在同一分支内部;大眼双
                      1
                    得分 Score  −1 0                             锯鱼与眼斑双锯鱼优先聚为一支,所有的辐鳍鱼类
                                                               聚类为一个大分支,哺乳动物、鸟类动物、爬行动
                     −2
                     −3                                        物、两栖动物分别聚类后再聚类在另一大分支中,
                     −4                                        表现出了明显的进化性特征。本研究发现,HSPA8
                       0   100  200  300  400  500  600
                                                               蛋 白 具 有  HSP70s 蛋 白 家 族     个 关 键 功 能 结 构
                                   位置 Position                                           3
                                                               域——核苷酸结合域、肽结合域、C-末端结构域高
                 图 3    大眼双锯鱼  HSPA8  家族蛋白氨基酸亲/疏水性
                                                               度 保 守 , 3  个 功 能 结 构 域 在 空 间 结 构 上 相 似 ,
              Fig. 3    Hydrophobicity/hydrophilicity of amino acids in the
                                                               HSPA8  蛋白中高度保守的三级结构与特定的功能
                      HSPA8 family proteins of A. ephippium
                                                               密不可分,推测不同物种的             HSPA8  蛋白可能发挥
                  注:正值表示疏水性;负值表示亲水性。                                              [20]
                                                               着相似的生物学功能            。本研究还发现,HSPA8
                  Notes:  Positive  values  indicate  hydrophilicity;  Negative
                                                               蛋白缺乏信号肽与跨膜结构域,且具有非细胞器特
              values indicate hydrophobicity.
                                                               征基序   RARFEEL   和  EEVD  胞质型   HSPs 基序,表
               3 讨论
                                                               明其为胞质型蛋白。HSPA8          蛋白可使用      KRKH(Y)-
               3.1 大眼双锯鱼 HSPA8 氨基酸结构与进化分析                      KKDISQNKRAVRR    和   KRAVRRLRTACERAKRT
                  研究表明,HSPA8       是  HSP70s 家族主要成员之           的二分核定位信号(Bipartite nuclear localization
              一,具备有调节蛋白和维持细胞稳态的功能。HSPA8                        signal,bNLS)和    NVQDLLLLDVT(A)PLSL    的核
              与抑郁症发生有关,敲除             HSPA8  基因后,导致野           输出信号(Nuclear export signal,NES)实现核−质
              生型(Wild type,WT)L929 细胞大量死亡,继而                   穿梭,这种动态定位表明            HSPA8  蛋白可能在多个
              引起个体死亡       [16-17] 。目前  HSPA8  相关研究对象主         细胞区室中发挥作用。HSPA8            蛋白除了作为分子
              要集中在哺乳动物        [18]  和鸟类 [19]  中,而在鱼类中较         伴侣参与蛋白质折叠外,在抵抗细胞凋亡、促进细
              少。本研究克隆了大眼双锯鱼              HSPA8  基因的    CDS     胞增殖上起关键作用。研究表明,HSPA8                  蛋白在
              序列,并进行生物信息学分析,结果发现                    HSPA8      三阴性乳腺癌、结直肠癌和急性髓系白血病中过量
              蛋白具有亲水特性,与哺乳动物有非常高的相似                            表达,而且在乳腺细胞、肠细胞与白细胞表面过表
              度,表明其在进化上非常保守。对                 HSPA8  蛋白种       达,是治疗癌症的潜在靶点            [21-22] 。
                      HydropathyHydropathy

                  1.0                                                                             其他 Others
                  0.8
                 可能性 Probability  0.6


                  0.4

                  0.2
                   0
                     M S K G P A V G I D L G T T Y S C  V G  V F Q H G K V E I I  A N D Q  G  N R T  T P S Y V A F T D S E R L I G D A A K N Q V AMN P T N T V F D A
                    0           10          20          30          40         50          60          70
                                                      蛋白质序列 Protein sequence
                                        图 4    大眼双锯鱼  HSPA8  蛋白氨基酸序列的信号肽分析
                          Fig. 4    Signal peptide analysis of the amino acid sequence of A. ephippium HSPA8 protein

               3.2 大眼双锯鱼 HSPA8 在运输胁迫下的表达特点                     基因的相对表达量在不同组织中的变化趋势有所差
                  本研究发现,大眼双锯鱼              HSPA8  基因在肾         别,在鳃、肾脏、脾脏和肠道中,HSPA8                  基因主
              脏、肝脏、脾脏等免疫组织中广泛分布,并有较高                           要在运输前期上调,以应对突然出现的运输刺激,
              的表达量,在脑组织中大量表达,表明                   HSPA8  基     随着运输时间的推移,其出现下调后上调的变化,
              因可能在大眼双锯鱼体内具有维持免疫系统和中枢                           这可能是与     DNAJ 家族、GAK、CLPB        和  STIP1 蛋

              神经系统稳定的功能。在运输应激反应后,HSPA8                         白互作引发的结果。
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